• Applied Biological Chemistry
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• 제44권4호
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• pp.251-256
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• 2001

난용성 인산염을 가용화 시킬 수 있는 경제적이고 효율적인 생물비료를 개발하기 위하여 난용성 인산염 가용화능이 우수한 미생물을 염류 집적 및 인산과다처리 재배지로부터 분리하였다. 이 분리균주의 생리 생화학적인 특성을 조사한 결과 Aeromonas hydrophila DA57로 동정되었다. Aeromonas hydrophila DA57은 hydroxyapatite, tri-calcium phosphate 와 같은 난용성 인산염을 모두 가용화한다. 난용성 인산염의 분해능이 최대가 되는 배양 온도와 배양초기 pH는 각각 $30^{\circ}C$와 5.0이었으며, 탄소원으로 glucose를 3% 첨가시 가용화능이 높았다. 배양 pH가 감소함에 따라 가용화된 유리인산의 함량이 증가하였고 gluconic acid의 생성이 확인되었다. 따라서 난용성 인산염의 분해가 우수한 새로운 Aeromonas hydrophila DA57를 분리하였고, 이는 하나의 생물비료원으로 활용이 가능하리라고 사료된다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제27권1호
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• pp.48-52
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• 2004

DA-11004 is a synthetic, potent NADP-dependent isocitrate dehydrogenase (IDPc) inhibitor where $IC_{50}$ for IDPc is 1.49 $\mu$M. The purpose of this study was to evaluate the effects of DA-11004 on the high fat high sucrose (HF)-induced obesity in male C57BL/6J mice. After completing a 8-week period of experimentation, the mice were sacrificed 1hr after the last DA-11004 treatment and their blood, liver, and adipose tissues (epididymal and retroperitoneal fat)were collected. There was a significant difference in the pattern of increasing body weight between the HF control and the DA-11004 group. In the DA-11004 (100 mg/kg) treated group the increase in body weight significantly declined and a content of epididymal fat and retroperitoneal fat was also significantly decreased as opposed to the HF control. DA-11004 (100 mg/kg) inhibited the IDPc activity, and thus, NADPH levels in plasma and the levels of free fatty acid (FFA) or glucose in plasma were less than the levels of the HF control group. In conclusion, DA-11004 inhibited the fatty acid synthesis in adipose tissues via IDPc inhibition, and it decreased the plasma glucose levels and FFA in HF diet-induced obesity of C57BL/6J mice.

• 미생물학회지
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• 제36권3호
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• pp.181-186
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• 2000

Clostridium thermocellum이 생성하는 섬유소분해 효소복합체인 cellulosome은 26개 의 서로 다른 단백질로 구성되어 있으며 그 구성물질로서 calcium을 포함하고 있다. 견고한 구조의 이 복합체에서 구성단백질을 분리하여 그 기능을 연구할 목적으로 이 복합체를 해체 (dissociation)하려 시도하였다. 이 복합체는 calcium을 제거하였을 대 해체되었다. 해체된 구성 단백질들은 MonoQ column chromatogrphy에 의해 구조단백질인 CipA를 포함한 분획, 91 kDa(CelK-tr), 60 kDa 과 57 kDa 단백질로 구성된 분획과 주로 46 kDa(CelA-tr), 또는 71 kDa(CelS-tr) 단백질을 포함하는 분획들로 크게 분리되었다. 대부분의 분획들은 crystalline cellulose 분해 활성을 보였다. 순수 분리된 71 kDa 단백질은 $60^{\circ}C$~$70^{\circ}C$에서 섬 유소 분해시 calcium에 의존적이었으나 46 kDa 단백질은 그렇지 않았다. 46 kDa 단백질은 cellodextrin을 celloviose 및 cellotriose 단위로 절단하며 cellotetraose 로부터 glucose가 생 성되는 것이 관찰되었다. Cellulosome의 섬유소분해 최성 산물이 cellobiose인 것을 고려할 때 개개 구성단백질의 활성이 이 효소 복합체내에서 조절되어 있음을 알 수 있다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제34권2호
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• pp.135-142
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• 1996

톡소포자충(Toxoplosma gondii) 주요막단백질의 하나인 30 kDa 단백질(p30)의 항원부위를 결정하고자 p30의 아미노산 분석에 따른 친수성 부위 및 혐수성 부위에 맞게 유전자를 증폭하고 발현시켜 항원성을 검토하였다 p30의 절편으로는 p30 전체 p30의 N-말단 Signal Sequence와 C- 탈단의 혐수성 부위를 제거한 S28. S28의 N-말단 2/3부위인 Al9. S28의 C-말단 2/3부위인 Pl9. 528의 N-탈난 1/3부위인 X9 중앙 1/3부위인 Y10 및 C-말단 1/5부위인 Z9로 구성하였다. 각절편에 대한 primer에는 EcoR I의 clampsequence를 포함시켜 중합효소반응으로 증폭시켰으며 G57를 발현하는 pGEX-4T-1 vector에 삽입시킨 후 Eschericha coli(.JM105 strain)에 형질변형시키고 IgG로 각 절편이 GST와 융합단백질로 발현되도록 하였다 SDS-PAGE상에서 p30은 63 kDa. S28는 54 kDa Al9과 Pl9은 각각 45 kDa. X9은 35 kDa. Y10은 36 kDa 및 29은 35 kDa 단백질로 발현되었다. 각각의 단백질은 westemblot상에서 GSTdetectionkit와 잘 반응하여 융합단백질임을 확인하였다. 톡소포자충증 환자 혈청과 westem blot에서 p30. S28 및 Al9은 반응하여 항원성이 인정되었으나 Pl9 . X9, Y10 및 Z9는 반응하지 않았다 따라서. p30의 중간 1/3 부위의 존재하에 N-말단 1/3부위가 항원성을 나타내는 구조적 항원이거나. 첫 1/3부위와 중 간 1/3부위의 경계에 위치한 polypeptide가 항원성을 발현하는 것으로 추정되었다.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제34권3호
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• pp.673-682
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• 2017

식물 및 동물성 단백질 유래 펩타이드 형태의 단백질 가수 분해물들은 항산화, 고혈압 완화, 면역조절, 진통완화 및 항균작용 등 생리활성이 있는 것으로 알려져 왔다. 본 연구는 연산오계란 단백질 가수 분해물을 Ultrafiltration를 이용하여 HDS(분획되지 않은 가수 분해물), 1 kDa, 5 kDa, 10 kDa, 50 kDa로 분획된 기능성 펩타이드의 DPPH radical scavenging activity, superoxide anion radical scavenging activity, hydroxyl radical scavenging activity 및 $Fe^{2+}$ chelation ability을 평가하였다. 그 결과 DPPH radical scavenging activity 최대값은 1 kDa(70.83 %), hydroxyl radical scavenging activity 최대값은 5 kDa (47.01 %), superoxide anion radical scavenging activity 최대값은 5 kDa(40.57 %), $Fe^{2+}$ chelation ability 최대값은 5 kDa(29.87 %)로 나타났다. Ultrafiltration를 이용하여 fractionation된 단백질 가수 분해물의 항산화 저해 능력 $IC_{50}$ 평가하였다. 그 결과 HDS의 최대값은 superoxide anion radical scavenging activity($IC_{50}$, 5.42 mg/ml)이고, 1 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 1.67 mg/ml)이고, 5 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.09 mg/ml)이고, 10 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.61 mg/ml)이고, 50 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 4.53 mg/ml)이다. 그러므로 본 연구 결과를 바탕으로 5 kDa를 이용하여 오계란 단백질에서 분획한 펩타이드는 항산화 기능성 식품소재로서 활용할 가치가 높을 것으로 기대한다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제45권1호
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• pp.19-26
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• 2007

This study describes the isolation of a Toxocara canis species-specific excretory-secretory(ES) antigen and the development of an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) based on this antigen. Analysis of the ES antigens of T. canis, Toxocara vitulorum, Ascaris lumbricoides and Necator americanus larval antigen was performed by SDS-PAGE followed by western blotting. A 57 kDa T. canis-specific antibody fraction(TcES-57) was identified by western blotting and labelling with anti-Toxocara antibodies(from experimental rabbits and human patients) and tracing with anti-human or anti-rabbit peroxidase conjugate. No protein fraction of 57 kDa was detected in ES or larval antigens collected from T. canis, T. vitulorum, A. lumbricoides and N. americanus. Using TcES-57, a specific anti-serum was produced in rabbits and a double sandwich ELISA was developed. This test was validated using known seropositive sera from toxocariasis patients, sera from A. lumbricoides or N. americanus patients, and 50 serum samples from cats. These tests revealed that TcES-57 antigen is specific to T. canis infection and does not cross react with sera of other related infections. Thus, ELISA based on TcES-57 antigen was proven to be an effective tool in the diagnosis of toxocariasis and studies on the role of T. canis in the epidemiology of human toxocariasis.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제38권2호
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• pp.137-142
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• 2011

Auxin is a group of small natural and synthetic molecules having diverse regulatory functions in plant growth and development. In this review, two auxin binding proteins identified by biochemical experiments to measure their auxin binding activities and biochemical functions are described. ABP1, a 22 kDa auxin binding protein, shows strong auxin binding affinity and possibly plays an important role in plant development, although its biochemical function are still unclear. ABP57, a 57 kDa soluble protein from rice shoots, has both of IAA binding activity and the plasma membrane proton pump activation. Although it is yet to be accomplished, the improvement of agronomic traits using auxin binding proteins is worth to be considered, since auxin is known to be related to such a diverse crop traits.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제25권2호
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• pp.129-136
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• 1997

Helicobacter pylori is a spiral-shaped, microaerophilic human gastric pathogen causing chronic-active gastritis in association with duodenal ulcer and gastric cancer. To investigate the possibility of H. pylori outer membrane proteins (OMPS) as the oral vaccine antigens, sarcosine-insoluble outer membrane fraction has been prepared from H. pylori NCTC 11637. The major OMPs having apparent molecular masses of 62 kDa, 54 kDa and 33 kDa were detected by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which were identified as urease B subunit (UreB), heat shock protein (Hsp54 kDa) and urease A subunit (UreA), respectively. Minor protein bands of 57 kDa, 52 kDa, 40 kDa, 36 kDa and 31 kDa were also observed. The antigenicity of H. pylori OMPs and antigenic cross-reactivity among the strains were determined by immunoblot analysis using anti-H. pylori OMPs antisera or intestinal lavage solutions. The results showed that UreB, Hsp54 kDa, UreA and 40 kDa proteins vigorously stimulated mucosal immune response rather than systemic immunity. From this results, these proteins seemed to be useful as the antigen candidates for the oral vaccine. The immunoblotting results with surface proteins from eight isolated H. pylori strains were similar to that of H. pylori NCTC 11637. The IgA which had been arised from oral administration of H. pylori OMPs, was able to bind H. pylori whole-cells.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권1호
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• pp.84-88
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• 2002

The effect of chitosan on the growth of plant pathogenic fungi was investigated. Chitosan solubilized in acetic acid showed much higher and more consistent antifungal activity than that solubilized in HCl. The antifungal activity was not significantly affected within a DA (degree of deacetylation) range of $57.3-99.2\%$ tested. Water-soluble and low molecular weight chitosan ($57.3\%$ DA) against 6 plant pathogens showed that Monosporascus canonballus and Pythium irregulare were the most susceptible to the chitosan, while Fusarium oxysporum and F. graminearum were the most resistant. At a concentration of 2.5 mg/ml, the growth of pathogens was completely inhibited except for F. oxysporum. The $MIC_50$ values varied depending on both the DA of the chitosan and the plant pathogens. A chitosan with $57.3\%$ DA exhibited the lowest $MIC_50$ (ranging <0.1-1.8 mg/ml) and that with $84.7\%$ DA the highest $MIC_50$ (ranging <0.4-4.0 mg/ml) depending on the pathogen.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권5호
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• pp.413-419
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• 1998

Acetaminophen 자화성 Pseudomonas sp.에 존재하는 aryl acylamidase[EC 3.5.1.13]는 ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephacel anion exchange chromatography, Phenyl-Sepharose CL-4B hydrophobic interaction chroamtography 및 Sephadex G-100 gel-permeation chromatography를 통해 순수 정제되었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE상에서 분자량을 측정한 결과 56 kDa, Sephadex G-100 gel-permeation chromatography로 측정한 결과 57 kDa이었으며, 따라서 단일한 subunit로 구성된 효소이었다. 정제된 효소의 최대 활성을 위한 pH와 온도는 각각 pH 10.5와 4$0^{\circ}C$이였다. 5$0^{\circ}C$에서 30분간 처리시 34%의 잔존활성을 나타내었다. Acetaminophen과 4'-nitroacetanilide쉐 대한 Km값은 각각 0.10 mM과 0.11 mM 이었다.