• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
• /
• 제14권2호
• /
• pp.138-148
• /
• 1987

5${\alpha}$-dihydrotestosterone(DHT)과 testosterone(T)은 남성 생식기관의 주 생성 호르몬들로 그 구조가 매우 비슷하여 이들 각 개를 특이하게 측정(specific determination)하는 방법이 개발되지 않고 있다. 본 연구는 고속액체 크로마토그라피(HPLC)를 이용하여 이들을 분리한 후 섬광면역측 정법(Luminescence immunoassay, LIA)으로 정량하는 방법을 개발하여 이들의 응용 가능성을 검토하고져 하였다. DHT와 T의 retention time은 각각 10.3min, 17.6min이었다. DHT-LIA와 T-LIA에 서 다른 스테로이드들과의 교차반응도는 방사면역측정법(RIA)과 대동소이하였다. 정도관리(quality control) 시료의 intra-assay variation은 DHT-LIA가 8.7%, T-LIA가 6.0%의 변이계수를 나타내었고, inter-assay variation의 변이계수는 각각 12.0% 및 15.3%이었다. 실측치(y)와 기대치(x)간의 관계를 보면, DHT-LIA경우는 Y=0.94X+0.9(r=0.989), T-LIA는 Y=1.01X+0.06(r =0.988)로 두 측정치 사이에는 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 위의-측정방법을 이용하여 DHT-enanthate와 T-enanthate 처리후 혈청내 DHT 및 T의 농도변화를 조사한 실험결과 LIA와 RIA의 값사이에 유의한 차이가 없었다. 위의 결과로 보아 본 실험에서 개발된 DHT와 T의 섬광면역측정법은 정립되었다고 사려된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
• /
• 제15권2호
• /
• pp.83-92
• /
• 1988

혈액에서 생물학적 활성을 나타내는 (bioavailable) steroid hormone은 주로 비결합형(free form)과 알부민 결합형(albumin-bound form)으로 구성된다. 특히 Testosterone (T)과 5 alpha-Dihydrotestosterone (DHT)의 활성적 분획이 전체의 T, DHT 양에 비해 생리적 현상과 보다 잘 일치하는 것으로 알려지고 있다. 본 연구는 섬광면역측정법(Luminescence immunoassay, LIA)으로 혈청내 활성적 T 및 DHT의 농도의 측정에 이용하고져 하였다. 항체는 T- 또는 DHT-3-CMO-BSA를 항원으로 토끼에 면역주사하여 얻었다. 추적자는 T-3-CMO, DHT-3-CMO에 aminobutylethylisoluminol(ABEI)를 부착시켜 사용하였다. 항체중 IgG분획을 Protein-A-Sepharose CL-4B로 분리한 후 Immunobead(Bio-Rad)에 부착시켜 Solid-phase LIA를 실시하였다. 본 연구에서 LIA는 정확도(accuracy), 정밀도(precision), 감도(sensitivity), 교차반응도(specificity)등을 조사하고, 기존의 방사면역측정법(RIA)과 비교하여 만족할만한 결과를 얻었다. 혈청내 T및 DHT의 활성적 분획의 농도를 측정한 결과는 다음과 같았다. T의 경우는 남성에서 T의 전체량의 33% 이상으로 $7.1{\pm}1.5nmol/l$, 여성에서는 26% 이상으로 $0.28{\pm}0.05nmol/l$이었다. DHT의 활성적 분획은 남성의 경우 $601.7{\pm}85.8pmol/l$, 여성의경우 $52.4{\pm}19.9\;pmol/l$이었다. 이상의 결과를 보아 본 연구에서 이용된 LIA는 혈청내 활성적 농도를 측정하기에 충분하다고 사료된다. 또한 이 방법을 이용하여 여성의 Androgenicity 및 남성 정소기능등의 제어방법에 응용될 수 있을 것으로 판단된다.

• 대한약리학회지
• /
• 제25권1호
• /
• pp.1-11
• /
• 1989

혈압 및 심박동수 조절에 대한 serotonin성 기전의 역할을 흰쥐 뇌의 NTS에서 검토하고 catecholamine성 기전과 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 5-HT를 NTS에 주사시 혈압 및 심박동수는 감소되었고, 5-HT 300 pmol을 NTS에 주사하였을 때 가장 현저하게 하강하였다. ${\alpha}-MNE$과 clonidine도 마찬가지로 혈압과 심박동수의 감소를 일으켰다. 5-HT의 효과는 5-HT 수용체 길항제인 ritanserin, methysergide 및 ketanserin의 전처치에 의하여 봉쇄되었다. 2) Reserpine과 6-OHDA를 전처치하였을 때는 5-HT에 의한 혈압 및 심박동수 감소가 현저하게 약화되었다. 3) 5,7-DHT 전처치 후에는 5-HT에 의한 혈압 및 심박동수 감소는 증가하였다. 한편 6-OHDA 전처치에 의하여서도 clonidine의 혈압 및 심박동수 감소 현상은 항진하였다. 4) 5,7-DHT와 6-OHDA를 i.c.v.로 전처치하였을 때 phenylephrine과 sodium nitropursside에 의한 압반사 감수성은 현저히 저하하였고, 이들을 NTS로 주사시도 압반사 감수성이 손상되었다. 5) Immunohistochemistry에 의해 NTS에서 catecholamine성 세포체, 신경축색 말단과 serotonin성 신경축색 말단을 관찰하였고, 6-OHDA 주사후에 catecholamine성 신경축색 말단의 varicosity는 현저히 감소하였다. 한편 5,7-DHT처치에 의하여서는 serotonin성 신경축색 말단의 varicosity가 현저히 감소하였다. 이상의 실험 결과, NTS에 있는 serotonin성 수용체의 활성에 의하여 (1) 혈압 및 심박동수 감소가 일어나며, (2) 이는 catecholamine성 신경계와 관련되어 야기되며, (3) serotonin과 catecholamine성 수용체는 NTS의 postsynaptic site에 존재하고, (4) serotonin과 catecholamine성 신경세포는 압반사 조절에 있어서 중요한 역할을 하는 것으로 사료된다.

• Applied Microscopy
• /
• 제28권4호
• /
• pp.425-434
• /
• 1998

This study was designed to investigate the microglial reactions to the neurodegenerative changes in the cat retina. All experiments were performed using adult cats of both sex, weighing $2,500g\sim3,500g$. 5,7-DHT $(100{\mu}g)$ dissolved in 0.1% ascorbic acid was injected into the vitreous body. All injections were performed in one-side eye; the other side served as the control, which was injected only with 0.1% ascorbic acid. Cats were sacrificed at 1, 3, 7, 14 and 21 days after intravitreal injection of 5,7-DHT For light microscopy, retinae were fixed with 4% paraformaldehyde and processed using NDPase histochemistry. Same retinae were fixed with 1% para(formaldehyde-2.5% glutaraldehyde and processed for electron microscopy. NDPase-positive microglial cells were mainly distributed in the inner plexiform layer of the retina, and characterized by a small somata with a few slender processes, which were also extended in the ganglion cell layer (GCL) and inner nuclear layer (INL). The intensity of the microglia stained for NDPase was abruptly increased at 7 day as compared with that of the control, and thereafter continuously sustained until 21 day, the last experimental group in this study. Under the electron microscopical observation, microglial cells in the control group exhibited elongate nucleus with perinuclear chromatin condensation, and the perikaryon was scanty. However, a few hypertrophic glial cells were frequently found at 3 days after the drug injection. By 7 day, most microglial cells directed toward the degenerated neurons in the GCL, and the number of microglial cells was slightly increased as compared with the former group. At the 14 day, most microglial cells wrapped the degenerated cells in the GCL, and a few cells showed phagocytotic features. By 21 day, most microglial cells were engaged in phagocytotic activity, and their cytoplasm was filled with the phagorytosed material. Based on the results, 5,7-DHT may act as a specific neurotoxin to the cat retina, and microglial reactions to the neuronal death are already induced in early experimental stage. These results indicate that the microglial cells in the cat retina show characteristic features as a protective effect of neural tissue.

• 생명과학회지
• /
• 제31권7호
• /
• pp.631-640
• /
• 2021

Houttuynia cordata Thunberg는 전통의학에서 다양한 약리학적 작용에 대해 연구되어 왔다. 본 연구에서, 거세 및 테스토스테론 프로피오네이트(TP) 주입에 의해 유도된 양성 전립선 비대증(BPH) 모델에 대한 Houttuynia cordata 에탄올 추출물(HCE)의 영향을 조사했다. 총 30마리의 쥐를 6개의 그룹으로 나누었다. 한 그룹은 정상 대조군으로 사용되었고 다른 그룹은 거세 후 14일 동안 복강내 TP를 주입하여 BPH를 유도하였다. 양성 대조군은 BPH 모델에 매일 피나스테라이드(5 mg/kg)를 투여했다. 피나스테라이드 대신 HCE (0.5, 1, 2mg/kg)를 투여한 군은 실험 군으로서 대조군과 비교하였다. 체중 100 g 기준으로 전립선 무게에 대한 통계적 유의성은 없었다. ELISA 검사로 5-α 환원효소 및 디하이드록시 테스토스테론(DHT) 농도를 측정하였으며, 모든 실험군에서 유의미한 감소가 있었다. 5-α 환원효소의 경우 HCE (0.5 mg/kg) 군이 가장 낮았고, DHT는 HCE (2 mg/kg) 군에서 가장 낮은 수치를 보였다. 전립선에 대한 조직병리학적 관찰에서 대조군과 HCE (2 mg/kg) 투여 군은 정상 세포 형태를 보였고 세포팽창이 없었다. 그러나 음성 대조군과 HCE (1 mg/kg) 군에서는 세포가 부풀어 오르고 세포 사이의 간격이 좁아졌다. 특히 HCE (0.5 mg/kg) 군에서는 일부 세포가 터지는 현상이 나타났다. 따라서 2 mg/kg 이상의 HCE를 투여하는 것이 BPH의 보호 효과에 적합할 것이다.

• The Korean Journal of Pain
• /
• 제36권1호
• /
• pp.51-59
• /
• 2023

Background: This study investigated the effect of an excess and a deficit of spinal 5-hydroxytryptamine (5-HT) on the mechanical allodynia and neuroglia activation in a rodent pain model of carrageenan inflammation. Methods: Male Sprague-Dawley rats were implanted with an intrathecal (i.t.) catheter to administer the drug. To induce an excess or deficit of 5-HT in the spinal cord, animals were given either three i.t. 5-HT injections at 24-hour intervals or a single i.t. injection of 5,7-dihydroxytryptamine (5,7-DHT) before carrageenan inflammation. Mechanical allodynia was measured using the von Frey test for 0-4 hours (early phase) and 24-28 hours (late phase) after carrageenan injection. The changes in the activation of microglia and astrocyte were examined using immunofluorescence of the dorsal horn of the lumbar spinal cord. Results: Both an excess and a deficit of spinal 5-HT had no or a minimal effect on the intensity of mechanical allodynia during the early phase but prevented the attenuation of mechanical allodynia during the late phase, which was observed in animals not treated with i.t. 5-HT or 5,7-DHT. Animals with an excess or deficit of 5-HT showed stronger activation of microglia, but not astrocyte, during the early and late phases, than did normal animals. Conclusions: Imbalance in the descending 5-HT pathway in the spinal cord could aggravate the mechanical allodynia and enhance the activation of microglia, suggesting that the spinal 5-HT pathway plays an essential role in maintaining the nociceptive processing in balance between facilitation and inhibition in inflammatory pain caused by carrageenan inflammation.

• Nutrition Research and Practice
• /
• 제7권3호
• /
• pp.172-177
• /
• 2013

Benign prostatic hyperplasia (BPH) is one of the most common diseases among elderly men. As the old-age population is increasing recently, it is to our interest to observe the growing BPH within them. In BPH, the dihydrotestosterone (DHT) acts as promotes prostate growth. It inhibits enzyme $5{\alpha}$-reductase that is involved in the conversion of testosterone to the DHT activity which reduces the excessive prostate growth. Through experiments, the effects of Phellius linteus water extract performed on the BPH rats were induced by testosterone treatments. For 12 weeks, Sprague-Dawley rats were treated with testosterone for the induction of BPH. Rats were divided into four experimental groups: the not treated group (N), the testosterone injection and D.W treatment group (TN), the testosterone injection and Phellinus linteus treatment group (TP) and testosterone injection and finasteride treatment group (TF). Prostate weight, volume and weight ratio in the TP group and the TF group were significantly lower than the TN group. Testosterone and DHT levels in the TN group were significantly higher than that of the N group. And the TP group was significantly decreased than that of the TN group. While prostates of control rats revealed severe acinar gland atrophy and stromal proliferation; the TP and TF groups showed trophic symptoms and were lined by flattened epithelial cells, thus, the stromal proliferation is relatively low as compared to the TN group. These suggest that Phellinus linteus water extracts may be an useful remedy for treating the benign prostatic hyperplasia.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제32권5호
• /
• pp.553-559
• /
• 2019

To investigate the effects of antioxidant activities and hair loss prevention of extracts from Platycodon grandiflorum, we've prepared chloroform (CF) and ethylacetate fractions (EA) extracted from P. grandiflorum. In the results of DPPH radical scavenging assay, the two fractions showed dose-dependent antioxidant activities. Furthermore, in the ABTS assay, the two fractions exhibited the inhibitory effect over 90% at 10, 50, 100, 200 mg/mL. To investigate the inflammation inhibitory effect, we used RAW264.7 cells, these extracts were inhibited inflammatory reaction by suppressing the production of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) in dose-dependent manner. In the assay of HaCaT cells' proliferation, the 24 hr treatment of the extracts significantly accelerarted cell proliferation in the range of concentrations used. The two fractions inhibited the proliferation of Malssezia furfur, the bacteria induce the dandruff. Finally, the CF could significantly inhibit the DHT production at 1, 10, 50, $100{\mu}g/mL$, but EA showed the inhibitory effect at the concentration over $50{\mu}g/mL$. The overall results of this study suggest that the chloroform (CF) and ethylacetate fractions (EA) from P. grandiflorum could be a useful raw material for the hair loss prevention products.

• 한국전자현미경학회:학술대회논문집
• /
• 한국현미경학회 1998년도 제29차 춘계학술대회
• /
• pp.25-25
• /
• 1998

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제24권5호
• /
• pp.720-726
• /
• 1995

녹차와 더불어 시판되고 있는 감잎차의 제조방법을 기존 제차공정과 달리할 경우 차의 성분에 어떤 영향을 미치며 또 이들 성분과 품질과의 상관관계를 밝히는 기초자료를 얻기 위하여 감잎차의 제조 방법을 달리하여 카페인, 탄닌, 비타민 C, 핵산관련 물질, 유리당 및 구성 아미노산을 분석 비교하였다. 차엽의 수분은 6.9~7.0%, 회분은 8.3~9.0%, 조지방은 6.1~6.9%였다. 전질소의 함량은 3.4~4.8%, 차엽의 카페인 함량은 $178.4~209.8{\mu}mol/g$, 탄닌 함량은 29.1~38.5%, 비타민 C는 325.3~2084.7mg%로서 RHT가 2084.7mg%로 그 함량이 월등히 높았다. 찻물의 경우 카페인의 함량이 $101.5~130.1{\mu}mol/g$, 탄닌의 함량이 15.4~25.9mg%였으며, 비타민 C는 111.0~1274.3mg%로 차엽과 마찬가지로 RHT에서 1274.3mg%으로 다른 차에 비해 아주 높은 함량을 보였으며, 찻물의 용출율은 51.1%였다. 차엽의 구성 아미노산은 glutamic acid, aspartic acid, leucine 및 phenylalanine순으로 그 함량이 높았고, 이들 4종이 아미노산이 총 아미노산에 대하여 SHT는 39.8%, DHT는 38.8%, RHT는 39.1%였으며, 이중에서도 특히 함량이 높은 것은 glutamic acid(10.9~12.9 mg%)였다. 찻물의 구성아미노산의 함량은 차엽과 마찬가지로 glutamic acid가 가장 높았고, 다음이 proline, histidine 및 arginine 순이었다. 핵산관련 물질(CMP, IMP, AMP, UMP, GMP, hypox-anthine)의 함량은 생엽 $119.2{\mu}mol/100g$, 차엽 및 찻물 모두에서 CMP의 함량이 많았다. 차엽 중에서 CMP 다음으로 함량이 높은 것을 보면 SHT에서는 GMP, DHT는 AMP, RHT는 UMP였으며, 찻물의 경우도 역시 차엽과 비슷한 경향을 보였다. 유리당의 함량은 생엽의 경우 sucrose의 함량이 $85.2{\mu}mol/100g$으로 가장 높았고, SHT, DHT 및 RHT에서 모두 fructose의 함량이 높았으며, 찻물 역시 차엽과 마찬가지로 sucrose의 함량이 높게 나타났다.