The study aimed to evaluate the probiotic properties, antioxidant activity and fermentative capacity of Acremonium charticola and Rhizopus oryzae isolated from the Indonesian fermented dried cassava, with particular application on poultry. A. charticola inhibited the growth of Escherichia coli and Aspergillus flavus. A. charticola and R. oryzae grew in potato dextrose agar (PDA) adjusted to pH 3 and 8 or in PDA supplemented with bile salt up to 0.8%. After soaking for 8 hr, the survival rate of A. charticola in the simulated gastric juice (pH 2) and bile solutions (2% bile salt) was lower than that of R. oryzae. A. charticola and R. oryzae exhibited strong antioxidant activities. Compared to unfermented cassava pulp (control), the fibre content of cassava pulp tended to be lower after fermentation with A. charticola for 14 days. The populations of A. charticola and R. oryzae were significantly higher in fermented cassava pulp than in unfermented one. Coliform was higher in cassava pulp fermented with R. oryzae or A. charticola + R. oryzae compared to control after 7 days of fermentation, however, the bacteria were not different between A. charticola-fermented cassava pulp and control. Lactic acid bacteria (LAB) were higher in A. charticola- and R. oryzae-fermented cassava pulp than those in control, however, no difference of LAB was observed between A. charticola + R. oryzae-fermented cassava pulp and control. In conclusion, A. charticola exhibited antibacterial, antifungal and antioxidant activity, gastrointestinal persistence and fermentative capacity that may be beneficial for poultry industry.
Lee, Jin Hee;Jo, Eun Hye;Hong, Eun Jin;Kim, Kyung Min;Lee, Inhyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.10
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pp.1397-1404
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2014
A few starters have been developed and used for doenjang fermentation but often without safety evaluation. Filamentous fungi were isolated from industrial doenjang koji, and their potential for mycotoxin production was evaluated. Two fungi were isolated; one was more dominantly present (90%). Both greenish (SNU-G) and whitish (SNU-W) fungi showed 97% and 95% internal transcribed spacer sequence identities to Aspergillus oryzae/flavus, respectively. However, the SmaI digestion pattern of their genomic DNA suggested that both belong to A. oryzae. Moreover, both fungi had morphological characteristics similar to that of A. oryzae. SNU-G and SNU-W did not form sclerotia, which is a typical characteristic of A. oryzae. Therefore, both fungi were identified to be A. oryzae. In aflatoxin gene cluster analysis, both fungi had norB-cypA genes similar to that of A. oryzae. Consistent with this, aflatoxins were not detected in SNU-G and SNU-W using ammonia vapor, TLC, and HPLC analyses. Both fungi seemed to have a whole cyclopiazonic acid (CPA) gene cluster based on PCR of the maoA, dmaT, and pks-nrps genes, which are key genes for CPA biosynthesis. However, CPA was not detected in TLC and HPLC analyses. Therefore, both fungi seem to be safe to use as doenjang koji starters and may be suitable fungal candidates for further development of starters for traditional doenjang fermentation.
Fugi are eukaryotic, nonphotosynthetic, filamentous or unicellular organisms, most of which grow on nonliving materials as saphrophytes. The majority are therefore opportunistic pathogens and predisposing factors often contribute to the establishment of fungal infection. These include an alteration in the normal flora of the host by prolonged administration of antibiotics, immunosup-pression, concurrent infections, damage to the skin or mucous membranes, constantly moist areas of skin or the exposure to a large infective dose, and as with fungal spores. Fungi may cause a variety of diseases which may be due directly to fungal invasion of tissue or more often to the ingestion of toxins produces by fungi in growing, standing or stored grains and other animals feeds. In this experiment, contaminated fugi were isolated and identified from animal feedstuffs such as Korean cattle, milking cows, pigs and chickens. Twelve genues were isolated from animal feeds, they are 9 from Korean cattle and milking cows feeds, 6 from pigs feeds, and 10 from chickens feeds. Among them, most frequently encountered species was Yeast(56 strains), followed by Fusarium sp(41 strains), Aspergillus sp(20 strains), each of Micorsporum sp and Trichophyton sp(17 strains), Penicilium sp(12 strains), in order. And also minority was isolated as Candide sp(4 strains), Trichoderma sp(3 strains), each of Epidermophytom sp and Absida sp(2 strains), and each of Sporothrix sp and Maduromyces sp(1 strain). Among the Aspergillus sp 20 isolates, A flavus(5 strains), A nidulans(4 strains), A fumigatus(3 strains), A glucans(3 strains), A niger(3 strains) and A terreus(2 strains) were identified.
Lee, Kyu Ri;Yang, Sun Min;Cho, Sung Min;Kim, Myunghee;Hong, Sung-Yong;Chung, Soo Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.1
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pp.57-66
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2017
Aflatoxins are classified as Group 1 (carcinogenic to humans) by the International Agency for Research on Cancer. In this study, a total of 134 fungal strains were isolated from 65 meju samples, and two fungal isolates were selected as potential aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$)-biodetoxification fungi. These fungi were identified as Aspergillus oryzae MAO103 and A. oryzae MAO104 by sequencing the beta-tubulin gene. The two A. oryzae strains were able to degrade more than 90% of $AFB_1$ (initial concentration: $40{\mu}g/l$) in a culture broth in 14 days. The mutagenic effects of $AFB_1$ treated with A. oryzae MAO103 and MAO104 significantly decreased to 5.7% and 6.4%, respectively, in the frame-shift mutation of Ames tests using Salmonella typhimurium TA98. The base-substituting mutagenicity of $AFB_1$ was also decreased by the two fungi. Moreover, $AFB_1$ production by Aspergillus flavus was significantly decreased by the two A. oryzae strains on soybean-based agar plates. Our data suggest that the two $AFB_1$-detoxifying A. oryzae strains have potential application to control $AFB_1$ in foods and feeds.
Kim, Ji-Yeun;Yeo, Soo-Hwan;Baek, Sung-Yeol;Choi, Hye-Sun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.12
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pp.1270-1279
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2011
Bealmijang is a short-term aged paste made from meju, which is a brick of fermented soybeans and other ingredients. Different types of bealmijang are available depending on the geographic region or ingredients used. However, no study has clarified the microbial diversity of these types. We identified 17 and 14 fungal species from black soybean meju (BSM) and buckwheat meju (BWM), respectively, on the basis of morphology, culture characteristics, and internal transcribed spacer and ${\beta}$-tubulin gene sequencing. In both meju, Aspergillus oryzae, Rhizopus oryzae, Penicillium polonicum, P. steckii, Cladosporium tenuissimum, C. cladosporioides, C. uredinicola, and yeast species Pichia burtonii were commonly found. Moreover, A. flavus, A. niger, P. crustosum, P. citrinum, Eurotium niveoglaucum, Absidia corymbifera, Setomelanomma holmii, Cladosporium spp. and unclassified species were identified from BSM. A. clavatus, Mucor circinelloides, M. racemosus, P. brevicompactum, Davidiella tassiana, and Cladosporium spp. were isolated from BWM. Fast growing Zygomycetous fungi is considered important for the early stage of meju fermentation, and A. oryae and A. niger might play a pivotal role in meju fermentation owing to their excellent enzyme productive activities. It is supposed that Penicillium sp. and Pichia burtonii could contribute to the flavor of the final food products. Identification of this fungal diversity will be useful for understanding the microbiota that participate in meju fermentation, and these fungal isolates can be utilized in the fermented foods and biotechnology industries.
In order to study antibiotic activities of basidomycetes (mushroom), 68 species of mushroom were extracted with petroleum ether, 80% ethanol, and distilled water in that order. A total of 204 extracts were obtained. Antibiotic activities against Microsporum gypseum were observed from the petroleum ether extracts of Abortiporus DGU-L6 mushroom, and the water extracts of Clitogbe DGU-7 mushroom. Antibiotic activity against Aspergillus niger were observed from the 80% ethanol extracts of Cortinarius DGU-51 and Marasmminus DGU-L67 mushroom. The petroleum ether extracts of Hetero DGU-L25 mushroom showed various antibiotic activities, particularly strong activities against M. canis. and the minimum inhibitory concentration (MIC) was $40\;{\mu}g/ml$. The extracts also showed antibiotic activities against A. niger (KCTC 2025), A. niger (KCTC 2118), A. versicolor (KCTC 2120), A. flavus (KCTC 2117), M. gypsem, Pyricularia oryzae, and Trichopyto mentagrophytes, and MIC for each fungus was $600\;{\mu}g/ml,\;500\;{\mu}g/ml,\;800\;{\mu}g/ml,\;100\;{\mu}g/ml,\;600\;{\mu}g/ml,\;200\;{\mu}g/ml,\;and\;600\;{\mu}g/ml$, respectively.
The most economically important species used in a wide range of fermentation industries throughout Asia belong to Aspergillus section Flavi, which are morphologically and phylogenetically indistinguishable, with a few being toxigenic and therefore a major concern. They are frequently isolated from Korean fermentation starters, such as nuruk and meju. The growing popularity of traditional Korean alcoholic beverages has led to a demand for their quality enhancement, therefore requiring selection of efficient non-toxigenic strains to assist effective fermentation. This study was performed to classify the most efficient strains of Aspergillus section Flavi isolated from various types of traditional wheat nuruk, based on a polyphasic approach involving molecular and biochemical evaluation. A total of 69 strains were isolated based on colony morphology and identified as Aspergillus oryzae/flavus based on internal transcribed spacer and calmodulin gene sequencing. Interestingly, none were toxigenic based on PCR amplification of intergenic regions of the aflatoxin cluster genes norB-cypA and the absence of aflatoxin in the culture supernatants by thin-layer chromatography analysis. Saccharification capability of the isolates, assessed through ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase activities, revealed that two isolates, TNA24 and TNA15, showed the highest levels of activity. Although the degrees of variation in ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase activities among the isolates were higher, there were only slight differences in acid protease activity among the isolates with two, TNA28 and TNA36, showing the highest activities. Furthermore, statistical analyses showed that ${\alpha}-amylase$ activity was positively correlated with glucoamylase activity (p < 0.001), and therefore screening for either was sufficient to predict the saccharifying capacity of the Aspergillus strain.
Detection of antibody against pathogenic fungi in serum specimens of the patients with pulmonary tuberculosis or other lung diseases has been carried out(male) using the indirect fluorescence antibody technique and immunodiffusion tests. Immunodiffusion tests revealed that 104(36.5%) out of 285 patients examined showed a positive precipitin reaction against one or more of fungal antigens. The majority of ID positive patients 64(61.5%) reacted with Aspergillus fumigatus antigen and 49(47.1%) patients reacted with Candida albicans antigen ID positive reaction to A. fumigatus was found little more frequently among male patients, while Candida albicans reactors were found more frequently among female patients. Age distribution of ID positive reactors was high(49.1-43.3%) in age group of 40-59 years, but least or none in age group of less than 30 years. Age of fungal mycelium used as antigen did not effect sensitivity of the indirect flubrescence (IF) technique in detecting antibody to A. fumigatus. Antibody class against A. fumigatus that showed highest titer was IgG and thus FITC labeled anti-IgG immunoglobulin shoul be preferable. As relatively large amount of cell wall components of Aspergilli shared antigenically, a considerable cross-reaction was observed among A. fumigatus, A. flavus and A. niger, but not much with C. albicans. While (IF) has much better sensitivity when compared with ID, relative specificity of the latter procedure cannot to be overried, so that they could be batter used together in order to obtain quantitative measurement of antibody with relative specificity.
Spent mushroom substrate (SMS) is a by-product remained after a crop of mushrooms. About seven thermophilic strains were isolated from SMS (Flammulina velvtipes). Among them, one isolate, designated UJ03, showed the antifungal activity against Aspergillus flavus and Aspergillus ochraceous producing mycotoxin on PDA medium, potentially. The strain UJ03 produced cellulase and xylanase as extracellular hydrolases. The strain UJ03 was identified as a member of the genus Bacillus by biochemical characteristics using Bacillus ID kit and VITEK 2 system. Comparative 16S rDNA gene sequence analysis showed that strain UJ03 formed a distinct phylogenetic tree within the genus Bacillus and was most closely related to Bacillus amyloliquefaciens with sequence similarity of 98.9%. On the basis of its physiological properties, biochemical characteristics and phylogenetic distinctiveness, strain UJ03 was classified within the genus Bacillus, for which the name Bacillus sp. UJ03 is proposed. The antifungal compound from Bacillus sp. UJ03 was similar to lipopeptide iturin A of Bacillus sp.
Shin, Pyung Gyun;Yoo, Young Bok;Cho, Yong Un;Cho, Soo Jeong
Journal of Mushroom
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v.9
no.4
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pp.180-185
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2011
Spent mushroom substrates (SMS) is a by-product remaining after a crop of mushrooms. About four surfactin-producing strains were isolated from SMS (Pleurotus eryngii). Among of them, one isolate, which designated to YJ07, potentially showed the antifungal activity against Aspergillus flavus and Aspergillus ochraceous producing mycotoxin on PDA medium. The biochemical characteristics of the strain YJ07 was similar with Bacillus subtilis and Bacillus amyloliquefaciens by Bacillus ID kit and VITEK 2 system. Comparative 16S rDNA gene sequence analysis of the strain YJ07 also showed that the strain YJ07 was most closely related to Bacillus amyloliquefaciens with sequence similarity of 99.5%. On the basis of their biochemical characteristics and phylogenetic distinctiveness, the strain YJ07 was classified within the genus Bacillus as Bacillus amyloliquefaciens YJ07. The antifungal compound from B. amyloliquefaciens YJ07 was similar to lipopeptide surfactin from Bacillus subtilis by TLC and HPLC analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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