This research was conducted to develop effective and safe marine-derived antiviral compounds against norovirus. The ethyl acetate (EtOAc)-extract from Eisenia bicyclis exhibited strong antiviral activity against murine norovirus (MNV) as a norovirus surrogate. Among the phlorotannins from E. bicyclis, dieckol (DE) and phlorofucofuroeckol-A (PFF) were known to possess the strongest antibacterial activity. In this study, DE and PFF were evaluated for antiviral activity against MNV. DE and PFF exhibited strong anti-MNV activity with 50% effective concentration ($EC_{50}$) of $0.9{\mu}M$. However, PFF exhibited more effective antiviral activity against MNV with higher selective index (668.87) than that of DE (550.60), due to its lower cell toxicity against RAW 264.7. This is the first report on the anti-MNV activity of phlorotannins from seaweed. The results obtained in this study suggest that the phlorotannins could be used as a potential source of natural antiviral agents.
The control activity of isoprothiolane and tricyclazole mixed with carbosulfan, and probenazole by the nursery treatment was performed against rice leaf and neck blast caused by Magnaporthe grisea. In the paddy field, three fungicides showed good activities against leaf blast 3 months after nursery treatment. Especially the activity of tricyclazole against leaf blast gradually increased by the laps of time to 85.5%, which was assessed at 6 September,2003. Although the control value of isoprotholane and tricyclazole mixed with carbosulfan against neck blast was 47.5% and 61.1%, respectively, probenazole showed a very high activity against not only leaf blast but also neck blast, of which that was 91.2%. No phytotoxicity was observed in all the treatments after transplanting rice seedling in the paddy field. Based on these results, three systemic fungicides tested in this study showed such a good potential that they might be used to formulate the nursery treating granule.
In the course of screening for antifungal agents, a bacterial strain, DM3 was isolated from a mud sample collected at Daechon in Chungnam province and identified as Bacillus licheniformis based on API 50CHB test. It has antifungal activity against 12 plant pathogenic fungi in paper disc assay. At the 95% lethal dose of gamma radiation ($^{60}Co$, 10 kGy, $D_{10}=2.32\;kGy$), the antifungal activity deficient mutant (mDM3) against Colletotrichum gloeosporioides was induced From 2-D electrophoresis analysis, serine hydroxymethyltransferase (45.0 kDa), hypothetical protein(40.7 kDa), NifU protein homolog(15.4 kDa), and resolvase(12.5 kDa) homologous proteins were detected only in B. licheniformis DM3. Lysozyme(18.1 kDa) and alkyl hydroperoxide reductase(15.6 kDa) homologous proteins were expressed uniquely in B. licheniformis mDM3. Further studies are needed to reveal that these proteins from B. licheniformis DM3 could be closely related to the antifungal activity against plant pathogenic fungi.
Lactobacillus plantarum KLAB21 isolated from Kimchi has been reported to produce antimutagenic subtance(s) in the culture medium. In this study, antimutagenic effects of the strain KLAB21 were investigated to under various culture conditions maximize the production of antimutagenic substance(s) against N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) on Salmonella typhimurium TA100 and 4-nitroquinoline-1-oxide(NQO) on S. typhimurium TA98. Glucose(2%) as a carbon source and yeast extract(1%) as a nitrogen source resulted in the highest production of the antimutagenic substance(s) against both mutagens in the culture supernatant of L. plantarum KLAB21. The most effective concentrations of bactopeptone as a nitrogen source were 1% against MNNG and 1.5% against NQO. Optimal pH of the medium, culture temperature, and shaking speed for the antimutagenic substance(s) production were pH 7.0, $37^{\circ}C$ and 150 rpm, respectively. Under the optimal condition, the antimutagenic effects of L. plantarum KLAB21 culture supernatant were 98.4% against MNNG on S. typhimurium TA100 and 57.3% against NQO on S. typhimurium TA98.
Berberine (B1), isolated from stems of Coscinium fenestratum (Goetgh.) Colebr, was used as a principle structure to synthesize three phenolic derivatives: berberrubine (B2) with a single phenolic group, berberrubine chloride (B3) as a chloride counter ion derivative, and 2,3,9,10-tetra-hydroxyberberine chloride (B4) with four phenolic groups, to investigate their direct and indirect antioxidant activities. For DPPH assay, compounds B4, B3, and B2 showed good direct antioxidant activity ($IC_{50}$ values=$10.7{\pm}1.76$, $55.2{\pm}2.24$, and $87.4{\pm}6.65{\mu}M$, respectively) whereas the $IC_{50}$ value of berberine was higher than $500{\mu}M$. Moreover, compound B4 exhibited a better DPPH scavenging activity than BHT as a standard antioxidant ($IC_{50}=72.7{\pm}7.22{\mu}M$) due to the ortho position of hydroxyl groups and its capacity to undergo intramolecular hydrogen bonding. For cytotoxicity assay against human fibrosarcoma cells (HT1080) using MTT reagent, the sequence of $IC_{50}$ value at 7-day treatment stated that B1 < B4 < B2 ($0.44{\pm}0.03$, $2.88{\pm}0.23$, and $6.05{\pm}0.64{\mu}M$, respectively). Berberine derivatives, B2 and B4, showed approximately the same level of CAT expression and significant up-regulation of SOD expression in a dose-dependent manner compared to berberine treatment for 7-day exposure using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assays. Our findings show a better direct-antioxidant activity of the derivatives containing phenolic groups than berberine in a cell-free system. For cell-based system, berberine was able to exert better cytotoxic activity than its derivatives. Berberine derivatives containing a single and four phenolic groups showed improved up-regulation of SOD gene expression. Cytotoxic action might not be the main effect of berberine derivatives. Other pharmacological targets of these derivatives should be further investigated to confirm the medical benefit of phenolic groups introduced into the berberine molecule.
Differentially expressed genes(DEG) were identified in a rice variety, Sathi, an indica type showing high allelopathic potential against barnyardgrass(Echinochloa crus-galli(L.) Beauv. var. frumentaceae). Rice plants were grown with and without barnyardgrass and total RNA was extracted from rice leaves at 45 days after seeding. DEG full-screening was performed by $GeneFishing^{TM}$ method. The differentially expressed bands were re-amplified and sequenced, then analyzed by Basic Local Alignment Search Tool(BLAST) searching for homology sequence identification. Gel electrophoresis showed nine possible genes associated with allelopathic potential in Sathi, six genes(namely DEG-1, 4, 5, 7, 8, and 9) showed higher expression, and three genes(DEG-2, 3 and 6) showed lower expression as compared to the control. cDNA sequence analysis showed that DEG-7 and DEG-9 had the same sequence. From RT PCR results, DEG-6 and DEG-7 were considered as true DEG, whereas DEG-1, 2, 3, 4, 5, and 8 were considered as putative DEG. Results from blast-n and blast-x search suggested that DEG-1 is homologous to a gene for S-adenosylmethionine synthetase, DEG-2 is homologous to a chloroplast gene for ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase large subunit, DEG-8 is homologous to oxysterol-binding protein with an 85.7% sequence similarity, DEG-5 is homologous to histone 2B protein with a 47.9% sequence similarity, DEG-6 is homologous to nicotineamine aminotransferase with a 33.1% sequence similarity, DEG-3 has 98.8% similarity with nucleotides sequence that has 33.1% similarity with oxygen evolving complex protein in photosystem II, DEG-7 is homologous to nucleotides sequence that may relate with putative serin/threonine protein kinase and putative transposable element, and DEG-4 has 98.8% similarity with nucleotides sequence for an unknown protein.
ln vitro and in vivo antibacterial activities of DWQ-013(1-cyclopropyl-6,8-difluoro-7-(3-methylthiomethylpyrrolidinyl)-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid), a new fluoroquinolone antibacterial agent, were compared with those of ciprofloxacin, sparfloxacin and ofloxacin against aerobic and anaerobic standard strains and clinical isolates. DWQ-013 had a broad spectrum and potent antibacterial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The antibacterial activity of DWQ-013 against Staphylococcus aureus was equal to that of sparfloxacin(SPFX) and superior to those of ciprofloxacin(CPFX). The antibacterial activity against Gram-negative bacteria was slightly lower than those of ciprofloxacin and sparfloxacin. MIC of DWQ-013 against Pseudomonas aeruginosa$(0.781{\sim}1.563\;{\mu}g/ml)$ was usually equal to that of sparfloxacin$(0.781\;{\mu}g/ml)$ and was inferior to that of ciprofloxacin$(0.098\;{\mu}g/ml)$. The number of viable cells was decreased rapidly after addition of DWQ-013 at concentration of $1{\sim}2$ folds of MIC.
A noval derivatives of 3-substituted[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (4a-4o) and 7,8,9,10-tetrahydrobenzo[4,5] thieno[2,3-d][1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazine (7a-7l) is prepared by the reaction of heteroaryl hydrazone from the aldehyde and pyridazinohydrazine derivative, followed by subjecting the intermediate directly to oxidative cyclization employing the mixture of $Me_4NBr$ and Oxone. These derivatives were subjected to preliminary antimicrobial activities against microorganism. All these compounds exhibit good to moderate activity.
The current 3D CG animation pipe line, which is the production system, does not have an effective solution that all animation departments are able to start their jobs independently against other animation departments. It is generally acknowledged that we could not do animating task before the modeling and set-up task. This kind of process has caused loss of labour. We could expect lasting problems which is stopping marking animating process before the previous process done again in case of requiring editing the jobs which are modeling and set-up. We could solve these "bottleneck" situation with "master character" defined as standard, so that animate and retake the job independently against other departments. These new process could accelerate the animation pipe line system.
This study investigated the effects of mycelia of Lentinus edodes mushroom-cultured Glycyrrihiza radix(LMG) on cancer cell lines and sarcoma 180(S-180), as well as on human mast cells. In an anti-cancer tests using Hep3B(hepatic cancer cell), MCF-7(breast cancer), and HeLa(uterine cancer) cells, LMG extract exhibited greater anti-proliferation effects than Glycyrrihiza glabra(GG) extract. LMG extract multiplication restraining effects were 60% that of ethanol at 3 mg/mL extract also displayed tumor suppressive effects in mice injected with S-180 cells. The growth-inhibition rates against tumor cells were 56% for LMG and 37% for GG. When LMG was added to human mast cells, the Intensity of RT-PCR products using primers($FC{\varepsilon}RI\;c-kit$) decreased. significantly compared with that of control. These results suggest that Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza glabra has an anti-proliferation effects against cancer cell lines(Hep3B, MCF-7 and HeLa) and S-180 tumors and will be also beneficial in treating allergic reactions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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