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Cloning and Expression Analysis of a Chitinase Gene Crchi1 from the Mycoparasitic Fungus Clonostachys rosea (syn. Gliocladium roseum)

  • Gan, Zhongwei;Yang, Jinkui;Tao, Nan;Yu, Zefen;Zhang, Ke-Qin
    • Journal of Microbiology
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    • 제45권5호
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    • pp.422-430
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    • 2007
  • Clonostachys rosea (syn. Gliocladium roseum) is a well-known biocontrol agent and widely distributed around the world. In this study, an endochitinase gene Crchi1 was isolated from the mycoparasitic fungus C. rosea using the DNA walking strategy. The Crchi1 ORF is 1,746 bp long and interrupted by three introns. The cloned gene Crchi1 encodes 426 amino acid residues and shares a high degree of similarity with other chitinases from entomopathogenic and mycoparasitic fungi. Several putative binding sites for transcriptional regulation of Crchi1 in response to carbon (5'-SYGGRG-3') and nitrogen (5'-GATA-3') were identified in the upstream of Crchi1. Expression of Crchi1 gene in different carbon sources was analyzed using real-time PCR (RT-PCR). We found that the Crchi1 expression was suppressed by glucose but strongly stimulated by chitin or solubilized components of the cell wall from Rhizoctonia solani. Phylogenetic analysis of chitinases from entomopathogenic and mycoparasitic fungi suggests that these chitinases have probably evolved from a common ancestor.

상급종합병원 간호사의 사전연명의료의향서에 대한 지식, 자신감 및 교육요구도 (Knowledge, Confidence, and Learning Needs Regarding Advance Directives among Hospital Nurses)

  • 장난순;박해숙;김미라;이주연;조여원;김경미;손연정
    • 중환자간호학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.35-45
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    • 2018
  • Purpose : Nurses' knowledge regarding advance directives may affect their administration of and confidence towards end of life care. This study aimed to describe the relationships of knowledge, confidence, and learning needs with advance directives among hospital nurses. Method : This cross-sectional study was performed at a tertiary university hospital in Seoul between September 25 and October 14, 2017. Convenience sampling was used to recruit nurses who provided bedside care and had at least 1 year of clinical experience. We used a validated self-report questionnaire. Results : The mean score of knowledge, confidence and learning needs were $5.00{\pm}1.73$, $29.81{\pm}7.52$, and $64.54{\pm}8.48$ respectively. Hospital nurses' knowledge, confidence and learning needs were significantly different according to age, job position, educational level and perceived advance directives. Knowledge regarding advance directives was significantly associated with confidence (r = .27, p < .001) and learning needs (r = .16, p = .005). Conclusion : Knowledge regarding advance directives was relatively low compared to the findings of previous studies. Therefore, nurses should be knowledgeable and encouraged to initiate advance directives. It is necessary to develop a standardized educational program regarding advance directives based on Korean cultures.

FlexRay 프로토콜 설계 및 로봇 시스템 응용 (Implementation of FlexRay Communication Controller Protocol and its Application to a Robot System)

  • 강현수;허일남;김용은;정진균
    • 대한전자공학회논문지TC
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    • 제45권6호
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    • pp.1-7
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    • 2008
  • FlexRay는 차세대 차량 내 전자 장치간의 통신을 위해 고속의 시리얼 통신, time triggered bus, fault tolerant 통신을 제공하는 새로운 네트워크 통신 시스템의 표준이다. FlexRay Communication Controller(CC)는 FlexRay 프로토콜 규격의 핵심 부분이다. 본 논문에서는 먼저 SDL(Specification and Description Language)를 이용하여 FlexRay CC 프로토콜 규격과 기능 부분을 설계한다. 다음 설계한 SDL 소스를 기반으로 Verilog HDL을 이용하여 하드웨어로 설계한다. 설계한 FlexRay CC는 Samsung $0.35\;{\mu}m$ 공정을 이용하여 합성하였으며, 그 결과 80 MHz의 속도로 동작하는 것으로 나타났다. 또한 FlexRay 시스템의 동작을 확인하기 위해 로봇에 적용되는 음원위치 추정 시스템에 응용하였다. 응용 시스템은 ALTERA Excalibur ARM EPAX4F672C3을 이용하여 검증하였으며 성공적으로 동작함을 확인하였다.

FlexRay 프로토콜 설계 및 자동차 경보 시스템 응용 (Implementation of FlexRay Protocol Specification and its Application to a Automobile Advance Alarm System)

  • 허일남;양상훈;정진균
    • 대한전자공학회논문지TC
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    • 제45권8호
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    • pp.98-105
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    • 2008
  • FlexRay는 높은 유연성과 신뢰성을 갖는 고속의 통신프로토콜이다. 자동차회사와 반도체회사들에 의해 개발되었고 x-by-wire 시스템을 이용하여 차량 내 LAN으로 구현된다. FlexRay는 차량 내 전자 장치간의 통신을 위해 고속의 시리얼 통신, time triggered bus, fault tolerant 통신을 제공한다. 본 논문에서는 먼저 SDL(Specification and Description Language)을 이용하여 FlexRay communication controller와 bus guardian 프로토콜 규격과 기능 부분을 설계한다. 다음 설계한 SDL 소스를 기반으로 Verilog HDL을 이용하여 하드웨어로 설계한다. 설계한 FlexRay 시스템은 Samsung $0.35{\mu}m$ 공정을 이용하여 합성하였으며, 그 결과 76 MHz의 속도로 동작하는 것으로 나타났다. 또한 FlexRay 시스템의 동작을 확인하기 위해 차량에 적용되는 자동차 경보 시스템에 응용하였다. FlexRay 시스템은 ALTERA Excalibur ARM EPAX4F672C3을 이용하여 검증하였으며 성공적으로 동작함을 확인하였다.

Expressional Patterns of Connexin Isoforms in the Rat Epididymal Fat during Postnatal Development

  • Lee, Ki-Ho;Kim, Nan Hee
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제22권1호
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    • pp.29-38
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    • 2018
  • In the multicellular tissue, cell-cell interaction is important for a precise control of its function. The exchange of signaling molecules between adjacent cells via connexon allows the functional harmony of cells in the tissue. The present research was to determine the presence and expressional patterns of connexin (Cx) isoforms in the rat epididymal fat during postnatal development using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) analysis. Of 13 Cx isoforms examined, expression of 11 Cx isoforms in the epididymal fat during postnatal development was detected. These Cx isoforms include Cx26, Cx31, Cx31.1, Cx32, Cx33, Cx36, Cx37, Cx40, Cx43, Cx45, and Cx50. Expressional levels of all Cx isoforms at 1 and 2 years of age were significantly higher than those at the early postnatal ages, such as 7 days, 14 days, and 24 days of ages. Except Cx33 and Cx43, the transcript levels of rest Cx isoforms at 1 year of age were significantly lower than that at 2 years of age. In addition, expressional patterns of Cx isoforms between 7 days and 5 months of ages generally varied according to the isoform. The existence of various Cx isoforms in the rat epididymal fat has been identified and expression of each Cx isoform in the epididymal fat during postnatal development has shown a particular pattern, distinguishable from the others. To our knowledges, this is the first report showing expressional patterns of Cx isoforms at transcript level in the epididymal fat at various postnatal ages.

Caffeine Treatment during Oocyte Aging Improves the Developmental Rate and Quality in Bovine Embryos Developing In Vitro

  • Choi, Hyun-Yong;Lee, Sung-Hyun;Xu, Yong-Nan;Lee, Seung-Eun;Kim, Nam-Hyung
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제37권4호
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    • pp.281-287
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    • 2013
  • In mammal, unfertilized oocytes remain in the oviduct or under in vitro culture, which is called "oocyte aging". This asynchrony negatively affects fertilization in pre- and post-implantation embryo development. Caffeine a phosphodiesterase inhibitor is known to rescue oocyte aging in several species. The objective of this study is to determine the cytoskeleton distribution in aged oocytes and the embryo developmental ability of aged oocytes in the present or absence of caffeine during maturation. Caffeine treatment increased the incidence of normal spindle assembly of aged oocytes (treatment, $67.57{\pm}4.11%$ aging, $44.61{\pm}6.4%$) and no significant differences compared to control group. Fluorescence values were compared using ROS (Reactive oxidation species) stain. Fluorescence values appear of control group intensity rate ($51.53.{\pm}3.80$), aging group ($68.10{\pm}5.54$) and treatment of caffeine ($45.04{\pm}2.98$). Aged oocytes that were derived from addition of caffeine to the IVM (in vitro maturation) medium had significantly increased 2-cell that developed to the blastocyst stage compared to the aging group. Blastocysts, derived from caffeine treatment group, significantly increased the total cell number compare aging ($90.44{\pm}10.18$ VS $67.88{\pm}7.72$). Apoptotic fragments of genomic DNA were measured in individual embryo using TUNEL assay. Blastocyst derived from caffeine treatment group decreased significantly the apoptotic index compared to blastocyst derived from aging group. In conclusion, we inferred that the caffeine treatment during oocyte aging can improve the developmental rate and quality in bovine embryos developing in vitro.

Effect of harvest dates on β-carotene content and forage quality of rye (Secale cereale L.) silage and hay

  • Zhao, Guo Qiang;Wei, Sheng Nan;Liu, Chang;Kim, Hak Jin;Kim, Jong Geun
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제63권2호
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    • pp.354-366
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    • 2021
  • Limited data about the effects of various factors on forage quality and β-carotene content of rye produced in Korea are available, so this study investigated the effects of two preservation methods. Samples were collected from rye harvested every 5 days between April 25 and May 31, and comparisons were done among rye silage wilted for different periods of time and hay of three growth stages of rye. For the silage, dry matter (DM), acid detergent fiber (ADF), and neutral detergent fiber (NDF) contents increased with advanced maturity of rye, whereas crude protein, in vitro dry matter digestibility (IVDMD), total digestible nutrients (TDN), relative feed value (RFV), and DM loss decreased (p < 0.0001). Wilting increased the DM content and pH value significantly (p < 0.0001). Silage harvested at the heading stage had the lowest pH value (4.45), propionic acid (0.83 g/kg DM), butyric acid (0 g/kg DM), and fungi and yeast populations (3.70 Log CFU/g of fresh matter [FM]); conversely, it had the highest lactic acid (9.7 g/kg DM), lactic acid bacteria (LAB) (6.87 Log CFU/g of FM), total microorganisms (TM) (7.33 Log CFU/g of FM), and Flieg's score (70) (p < 0.0001). Wilting elevated LAB and TM populations, but it had no consistent effect on other fermentation products. Both delayed harvest and prolonged wilting decreased β-carotene content. Rye silage harvested around May 9 (heading stage) with 24 h of wilting was preferred for highland, Pyeongchang. For rye hay, advanced maturity decreased DM loss, IVDMD, TDN, and RFV, but it increased DM, ADF, and NDF significantly (p < 0.05). β-carotene was decreased by delay of hay-making. Consequently, to attain lower DM loss and higher hay quality, the harvest date of May 9 (heading stage) is recommended.

꽃지누아리 에탄올 추출물의 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 항염증 효과 (Anti-Inflammatory Effect of Grateloupia imbricata Holmes Ethanol Extract on LPS-Induced RAW 264.7 Cells)

  • 김민지;배난영;김꽃봉우리;박지혜;박선희;최정수;안동현
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제45권2호
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    • pp.181-187
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    • 2016
  • 본 연구에서는 홍조류인 꽃지누아리 에탄올 추출물(GIHEE)의 항염증 활성을 확인하기 위해 LPS로 활성화된 RAW 264.7 세포로부터 분비되는 염증매개성 물질들의 발현량 억제를 관찰하여 추출물의 항염증 활성을 탐색하고자 하였다. 그 결과 GIHEE 50 및 $100{\mu}g/mL$ 농도 처리 시 LPS로 유도된 염증반응에서 NF-${\kappa}B$ 활성 억제와 더불어 MAPKs의 인산화를 효과적으로 억제함을 보였다. 염증반응 매개인자들인 NO 및 염증성 사이토카인의 생성도 효과적으로 제어함을 보였으며, 특히 GIHEE $50{\mu}g/mL$ 농도에서 TNF-${\alpha}$ 및 IL-$1{\beta}$ 분비량은 각각 약 51% 및 30% 이상, IL-6 분비량은 $100{\mu}g/mL$에서 약 54% 이상의 높은 분비량 감소를 나타내었다. 따라서 GIHEE는 이들 염증매개성 물질들의 활성을 효과적으로 억제함으로써 항염증 활성을 나타내었으며, 염증성 질병의 예방 및 치료에 효과적인 기능성 소재로의 가능성이 충분하다고 사료된다.

LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 가락진두발 에탄올 추출물의 항염증 효과 (Anti-Inflammatory Effect of Chondrus nipponicus Yendo Ethanol Extract on Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Responses in RAW 264.7 Cells)

  • 김민지;배난영;김꽃봉우리;박지혜;박선희;장미란;안동현
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제45권2호
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    • pp.194-201
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    • 2016
  • 본 연구에서는 lipopolysaccharide(LPS)로 자극한 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 가락진두발 에탄올 추출물(CNYEE)의 항염증 효과를 알아보기 위하여 nitric oxide(NO)와 pro-inflammatory cytokine의 분비량을 확인하였다. 그 결과 CNYEE 모든 농도에서 LPS만을 처리한 대조군과 비교하였을 때 유의성 있게 NO와 pro-inflammatory cytokine의 분비량을 저해하였으며, 특히 $100{\mu}g/mL$ 농도에서는 IL-6의 분비량을 70% 이상 억제하였고, TNF-${\alpha}$ 및 IL-$1{\beta}$의 분비량은 50% 이상의 억제 효과를 나타내었다. CNYEE에 의한 염증매개물질의 분비 감소가 전사인자인 nuclear factor-${\kappa}B$(NF-${\kappa}B$)의 핵 내 전이 pathway를 저해함으로써 나타난 결과인지 확인하기 위하여 iNOS, COX-2 및 NF-${\kappa}B$ p65의 단백질 발현량을 관찰한 결과, 비교적 낮은 농도인 $50{\mu}g/mL$에서 40% 이상의 저해능을 보인 것으로 보아 NO와 cytokine의 분비 억제 결과가 NF-${\kappa}B$ pathway를 저해함으로써 나타난 것임을 유추할 수 있었다. 또한 LPS에 의해 증가한 mitogen-activated protein kinases의 인산화를 확인한 결과, CNYEE 처리에 의해 농도 의존적으로 유의성 있게 저해되었다. 이러한 결과를 종합해볼 때 가락진두발 에탄올 추출물은 염증매개물질의 분비를 효과적으로 저해함으로써 추후 천연물로서 염증 치료제의 개발이 가능할 것으로 생각한다.

Cyclosporin A로 유도된 생쥐 림프절의 세포성 면역억제에 관한 면역조직화학적 연구 -T 림프구, IL-2 수용기 및 NK세포의 변화를 중심으로- (Immunohistochemical Study on the Suppression of Cell mediated immunity in Lymph node of mouse by Cyclosporin A -Based on the change of T lymphocytes, Il-2 receptors, and NK cells-)

  • 김진택;박인식;안상현;최난희;김동환
    • 동국한의학연구소논문집
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    • 제6권2호
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    • pp.99-107
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    • 1998
  • 본 실험은 cyclosporin A(CsA)에 의한 시간의 경과에 따른 림프절에서의 세포성 면역억제를 조사하기 위해서 시행된 것으로 BALB/C계 생쥐에 10일동안 CsA(45mg/kg/day) 투여 후 림프절에서의 T 림프구, IL-2 수용기 그리고 자연살해(NK)세포의 분포 변화를 관찰하였다. 대조군의 림프절에서는 L3T4(CD4)에 양성반응을 보이는 도움 T림프구, Ly2(CD8)에 양성반응을 보이는 세포독성 T 림프구 그리고 CD25R에 양성반응을 보이는 IL-2 수용기를 가진 세포는 곁피질(paracortex)과 수질동(medullary sinus)에서 분포하였다. CsA 투여 후 처음 3일까지는 이들 양성반응세포의 분포 변화는 없었으며 양성반응성의 변화도 없었다. 그러나 CsA 투여 7일부터 양성반응 세포수의 감소와 양성반응성의 약화가 관찰되기 시작하였으며 이러한 변화는 시간이 경과하여 14일에 이르렀을 때 가장 큰 감소추세로 나타났다. 한편 NK1.1(CD56)에 양성반응을 보이는 자연살해세포는 피질과 수질에 분포하였으며 CsA 투여 후 시간의 경과에 따라 양성반응 세포수가 감소하였으며, 이러한 감소는 14일에서 가장 큰 것으로 나타났다. 이상의 결과로 미루어보아 CsA 투여는 림프절에서의 IL-2 분비저해를 통해 T 림프구와 NK세포의 활성을 차단하여 선택적이면서 효과적인 세포성 면역억제작용을 하고 있는 것으로 사료된다.

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