Experiments were conducted to establish an in vitro AChE inhibition test system to evaluate the potency of AChE inhibition of new chemical compounds. For a fixed time inhibition test, optimal inhibition (incubation) time to evaluate their AChE inhibition potency was 10 min. for AChE inhibitors such as DFP, DDVP, and paraoxon. The concentration of new chemical compounds with an ester group for evaluation of their inhibition potency was 10 $\mu$M under 10 min. preincubation conditions. However, the stepwise inhibition test with higher concentrations seemed to be needed for other chemical compounds. For a progressive inhibition test to calculate inhibition constants such as $K_d$, $K_3$ and $K_i$, extremely low $K_d(1.3\times10-^85.6\times10^{-7})$ and $K_3$(0. 21-0.27 $min^{-1}$) were observed under lagged preincubation time (0.8-13.3 min) and low in¬hibitor concentrations $(1\times10-^92\times10-^6M)$. However, this method seemed to be useful for comparison of AChE inhibition potency among inhibitors. Differences in inhibition potency among DFP, paraoxon, and KH501 were due to the differences in $K_d$, in other words, differences in affinities between inhibitors and AChEs. Therefore, AntiChE screening should consist of two steps. The first step is to evaluate the potency of AChE inhibition based on $I_50$ valuse obtained from fixed time inhibition tests. The second step is to study inhibition patterns and characteristics of chemical compounds selected in the first step.
These studies were carried out to compare toxicological test methods of two spotted spider mite, Tetranychus urticae Koch,; and to investigate relationship between in vivo resistant level of highly acaricide-selected population, and in vitro insensitivity of the AChE in the same population to carbophenothion and ethion. The slide dip method (CV = 8.7%) was of more accuracy and suitability than that of the leaf dip method(CV=12.2%) and leaf disc method (CV= 13.6 %) in determination of the resistant levels of twospotted spider mite to acaricides. The slide dip method also had the advantages of simple treatment with different populations on a slide at the same time, standardization of post-treatement conditions and living plants exclud¬ed from the test. Even though the topical application method(CV =8.1 %) showed high accuracy, it had the demerits of the much time consuming, need of expensive equipment and difficulty of test manipulation. For a limited time, the 22nd successive carbophenothion-selected population of two-spotted spider mite showed 156- and 128-fold resistant levels to carbophenothion and ethion(both alPs), respectively. However, the 24th successive ethion-selected population revealed 64.1- and 65-fold resistant levels to ethion and carbophenothion, respectively. In the inhibition of AChE activity, the carbophenothion-selected population showed 3.3- and 2.7-fold insensitivity in AChE activity to carbophenothion and ethion, respectively. Likewise, the ethion -selected population exhibited 3- and 2.6-fold insensitivity in AChE activity to carbophenothion and ethion, respectively, as compared with that of susceptible population. As a result, a good relation was recognized between in vivo resistance to organophosphorous acaricides and in vitro insensitivity of the AChE to corresponding inhibitors.
This study was performed to investigate the effect of essential oils and ethanolic extracts of approximately 650 plant species on acetylcholine esterase (AChE) enzyme activity using Ellman's colorimetric method in 96-well microplates. The results showed that the ethanolic extracts from twig of Sophora subprostrata, twig of Phellodendron amurense, seed of Corylopsis coreana, and essential oil (EO) from Citrus paradisi, Cupressus sempervirens, Ocimum basilicum, Pinus sylvestris and Rosmarinus officinalis inhibited more than 80% of AChE activity. Among these, EO from Pinus sylvestris, C. sempervirens and C paradisi exhibited higher values of AChE inhibitory activity, which were 75, 84 and 99% at a concentration of 50 ug/ml, respectively. Finally, EO from C paradisi (grapefruit, GEO) showed the highest inhibitory activity towards AChE, which showed 91% of inhibition at a concentration of 20 ug/ml. We also examined the anti-dementia effects of GEO in mouse by passive avoidance test and Morris water maze test. The model mouse (male, ICR) of dementia (negative control) was induced by administration of scopolamine (1 mg/kg body weight). The latency time of sample group administrated with GEO (100 mg/kg, p.o.) increased significantly as compared with negative control on passive avoidance test. There were significant recovery from the scopolamine-induced deficits on learning and memory in water maze test through daily administrations with GEO (100 mg/kg, p.o.). From these results, we conclude that GEO treatment might enhance the cognitive function, suggesting that the EO of C. paradis may be a potential candidate for improvement of perceptive ability and dementia.
Yoon, Nam kyu;Kim, Byung Kwon;Ryu, Hyeon yeol;Seo, Bo Seung;Shin, Chang Ho;Kim, Kwan Kyu;Lee, Han Joo
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.8
no.3
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pp.291-296
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2022
This study was conducted on curcumin which had increased bioavailability as a potential AChE inhibitor for the treatment of neurodegenerative diseases. The purpose of this study is to confirm the in vitro neuroprotective effect on Aricumin (turmeric extract). To confirm the neuroprotective effect, AChE inhibition for Aricumin was evaluated, and cell viability was analyzed for HT-22cell, and oxidative stress (glutamate, H2O2)-induced HT-22 cytotoxicity was evaluated. As a result of the change in the AChE inhibition rate of Aricumin (Turmeric extract), it was confirmed that Aricumin at a concentration of 39.06㎍/ml or higher inhibited AChE activity by about 20% and more. And it was confirmed that the cytotoxicity of HT-22 cells induced by oxidative stress (Gluamate 5 mM and H2O2 500 µM) was significantly inhibited from 0.01 to 0.1 mg/ml concentration (p<005). These results suggest that Aricumin (turmeric extract) have potential neuroprotective effects.
Probiotics and their products, such as yogurt and cheese have been widely consumed in many countries with proven health benefits including anti-microbial activity and anti-diarrheal activity. LHFM (Lactobacillus helveticus - fermented milk) is a processed skim milk powder, fermented by a probiotics, L. helveticus IDCC3801. In the present study, we aimed to investigate the neuroprotective effects and the cognitive improvements of LHFM. LHFM itself did not show any cytotoxicity to the human neuroblastoma cell line, SH-SY5Y; however, it dose-dependently protected against glutamate-induced neuronal cell death. LHFM also attenuated scopolamine-induced memory deficit in Y-maze and Morris-water maze. In the analysis of hippocampus after a behavior test, LHFM significantly increased the acetylcholine level and also inhibited acetylcholine esterase activity. Therefore, the raised acetylcholine release partially contributes to the improvement of learning and memory by a treatment with LHFM. These results suggest that LHFM is an effective material for prevention or improvement of cognitive impairments caused by neuronal cell damage and central cholinergic dysfunction.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.10
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pp.1519-1526
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2014
This study investigated the biological activities and effects of Korean Zingiber mioga R. (flower buds and rhizome) on memory. The general composition, minerals, anti-oxidative activities, and AChE inhibitory effects were analyzed, and NORT (Novel object recognition test) and Y-Maze test in vivo were performed. The general contents (moisture, crude fat, crude protein, and crude ash; wet basis) of ZB (flower buds) were 91.96%, 0.15%, 1.99%, and 11.90%, respectively. The general contents (moisture, crude fat, crude protein, and crude ash; wet basis) of ZR (rhizome) were 75.21%, 0.53%, 2.20%, and 9.50%, respectively. The macro mineral contents (Ca, P, Na, and K) of ZB were 31.70 mg%, 15.20 mg%, 8.20 mg%, and 258.60 mg%, respectively. Inhibitory effects (IC50 value) of DPPH and ABTS radicals were higher with ZBD (flower buds water extract) than with ZBE (flower buds EtOH extract), ZRD (rhizome water extract) or ZRE (rhizome EtOH extract). AChE inhibitory effect of ZBD was higher and that of ZRD. NORT and Y-Maze test were performed with scopolamine-induced mice treated with ZBD and ZBE. In NORT, effects of ZBD and ZBE were similar to that of donepezil. In the Y-maze test, performances of ZBD and ZBE-treated mice were similar to that of the normal group. These results suggest that Korean Zingiber mioga R. has potential to be developed into a new functional food for cognition enhancement in the global food market.
To evaluate the effect of endocrine disruption chemicals (EDCs) to aquatic organisms, muddy loach (Misgurnus anguillicaudatus) was exposed to low concentration methomyl for 21 days in order to identify the effect of biomarkers and endocrine. Vitellogenin (VTG) in blood plasma, which used widely as validated biomarker for endocrine disruption, was significantly greater in male fish exposed to 0.4 mg/L and 2 mg/L methomyl, and in female fish exposed to 0.08 mg/L, 0.4 mg/L, and 2 mg/L methomyl for 21 days (p<0.05). This results suggest that methomyl have probability of endocrine disruption to organism on aquatic system. While inhibition of Acetylcholinesterase (AChE) activity and increase of DNA damage in comet assay were verified by fish exposed to methomyl, change of ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD) activity was not occurred, comparing the control group (p<0.05). Indicators at the level of organism such as condition factor (CF), hepato-somatic index (HSI), and gonado-somatic index (GSI) were not influenced by exposure of methomyl. In conclusion, these results showed the possibility of methomyl in regard to not only endocrine disruption but also impacts on biochemical biomarkers to aquatic organisms.
Park, Kee-Jai;Jung, Sung-Won;Kim, Jong-Hoon;Jeong, Jin-Woong
Applied Biological Chemistry
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v.38
no.2
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pp.141-146
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1995
Changes of physicochemical properties of citron juice prepared by two different extraction methods, rotary-crushing and belt-pressing method, were investigated during the storage at $5^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$. Temperature drop of citron juice extracted by belt-pressing method was faster than that of citron juice prepared by rotary-crushing method and its freezing point was $0.8{\sim}0.9^{\circ}C$. During the storage, pH of stored citron juice with rotary-crushing method was increased up to 3.5 after 6 months storage while that of citron juice extracted by belt-pressing method was not changed significantly during the same storage time. Acidity of rotary-crushed citron juice was reduced a little more than that of belt-pressed citron juice during the storage. However, changes of soluble solid content were influenced largely by the storage temperature than by the extraction method. Contents of formol nitrogen and vitamin C were reduced remarkably in all of stored citron juice and $92{\sim}82%$ of farmol nitrogen and $72{\sim}43%$ of vitamin C were remained after 6 months of storage. Among the changes of color value, L values were reduced in the whole stored citron juice and a and b value had a different change pattern respectively according to the extraction and storage temperature. Changes in the content of both amino acid and fatty acid compositions was also observed after same storage period. Especially, in the case of change of fatty acid composition, content of linoleic acid and linolenic acid were reduced after 6 months storage, while those of palmitic acid, stearic acid and oleic acid were increased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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