This study has been undertaken to examine the acetylcholinesterase (AChE) of electric organ from korean electtric ray(Narke japonica). Korean electric ray was caughted at Chungmu sea and transported to the laboratory, where electric organs were removed and stored at $-70^{\circ}C$ until used. Acelycholinesterase(AChE) of electric organ was purified by affinity column that was prepared with dicaproyl-methylpyridinium linked to Sepharose 4B. Upon purification, the specific activities in Ellman unit were increased by 52 and 39 times for high salt soluble AChE (HSSE, 870.86 $\DeltaOD/min/geam$ of tissue) and detergent soluble AChE(DSE, 105.42 .$\DeltaOD/min/geam$ of tissue), respectively. Each subunit of AChE separated by SDS polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)was transferred to immonilon P by western boltting and detected by mAbs raised against each subunit of AChE from electric organ og Torpedo califomica. Collagenic tails of AChE from Torpedo califomica, likewise 103Kd protein of AChE from Narke japonica was detected by monoclonal antibody specific to 103Kd of AChE from Torpedo califomica. However, molar ratio of three subunits of AChE from Narke japonica is different from that of Torpedo calicormica. Furthermore, catalytic subunit of AChE from Narke japonica was not identified by monoclnal antibody specific to catalytic subunit of AChE from Torpedo californica. These results showed differences in molecular structure of AChE from Narke japonica and AChE from Torpedo califormica eventhough they showed same enzymatic activities.
This research want to discuss some issues about payment system of America. This research focuses on comparing ACH with Fedwire. Firstly Fedwire is the payment system for only large-dollar transfer(Large-Value Transfer System; LVTS), while ACH(Automated Clearing House)payment mainly applies a consumer account. Secondly ACH transaction is either credit or debit transfer, while Fedwire is only credit transfer. Thirdly the communication system of Fedwire has twoway method, telephonelike communication network, but ACH is oneway store and forward electronic mail. At present LVTS divides into RTGS(Real-Time Gross Settlement) and DNS(Deferred Net Settlement). However Fedwire uses either RTGS(instantaneous for every transaction) or DNS(net net transaction) but ACH uses only DNS(net net transaction). Fourthly ACH is substantially cheaper than the Fedwire payment. lastly security is important in both Fedwire and ACH, it is even more crucial in Fedwire In addition, for each transaction, Fedwire may entail individual instantaneous confirmation to the originator and notification to the receiver, whereas ACH do not.
체외 배양 과정 중에 나타나는 생쥐 초기 2-세포 배의 "in vitro 2-cell block" 현상은 세포내 $Ca^{2+}$ 농도 변화와 밀접한 관련이 있다. 다양한 종류의 세포에서 acetylcholine은 세포막에 존재하는 muscarnic acetylcholine receptor를 통해 세포내 $Ca^{2+}$ 농도 증가를 유도한다. 본 실험에서는 생쥐 "in vitro 2-cell block" 현상에 있어서 ACh의 영향을 알아보기 위해 세포 내 $Ca^{2+}$ 농도 조절 물질을 처리한 후, 공초점 현미경을 이용하여 세포 내 $Ca^{2+}$ 농도 변화를 기록하였다. ACh은 세포 내에서 농도 의존적으로 $Ca^{2+}$ 농도 증가를 유도하며, "in Vitro 2-cell block" 현상을 극복하여 포배기로 발생을 유도하였다. ACh에 의한 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 세포막에 존재하는 ACh receptor를 경유하여 나타나는 반응인지를 알아보기 위해 ACh receptor의 저해제인 atropine을 전처리한 결과, ACh에 의한 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 완전히 저해되었다. 초기 2-세포 배에서 ACh이 결합하는 receptor의 종류를 확인하기 위하여 carbachol과 nicotin tartrate를 처리 하였다. Nicotinic AChR의 agonist인 nicotine tartrate 1 mM은 세포내 $Ca^{2+}$ 농도 증가를 보이지 않았다. 따라서 초기 2-세포 배의 세포막에는 muscarnic AChR가 기능적으로 작용함을 알 수 있다. ACh에 의한 세포내 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 $Ca^{2+}$이 제거된 배양액에서도 나타나는 것으로 보아 ACh에 의한 세포내 $Ca^{2+}$ 변화는 주로 소포체와 같은 세포내 $Ca^{2+}$ 저장고로부터 분비됨을 알 수 있었다. 이러한 세포내 $Ca^{2+}$ 저장고로부터의 $Ca^{2+}$ 분비가 어떤 신호전달체계를 통해 나타나는 지를 조사하였다. 세포막의 PLC 저해제인 U73122를 전처리한 배는 ACh에 의한 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 나타나지 않았으며, 세포 내 $Ca^{2+}$ 통로인 IP3R와 RyR의 저해제인 xestospongin과 heparin 혹은 dantrolene을 전처리한 결과 dantrolene에 의해 세포내 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 억제되었다. 그리고 세포내 반복적인 $Ca^{2+}$ 농도 증가에 의해 활성도가 변화는 CaMKII의 작용을 확인하기 위하여 Ca MKII의 저해제인 KN-93을 전처리한 결과 $Ca^{2+}$ 농도 증가가 억제되는 것을 확인하였다. 이상의 결과로부터 ACh은 생쥐 초기 2-세포 배에서 ryano-dine receptor를 통하여 세포내 $Ca^{2+}$ 저장고로부터 $Ca^{2+}$ 분비를 유도하며, CaM KII에 의해서도 영향을 받는 것으로 보여진다. 생쥐 초기 2-세포 배에서 "in vitro 2-cell block"의 극복은 ACh에 의해 유도된 신호전달체계를 통해 세포내에 증가하는 $Ca^{2+}$ 농도 및 이에 따른 세포내 대사 작용의 활성화에 의하여 나타나는 것으로 생각된다.
A diagnosis of an intracranial aneurysm depends on the angiographic configuration and should be cautiously differentiated from aneurysm mimics. In cases of duplicate anterior choroidal arteries (AChAs), infundibular widening of the distal minor AChA can be an aneurysm mimic. If the minor AChA with a smaller diameter is obscured angiographically due to poor contrast filling, an associated infundibular widening beside the proximal large AChA can misinterpreted as a typical AChA aneurysm in angiograms. The authors report on two such cases of duplicate AChAs with infundibular widening presenting like a typical AChA aneurysm in angiograms. Surgical exploration revealed a perforating artery emitting from the dome of the saccular lesion, confirming infundibular widening of a duplicate AChA. No reparative procedure was applied to the infundibular widening in a 48-year-old man, while two vascular outpouchings from the infundibular widening were clipped preserving the duplicate AChA in a 55-year-old woman.
가토 해마(hippocampus)에서 acetylcholine(ACh) 유리에 미치는 cAMP의 역할에 관한 지견을 얻고자하여 $[^3H]-choline$으로 평형시킨 해마 slice 및 시냅토솜(synaptosome)을 사용하여 $[^3H]-ACh$ 유리에 미치는 여러가지 약물들의 영향을 관찰하였다. Adenylate cyclase 활성화제인 forskolin$(0.1{\sim}30{\mu}M)$은 전기 및 고농도 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리를 용량 의존적으로 증가시켰으며, dbcAMP 또한 ACh 유리를 강화시켰다. Muscarine성 흥분제인 oxotremorine$(0.1{\sim}30{\mu}M)$은 전기 및 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리 효과를 용량 의존적으로 감소시켰으며, 이러한 효과는 forskolin 및 atropine에 의하여 차단됨을 관찰할 수 있었다. 한편 $K^+-channel$ 억제제인 glibenclamide$(1,\;10{\mu}M)$는 자체로는 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리를 약간 억제시킴을 관찰할 수 있었으며, 대량의 forskolin$(10\;{\mu}M)$에 의한 $[^3H]-ACh$의 증가효과를 감약시킴을 알 수 있었다. 이상의 실험 결과로 가토 해마의 presynaptic muscarinic autoreceptor를 통한 ACh 유리의 조절에는 세포내 cAMP의 관여가 확실하다 하겠으나, 일부 $K^+-currents$의 관여를 배제할 수는 없을 것으로 사료된다.
Quercetin is a flavonoid usually found in fruits and vegetables. Aside from its antioxidative effects, quercetin, like other flavonoids, has a various neuropharmacological actions. Quercetin-3-O-rhamnoside (Rham1), quercetin-3-O-rutinoside (Rutin), and quercetin-3-(2(G)-rhamnosylrutinoside (Rham2) are mono-, di-, and tri-glycosylated forms of quercetin, respectively. In a previous study, we showed that quercetin can enhance ${\alpha}7$ nicotinic acetylcholine receptor (${\alpha}7$ nAChR)-mediated ion currents. However, the role of the carbohydrates attached to quercetin in the regulation of ${\alpha}7$ nAChR channel activity has not been determined. In the present study, we investigated the effects of quercetin glycosides on the acetylcholine induced peak inward current ($I_{ACh}$) in Xenopus oocytes expressing the ${\alpha}7$ nAChR. $I_{ACh}$ was measured with a two-electrode voltage clamp technique. In oocytes injected with ${\alpha}7$ nAChR copy RNA, quercetin enhanced $I_{ACh}$, whereas quercetin glycosides inhibited $I_{ACh}$. Quercetin glycosides mediated an inhibition of $I_{ACh}$, which increased when they were pre-applied and the inhibitory effects were concentration dependent. The order of $I_{ACh}$ inhibition by quercetin glycosides was Rutin${\geq}$Rham1>Rham2. Quercetin glycosides-mediated $I_{ACh}$ enhancement was not affected by ACh concentration and appeared voltage-independent. Furthermore, quercetin-mediated $I_{ACh}$ inhibition can be attenuated when quercetin is co-applied with Rham1 and Rutin, indicating that quercetin glycosides could interfere with quercetin-mediated ${\alpha}7$ nAChR regulation and that the number of carbohydrates in the quercetin glycoside plays a key role in the interruption of quercetin action. These results show that quercetin and quercetin glycosides regulate the ${\alpha}7$ nAChR in a differential manner.
Acetylcholine (ACh) activates the inwardly rectifying muscarinic $K^{+}$ channel in rat atrial cells via pertussis toxin (PTX)-sensitive G-protein ($G_k$) coupled with the muscarinic receptor (mAChR). Although this $K^{+}\;(K_{ACh})$ channel function has reported to be modulated by the phosphorylation process, a kinase and phosphatase involved in these processes are still unclear. Since either PKA or PKC was not effective on this ATP-modulation, the present study examined the possible involvement of the protein tyrosine kinase (PTK) and protein tyrosine phosphatase (PTP) in the function of the $K_{ACh}$ Channel. In the inside-out (I/O) patch preparation excised from the adult rat atrial cell, when activated by 10 ${\mu}M$ ACh in the pipette and 100 ${\mu}M$ GTP in the bath, the mean open time (${\tau}_{o}$) and the channel activity ($K_{ACh}$) was 1.13 ms (n=5) and 0.19 (n=6), respectively. Following the application of 1 mM ATP into the bath, ${\tau}_{o}$ increased by 34% (1.54 ms, n=5) and $K_{ACh}$ by 66% (0.28, n=6). Channel function elevated by ATP was lasted after washout of ATP. However, this ATP-induced increase in the $K_{ACh}$ channel function did not occur in pretreated cells with genistein ($50{\sim}100 {\mu}M$), a selective PTK inhibitor, but occurred in pretreated cells with equimolar daidzein, a negative control of the genistein. On the contrary, PTP which acts on tyrosine residue conversely reversed both ATP-induced increased ${\tau}_{o}$ by 32% (1.20 ms, n=3) and $K_{ACh}$ by 41% (0.15, n=3), respectively. Taken together, these results suggest that $K_{ACh}$ channel may, at least partly, be regulated by the tyrosyl phosphorylation, although it is unclear where this process exerts on the muscarinic signal transduction pathway comprising the mAChR-$G_{k}$-the $K_{ACh}$ channel.
토끼 적출 신동맥에 있어서 acetylcholin(Ach)에 의한 이완작용에 대한 nitric oxide(NO) 합성 억제제인 $N^{G}$-nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME)과 prostanoid 합성 억제제인 indomethacin의 영향을 관찰하였다. Ach($10^{-8}-3{\times}10^{-5}M$)에 대한 이완작용은 내피세포를 제거시킴으로서 완전히 사라졌다. L-NAME ($10^{-4}M$)은 Ach ($10^{-8}-3{\times}10^{-5}M$)의 이완작용을 현저히 감소시켰으며 L-arginine ($10^{-3}M$)에 의해 Ach의 이완작용에 대한 L-NAME ($10^{-4}M$)의 억제효과가 현저히 약하게 나타났다. Indomethacin ($10^{-6}M$)은 Ach ($10^{-8}-3{\times}10^{-5}M$)의 이완작용에 영향을 미치지 못하였다. L-NAME ($10^{-4}M$)에 indomethacin ($10^{-6}M$)의 첨가는 Ach ($10^{-8}-3{\times}10^{-5}M$)의 이완작용이 L-NAME ($10^{-4}M$) 단독의 경우보다 더 큰 억제효과를 나타내었다. 이와 같은 결과로 토끼적출 신동맥에서 Ach은 내피세포 의존성 이완작용을 나타내며, NO와 prostanoid가 수반되어 나타나는 것으로 사료되어진다.
Objective : Surgical results for anterior choroidal artery (AChA) aneurysms have previously been reported as unsatisfactory due to inadvertent occlusion of the AChA, while the low incidence of AChA aneurysms hampers the accumulation of surgical experience. The authors reviewed their related surgical experience to document the ischemic complications and surgical outcomes. Methods : Identification of the AChA at its origin by rigorous visual scrutiny, careful microdissection, and meticulous clip placement to avoid the AChA origin are all crucial surgical maneuvers. A retrospective review of a surgical series of 62 consecutive cases of an AChA aneurysm between 2004 and 2012 was performed. Results : All patients, except for five (8.1%) with a small residual neck, showed complete aneurysm obliteration in postoperative angiographic evaluations. There was no incidence of procedure-related permanent AChA syndrome or oculomotor nerve palsy, while three (4.8%) patients suffered from transient AChA syndrome. The clinical outcomes [the 3-month modified Rankin Scale (mRS)] of the patients were related to their preoperative World Federation of Neurologic Surgeons (WFNS) grade. As regards the 3-month mRS, significant differences were found between patients with an unruptured aneurysm (WFNS grade 0; n=20), good-grade subarachnoid hemorrhage (WFNS grade 1-3; n=30), and poor-grade subarachnoid hemorrhage (WFNS grade 4-5; n=4). Conclusion : In surgical treatment of AChA aneurysms, a risk of AChA insufficiency can be minimized by taking every precaution to preserve the AChA patency and intraoperative monitoring. In addition, the surgical outcome is primarily determined by the preoperative clinical state.
Purpose: Acute organophosphate (OP) poisoning may be monitored by measuring the acetylcholinesterase (AChE). It is important to assess severity and establish prognostic tests in the early stage of OP poisoning. The aim of this study was to look at the relationship between various clinical aspects of the OP poisoning, prognostic indicators of OP poisoning including Simplified Acute Physiology Score (SAPS) 3, and the associated changes in AChE levels. Methods: Clinical data and initial AChE levels from thirty-seven patients with OP poisoning were prospectively reviewed from 12 teaching hospitals in South Korea from August 2005 to July 2006. Clinical manifestations at the time of arrival such as miosis, respiratory abnormality, salivation, urinary incontinence, GCS score, AVPU scale, need for intubation, and mechanical ventilation requirements were recorded. SAPS 3 was calculated using clinical data and laboratory results. Results: The median level of AChE was 9.8 (1.3-53.6) U/gHb. There was no significant difference in AChE levels between the groups with and without cholinergic symptoms. The median level of AChE of the patients who required intubation and those who did not were 3.5 U/gHb and it 19.7 U/gHb respectively (Mann-Whitney test; p<0.001). The AChE levels were also significantly different (p=0.007) in patients who needed mechanical ventilation compared to those who did not with AChE levels found to be 3.1 U/gHb and it was 14.8 U/gHb, respectively. Level of consciousness assessed using the AVPU scale was correlated with AChE levels (Kruskal-Wallis test; p=0.013). GCS score were correlated with AChE levels (p=0.007, Spearman's rho = 0.454). In addition, the lower the level of initial AChE, the longer the ICU stay (p=0.029, Spearman's rho=-0.380). SAPS 3 was inversely correlated with the initial AChE (p<0.001, Spearman's rho=-0.633). Conclusion: In the acute OP poisoning, low AChE levels appear to help indicate the severity of poisoning. The initial AChE level may be a useful prognostic parameter for acute OP poisoning.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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