• BMB Reports
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• 제43권2호
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• pp.97-102
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• 2010

Clenbuterol, a $\beta_2$-adrenoceptor agonist, has been proven to be a powerful repartition agent that can decrease fat deposition. Based on results from our previous cDNA microarray experiment of pig clenbuterol administration, a novel up-regulated EST was full-length cloned (4859 bp encoding 1041 amino acids) and found to be the pig homolog of large tumor suppressor 2 (Lats2). We mapped pig Lats2 to chromosome 11p13-14 by using FISH, and western blotting demonstrated that pig Lats2 protein was most abundant in adipose. In Drosophila, Lats2 ortholog was reported as a key component of the Hippo pathway which regulates cell differentiation and growth. Here, we show that pig Lats2 exhibit inverted expression to YAP1, another member of the Hippo pathway which positively regulates cell growth and proliferation, during the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes. Our results suggested that Lats2 may involve in Hippo pathway regulating the fat reduction by inhibiting adipocyte differentiation and growth.

• Toxicological Research
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• 제22권4호
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• pp.307-313
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• 2006

The development of in vitro assays has been recommended to screening and testing the potential endocrine disruptors (EDs). These assay systems focus only on identifying the estrogenic or antiestrogenic activity of EDs, whereas a few studies have been carried out to screen the thyroid hormone (TH) disruptors. The aim of this study was to evaluate a test system to detect TH disruptors using rat pituitary tumor $GH_3$ cells. The test system is based on the TH-dependent increase in growth rate. As expected, L-3,5,3-triiodothyronine ($(T_3)$ markedly induced a morphological change in $GH_3$ cells from flattened fibroblastic types to rounded or spindle-shaped types. $T_3$ stimulated $GH_3$ cell growth in a dose-dependent manner with the maximum growth-stimulating effect being observed at a concentration $1{\times}10^9M$. In addition, $T_3$ increased the release of growth hormone and prolactin into the medium of the $GH_3$ cells culture. Using this assay system, the TH-disrupting activities of bisphenol A (BPA) and its related compounds were examined. BPA, dimethy/bisphenol A (DMBPA), and TCI-EP significantly enhanced the growth of $GH_3$ cells in the range of $1{\times}10^{-5}M\;to\;1{\times}10^{-6}M$ concentrations. In conclusion, this in vitro assay system might be useful for identifying potential TH disruptors. However, this method will require further evaluation and standardization before it can be used as a broad-based screening tool.

• 한방재활의학과학회지
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• 제24권4호
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• pp.1-13
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• 2014

Objectives This study was to investigate the antioxidative capacity, antiobesity effect and anti-diabetes effects of Mori Fructus and dried Mori Fructus in Raw 264.7 cells and 3T3-L1 cells. Methods 3 different types of Mori Fructus extracts (water 100%, ethanol 30%, ethanol 100%) were used in this study. And 3 different types of dried Mori Fructus extracts (water 100%, ethanol 30%, ethanol 100%) were used in this study. Total polyphenol compund, total favonoid compound, DPPH radical scavenging, ROS activity, NO, cell proliferation were measured in the experiment. Expressions of adipogenic transcription factors including $C/EBP-{\alpha}$, $C/EBP-{\beta}$, $PPAR-{\alpha}$, $PPAR-{\gamma}$, $AMPK-{\alpha}$ were analyzed by Real time PCR. Results Mori Fructus extracts measurements are higher than dried Mori Fructus extracts measurements at Total flavonoid compound and total flavonoid compound. Mori Fructus extracts measurements are lower than dried Mori Fructus extracts measurements at DPPH radical scavenging, ROS activity, NO. In RT-PCR analysis, there is a tendency that dried Mori Fructus extracts inhibit the expression of $C/EBP-{\alpha}$, $C/EBP-{\beta}$ genes. In RT-PCR analysis, there is a tendency that dried Mori Fructus extracts promote the expression of $PPAR-{\alpha}$, $PPAR-{\gamma}$, $AMPK-{\alpha}$ genes. Conclusions Mori Fructus is effective on inhibiting the oxidation and dried Mori Fructus is effective on inhibiting the obesity and diabetes.

• Nuclear Medicine and Molecular Imaging
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• 제40권5호
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• pp.263-270
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• 2006

목적: 종양 내 양전자방출단층촬영으로 세포증식을 영상화하기 위해 $[^{11}C]$thymidine과 같은 다양한 방사성의약품이 개발되었다. 그러나 $[^{11}C]$thymidine은 C-11의 짧은 반감기와 대사과정의 추적에 문제점을 가지고 있어 문제점을 해결하기 위해 $[^{11}C]$thymidine을 대신하여 3'-$[^{18}F]$fluoro-3'-deoxythymidine ($[^{18}F]$FLT)이 개발이 보고되었다. 본 연구에서는 thymidine을 출발물질로 하여 총 6 단계에 걸쳐 3'-$[^{18}F]$fluoro-3'-deoxythymidine ($[^{18}F]$FLT)의 합성 하였다. 또한 합성된 $[^{18}F]$FLT를 이용하여 FET, FDG의 9L 세포에서 세포섭취율을 비교하였으며 생체 분포 및 양전자방출단층촬영 영상을 얻어 유용성을 검증하고자 하였다. 대상 및 방법: $[^{18}F]$FLT 전구체 3-N-tert-butoxycarbonyl-(5'-O-(4,4'-dimet hoxytriphenylmethyl)-2'-deoxy-3'-O-(4-nitrobenzenesulfonyl)-${\beta}$-D-threopentofuranosyl)thymine는 N3-위치에 tert-butoxycarbony (t-Boc)기를 도입하고, 3'-위치에 친핵성 치환반응을 유도하기 위한 이탈기로 nitrobenzenesulfonyl기를 도입하였다. 방사성동위원소 $^{18}F$의 표지는 전구체를 $120^{\circ}C$, acetonitrile 용매하에서 수행하였고 0.5 N HCl로 보호기를 제거하였다. 표지된 $[^{18}F]$FLT를 alumina N step-pak과 고성능액체크로마토그래피를 이용하여 정제하였다. $[^{18}F]$FLT의 세포섭취율은 $[^{18}F]FET,\;[^{18}F]FDG$와 9L 세포에서 비교하였고, 체내동태는 종양세포를 이식한 쥐를 이용하여 10분, 30분, 60분, 120분에 측정하였으며, 양전자방출단층촬영 영상을 얻었다. 결과: HPLC 분리 후 $[^{18}F]$FLT의 방사화학적 수율은 약 20-30% 정도였고 방사화학적 순도는 95% 이상이었다. 시험관 섭취율에서 $[^{18}F]$FLT는 시간이 지남에 따라 증가하는 양상을 보였고 생체분포 실험에서 주사 후 120분에서 tumor/blood, tumor/muscle, tumor/brain의 비율은 $1.61{\pm}0.34,\;1.70{pm}0.30,\;9.33{\pm}2.22$를 나타내었다. 또한, 양전자방출단층촬영 결과 종양에 국소화된 영상을 얻었다. 결론: $[^{18}F]$FLT의 종양세포 섭취는 정상 뇌에 비해 월등히 높게 나타났으며, 양전자방출단층 촬영 결과는 뇌종양 진단을 위한 방사성의약품으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

• Investigative Magnetic Resonance Imaging
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• 제17권3호
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• pp.181-191
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• 2013

목적: 급성 신부전 쥐 모델에서 상자성 철 산화물 (superparamagnetic iron oxide(SPIO)로 표지한 인간탯줄혈관내피 세포를 자기공명영상으로 추적할 수 있는지 그 유용성을 평가하고자 하였다. 대상과 방법: 인간탯줄혈관내피 세포를 SPIO와 poly-L-lysine (PLL) 혼합물로 표지 하였다. SPIO 농도에 따라서 이완율, 세포 생존율, 표지 안정성을 SPIO 농도의 변화에 따라 평가하였다. 인간탯줄혈관내피 세포를 급성 신부전 쥐 모델에서 꼬리정맥을 통하여 주사하였다. MR을 이용한 추적 검사는 $T2^*$ 경사에코 MR 영상을 이용하였다. 1, 3, 5, 7일째 추적한 MR 영상 소견을 조직 소견과 서로 견주어 보았다. 결과: SPIO-PLL 혼합물을 표지 한 후 Prussian blue 염색에서 평균 $98.4{\pm}2.4%$ 세포가 양성반응을 보였다. 3일과 5일 후 측정한 이완율은 1일에 비해 큰 차이가 없었다. 인간탯줄혈관내피 세포를 SPIO로 표지 한 후 안정성이 유지됨을 알 수 있었다. 추적 MR 영상에서 급성신부전을 유도한 왼쪽 신장 외곽 신 수질에서 신호강도 소실을 보였으나 오른쪽은 정상이었다. 3, 5, 7일 후 촬영한 영상에서 왼쪽 신 수질에서 보인 신호강도 소실이 점차 사라졌으나 오른쪽 신장에서는 여전히 특별한 변화를 보이지 않았다. 조직학 검사에서도 MR 영상의 신호강도 소실이 Prussian blue 염색을 보인 부분과 일치하였다. 면역화학적 분석에서 신 수질에서 보인 세포들이 인간탯줄혈관내피 세포임을 확인하였다. 결론: MR 영상은 급성 신부전 치료의 한 방법인 세포 치료의 경우 세포 추적 검사에 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제18권1호
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• pp.119-123
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• 2011

In order to compare what kinds of transcription factors are associated with the inhibition of preadipocyte cell proliferation, we prepared several grape extracts and tested the expression patterns by reverse transcription-polymerase chain reaction. As a result, 50% ethanol extract of Campbell early seed inhibited adipogenesis derived from the MDI solution. Extract of Campbell early seed was significantly inhibited lipid droplet formation and expression of molecular factors C/EBP-alpha and delta in 3T3-L1 cells. It is suggested that grape extracts of fractions would be a good candidate for the development of regional skin fat modulator.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제29권5호
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• pp.479-484
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• 2004

감염근관내 spirochetes의 존재 유무에 대한 논란이 많았으나 최근 PCR을 사용한 세균검출 실험에서 Treponema denticola 균주가 감염근관의 50%이상의 경우에서 발견됨에 따라 이 세균이 치수 및 치근단 질환의 병인과정에 관여하는 지에 대한 관심이 높아지고 있다. 이와 관련하여 Shenker 등이 T. denticola의 sonicated extract에서 순수분리된 면역억제 단백질 (immunoinhibitory protein)이 T 임파구의 proliferation을 방해함을 보고한 바 있다. 하지만 이 세균성 단백질이 T 임파구의 기능에 어떤 영향을 미치는 지에 대한 연구는 부족한 실정이다. 따라서 T. denticola의 면역억제 단백질이 처리되기 전과 후의 T 세포에서 분비되는 cytokine Interleukine-2와 Interleukine-4의 발현 정도를 비교하여 그 작용기전을 밝히는 것이 본 연구의 목적이다. Treponema denticola LL2513를 혐기성 상태에서 TYGVS 배지에 배양한 다음 PBS 세척과 lyophilize 과정을 거친 후 sonication을 시행한다. 이 과정을 거쳐 추출된 상층액이 T. denticola의 면역억제 단백질인 sonicated extract이다. 실험을 위해 건강한 혈액 공여자로부터 T 세포를 Buoyant density 방법으로 추출해 낸 다음 24-well plate에 100만개의 세포를 주입한 다음 Group 1에는 2% FBS의 medium만으로 배양하고, Group 2에는 100 $\mu$l의 PHA로만 증식 자극을 하였고, Group 3에는 PHA처리 전 sonicated extract로 T세포를 자극하였다. 72시간 동안 배양한 다음 상층액을 추출하여 ELISA assay를 사용하여 IL-2와 IL-4의 발현정도를 측정하였다. PHA로 자극받은 Group 2에서는 IL-2와 IL-4가 대조군인 Group 1에서보다 높은 수준으로 발현되었다. 하지만 $12.5{\;}\mu\textrm{g}/ml$의 T. denticola sonicated 추출물로 전처리한 Group 3에서는 IL-2와 IL-4의 수준이 유의성있게 억제되어 발현되었다 (p < 0.05). 이러한 결과를 통하여 T. denticola에서 추출된 면역억제 단백질이 Th1과 Th2의 cytokine 분비 기능을 억제하는 것으로 확인 되었으며 이 기전이 감염 근관에서 발견되는 T. denticola의 치수 및 치근단 질환에 대한 병인기전과 관련이 있는 것으로 사료된다.

• 한국진공학회:학술대회논문집
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• 한국진공학회 2009년도 제38회 동계학술대회 초록집
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• pp.44-45
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• 2010

We are currently conducting studies on culturing and biocompatibility assessment of various cells such as neural stem cells and induced pluripotent stem cells(IPS cells) on carbon nanotube (CNT), on nerve regeneration electrodes, and on silicon wafers with a focus on developing nerve integrated CNT based bio devices for interfacing with living organisms, in order to develop brain-machine interfaces (BMI). In addition, we are carried out the chemical modification of carbon nanotube (mainly SWCNTs)-based bio-nanosensors by the plasma ion irradiation (plasma activation) method, and provide a characteristic evaluation of a bio-nanosensor using bovine serum albumin (BSA)/anti-BSA binding and oligonucleotide hybridization. On the other hand, the researches in the case of "novel plasma" have been widely conducted in the fields of chemistry, solid physics, and nanomaterial science. From the above-mentioned background, we are conducting basic experiments on direct irradiation of body tissues and cells using a micro-spot atmospheric pressure plasma source. The device is a coaxial structure having a tungsten wire installed inside a glass capillary, and a grounded ring electrode wrapped on the outside. The conditions of plasma generation are as follows: applied voltage: 5-9 kV, frequency: 1-3 kHz, helium (He) gas flow: 1-1.5 L/min, and plasma irradiation time: 1-300 sec. The experiment was conducted by preparing a culture medium containing mouse fibroblasts (NIH3T3) on a culture dish. A culture dish irradiated with plasma was introduced into a $CO_2$-incubator. The small animals used in the experiment involving plasma irradiation into living tissue were rat, rabbit, and pick and are deeply anesthetized with the gas anesthesia. According to the dependency of cell numbers against the plasma irradiation time, when only He gas was flowed, the growth of cells was inhibited as the floatation of cells caused by gas agitation inside the culture was promoted. On the other hand, there was no floatation of cells and healthy growth was observed when plasma was irradiated. Furthermore, in an experiment testing the effects of plasma irradiation on rats that were artificially given burn wounds, no evidence of electric shock injuries was found in the irradiated areas. In fact, the observed evidence of healing and improvements of the burn wounds suggested the presence of healing effects due to the growth factors in the tissues. Therefore, it appears that the interaction due to ion/radicalcollisions causes a substantial effect on the proliferation of growth factors such as epidermal growth factor (EGF), nerve growth factor (NGF), and transforming growth factor (TGF) that are present in the cells.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제29권12호
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• pp.1147-1153
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• 2006

Mizoribine (MZR) has been shown to possess immunosuppressive activity that selectively inhibits the proliferation of lymphocytes by interfering with inosine monophosphate dehydrogenase. The efficacy of MZR is not only in patients who have had renal transplantation, but also in patients with rheumatoid arthritis (RA), lupus nephritis, and primary nephritic syndrome. Because the exact mechanism of its immunosuppressive action is not clear, the object of this study was to examine the ability of MZR to regulate the antigen presenting cells (APCs), dendritic cells (DCs). In this work, we tested whether MZR ($1{\sim}10\;{\mu}g/mL$) could inhibit the cross-presentation of DCs. DC2.4 cells ($H-2K^{b}$) or bone marrow-derived DCs (BM-DCs) generated from BM cells of C57BL/6 mouse ($H-2K^{b}$) were cultured in the presence of MZR with OVA-microspheres, and the amount of OVA peptide-class I MHC complexes was measured by a T cell hybridoma, B3Z, that recognizes OVA (257-264 : SIINFEKL)-$H-2K^{b}$ complex and expresses-galactosidase. MZR profoundly inhibited the expression of SIINFEKL-$H-2K^{b}$ complexes. This inhibitory activity of MZR appeared to affect the phagocytic activity of DCs. MZR also decreased IL-2 production when we examined the effects of MZR on $CD4^{+}$ T cells. These results provide an understanding of the mechanism of immunosuppressive activity of MZR on the inhibition of MHC-restricted antigen presentation and phagocytic activity in relation to their actions on APCs.

• 대한화장품학회지
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• 제47권2호
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• pp.123-131
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• 2021

해양 홍조류 참도박(Grateloupia elliptica, G. elliptica)을 흑효모(Aureobasidium pullulans, A. pullulans)로 발효시킨 추출물들의 인간 피부각질세포주(HaCaT)에 대한 항염증 효과를 조사하였다. 흑효모로 발효한 참도박 추출물은 참도박 추출물에 비하여 총 폴리페놀(total polyphenol content)은 최대 2.7 배로 증가되었으며 총 플라보노이드(total flavonoid conten)는 최대 2.4 배 증가되었다. 인간 피부각질세포를 lipopolysaccharide (LPS) 또는 H₂O₂로 염증을 유도 한 후 참도박 추출물과 참도박 발효 추출물을 100 ㎍/mL 농도로 처리 한 결과 LPS 또는 H₂O₂ 만 처리한 세포군에 비하여 약 3 ~ 10% 정도 세포생존율이 증가되었다. 또한 염증 유발과 관련된 단백질 발현 변화를 조사한 결과 참도박 발효추출물이cyclooxygenase-2 및 70 kDa heat shock protein 의 발현을 현저히 감소시켰다. 따라서 흑효모로 발효한 참도박은 항염효과를 가진 피부수렴용 화장품 소재로 유용하다.