• 한국식품과학회지
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• 제44권1호
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• pp.82-88
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• 2012

감국 에탄올 추출물이 $H_2O_2$로 유도한 산화적 스트레스 상황에서 MC3T3-E1 조골세포의 증식 및 분화, ROS 생성 및 염증 매개성 cytokine인 TNF-${\alpha}$ 생성 등에 미치는 영향을 분석하였다. $H_2O_2$로 유도한 산화적 스트레스 상황에서 감국 에탄올 추출물은 30-100 ${\mu}g/mL$ 농도 범위에서 조골세포의 증식을 유의적으로 증가시켰다. 또한, 감국 에탄올 추출물 200 ${\mu}g/mL$ 농도에서 ALP 활성이 약 1.5배 유의적인 증가를 나타냈다. 그러나 collagen 합성에는 유의적 차이를 보이지 않았다. Mineralization 측정에서는 200 ${\mu}g/mL$ 농도에서 대조군에 비해 유의적 증가를 보였다. $H_2O_2$로 유도한 산화적 스트레스 상황에서 감국 에탄올 추출물이 intracellular ROS 생성에 미치는 영향을 측정해본 결과, 30 ${\mu}g/mL$ 농도에서 antioxidant인 trolox 20 ${\mu}M$과 유사한 ROS 생성수준을 나타내어 유사한 항산화 효과를 보였으며, 그 이상의 농도에서는 더 높은 항산화 효과를 나타냈다. $H_2O_2$로 유도한 산화적 스트레스 상황에서 조골세포의 collagen 및 ALP의 합성을 억제하고 파골세포로의 분화 증강과 골흡수를 촉진시키는 것으로 알려진 TNF-${\alpha}$ 생성정도를 측정한 결과, 감국 에탄올 추출물 처리에 의해 농도 의존적으로 생성이 감소되었으며, 200 ${\mu}g/mL$ 농도에서 대조군 대비 89% 수준을 나타내어 유의적 차이를 보였다. 이상의 결과를 통해 감국 에탄올 추출물은 $H_2O_2$로 유도된 산화적 스트레스 상황에서 세포 내 ROS 생성과 염증매개 cytokine인 TNF-${\alpha}$ 생성을 감소시킴으로써 조골세포 손상과 활성 감소를 억제하고, 증식과 분화를 촉진시키는 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 감국 에탄올 추출물의 골다공증 예방을 위한 식물성 에스트로젠(phytoestrogen) 및 항산화 소재로의 이용 가능성이 있을 것으로 사료된다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제39권8호
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• pp.748-755
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• 2006

The purpose of this study was to find out effects of treatment of ginsenoside Re, Rc and EGCG on mRNA expressions of leptin, hormone sensitive lipase (HSL) and resistin in 3T3-L1 adipocytes. The concentrations of EGCG were treated with $0.01{\times}10^{-7},\;0.1{\times}10^{-7},\;1{\times}10^{-7}\;and\;1{\times}10^{-6}\;or\;100{\mu}g/ml$ ginsenoside Re, Rc in culture cell for 13 days. mRNA expression of leptin wasn't expressed in preadipocyte but according to differentiation of adipocyte, the that of mRNA expression was decreased at gensenosids or EGCG treated cells compared with non treated adipocyte. Expression of HSL mRNA was increased in G-Re, G-Rc and EGCG treated cells compared with non treated cells. The resistin level was significantly decreased in adipocytes treated with G-Re, G-Rc and EGCG. These pattern was similar to leptin expression. These results support that treatment of gensenosides or EGCG in 3T3-L1 adipocyte resulted to affect of leptin and resistin as well as HSL mRNA levels, accordingly, levels of leptin and HSL will be acted by signalling body fat stores to the hypothalamus which in turn regulates food intake andenergy expenditure to maintain body weight homeostasis. And also regulation of resistin mRNA will prevent to diabetics attacked with obesity. In conclusion, we suggest that consumption of ginseng saponine or EGCG might prevent human diabetics or/and obesity.

• Applied Biological Chemistry
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• 제45권1호
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• pp.42-46
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• 2002

국내의 한약재 시장 등에서 당뇨병의 민간요법 약재로 많이 판매되고 있는 엄나무(Kalopanax pictus NAKAI)수피의 열수 추출물에서 인슐린성 물질과 인슐린 민감성 약제로서의 가능성을 탐색하기 위해 3T3-L1 섬유아세포(fibroblast)가 3T3-L1 지방세포(adipocytes)로 분화할 때 미치는 영향과 지방 세포내로의 포도당 섭취(glucose uptake)에 미치는 영향을 조사하였다. 엄나무의 수피를 열수 추출하고 동결건조하여 만든 분말 엑스시료를 증류수에 녹여 각각 $10{\mu}g/ml$ 및 $l{\mu}g/ml로$ 3T3-L1 섬유아세포를 처리한 후, 분화유도 물질만을 첨가한 대조군의 분화 정도를 100%로 정하였을 때 이에 대한 백분율로 환산하여 결정하였다. 분화유도물질이 첨가되지 않은 경우 $1{\mu}g/ml$와 $10{\mu}g/ml$의 농도에서 각각 $115.4{\pm}5.1%(p<0.05)$와 $122.3{\pm}2.1%(p<0.05)$로 유의성있게 분화를 촉진시켰다. 분화유도물질을 첨가하였을 때, $1{\mu}g/ml$에서는 $127.0{\pm}5.3%(p<0.001)$ 분화를 촉진시켰고, $10{\mu}g/ml$에서는 분화에 거의 변화가 없었다. 3T3-L1 지방 세포내로의 포도당 섭취량은 소량의 인슐린(3ng/ml)과 함께 $0{\sim}10%$ 메탄올 분획층(Fr. 1)과 30% 메탄올 분획층(Fr. 3)을 0.3와 $3{\mu}g/ml$ 첨가하였을 때 분획층을 첨가하지 않은 대조군에 비해 모두 $3.3{\pm}0.5$배 증가시켜 인슐린 50ng/ml에서 반응하였을 때와 유사한 섭취 정도를 나타내었다. 엄나무의 수피는 인슐린성 물질을 함유하고 있으며, 추출물을 분획한 Fr. 1과 Fr. 3은 인슐린 저항성을 감소시키는 물질이 함유되어 있어 인슐린 민감성 제재로 개발할 수 있는 가능성을 암시하고 있다.

• 대한한방내과학회지
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• 제30권3호
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• pp.451-464
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• 2009

Background and Objective : Cyperus rotundus L. (CR) is a commonly used herbal medicine in Asian countries such as Korea, China and Japan. The present study was designated to evaluate the direct effects of CR on helper T cell activities and on Th1/Th2 lineage development in vitro. Materials and Methods : Spleen cells from 8 week BALB/c mice were cultured in CR extracts containing medium without activation for 24 hours and with activation for 48 hours. CD4+ T cells were isolated and analyzed for mRNA expression levels of INF-$\gamma$, IL-4, T-bet and GATA-3 by RT-PCR and secretion cytokines levels of INF-$\gamma$, IL-4, IL-5 and IL-10 by ELISA. Results : The results demonstrated that CR had no mitogenic effects on unstimulated CD4+ T cells, but augmented CD4+ T-cell proliferation upon activation with anti-CD3/anti-CD28 antibodies in a dose-dependent manner. CR treatment significantly increased CD4+ T cell population and the IFN-$\gamma$ expression was significantly enhanced, while IL-4 expression was significantly decreased. In addition, in vitro Th1/Th2 polarization experiments revealed that CR enhanced IFN-$\gamma$ secretion in Th1 cells, but reduced the IL-4 in Th2 cells in a dose-dependent manner. Conclusion : These results suggest that CR treatment could be a desirable alternative therapy for the prevention or correction of Th2 dominant pathological disorders, such as allergy and asthma.

• 생명과학회지
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• 제18권11호
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• pp.1600-1605
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• 2008

본 연구는 에스트로겐 생성효소 유전자인 아로마테이즈 유전자의 siRNA를 이용하여 지방전구세포인 3T3-L1 세포의 지방세포 분화 시 나타나는 유전자의 발현을 검증하기 위하여 수행하였다. 먼저, CYP19A1 (aromatase)의 유전자로부터 siRNA를 3쌍을 디자인하고 이를 지방세포의 전구세포인 3T3-L1세포에 유전자 전이 한 후 분화 유도를 통하여 지방세포 생성의 메커니즘을 분석하였다. 결과적으로 비만의 원인 유전자인 렙틴 유전자의 발현 억제를 유도할 수 있었으며 특이적으로 인슐린과의 연관성이 매우 높음을 밝혀 낼 수 있었다. 그리고 비만 또는 백색지방 생성 시 발현이 억제되는 adiponectin과 adipsin의 과발현을 관찰할 수 있었다. 이 결과를 통하여 지방생성의 모든 신호전달체계 중 특정 한 물질을 저해 하므로써 큰 부작용 없이 비만의 문제가 되는 지방생성을 일정 정도 제어 할 수 있음을 확인 할 수 있었다. 그러므로 이 결과는 앞으로 에스트로겐 결핍 또는 과발현에 의하여 문제가 되는 지방생성 메커니즘을 밝히는 연구에 중요한 단서가 될 것으로 기대된다.

• 대한약침학회지
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• 제11권2호
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• pp.63-73
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• 2008

Objectives The purpose of this study is to investigate the effects of Crataegi Fructus Pharmacopuncture(CFP) on the adipogenesis in 3T3-L1 cells, lipolysis in rat epididymal adipocytes and histological changes in porcine adipose tissue. Methods Inhibiton of preadipocyte differentiation and/or stimulation of lipolysis play important roles in reducing obesity. 3T3-L1 preadipocytes were differentiated with adipogenic reagents by incubating for 3days in the absence or presence of CFP ranging from 0.01 to 1mg/mL. The effect of CFP on adipogenesis was examined by measuring GPDH activity and by Oil Red O staining. Mature adipocytes from rat epididymal fat pad was incubated with CFP ranging from 0.01 to 1mg/mL for 3 hrs. The effect of CFP on lipolysis was examined by measuring free glycerol released. Fat tissue from pig skin was injected with CFP ranging from 0.1 to 10mg/mL to examine the effect of CFP on histological changes under light microscopy. Results The following results were obtained from present study on adipogenesis of preadipocytes, lipolysis of adipocytes and histological changes in fat tissue. 1. Crataegi Fructus Pharmacopuncture inhibited adipogenic differentiation at the concentration of 1.0mg/mL. 2. Crataegi Fructus Pharmacopuncture decreased the activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) at the concentration of 0.1mg/mL. 3. Crataegi Fructus Pharmacopuncture ok. lipolysis at the concentration of 0.1mg/ml. 4. Crataegi Fructus Pharmacopuncture ranging 0.1 to 10mg/mL failed to exert lysis of cell membrane in porcine fat tissue. Conclusions These results suggest that Crataegi Fructus Pharmacopuncture at relatively high concentration inhibited adipogenesis and increased lipolysis of adipocytes. However, Crataegi Fructus Pharmacopuncture didn't exert any effect on lysis of cell membrane in fat tissue.

• 생명과학회지
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• 제19권11호
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• pp.1529-1537
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• 2009

L-arginine 구조유사체인 L-canavanine의 인체 급성백혈병 Jurkat T 세포에 대한 apoptosis 유도활성이 단백질 티로신키나아제 $p56^{lck}$에 어떻게 조절되는지를 규명하기 위해 $p56^{lck}$를 발현하는 Jurkat T 세포주 E6.1과 $p56^{lck}$-결손 Jurkat T 세포주 JCaM1.6에 있어서 L-canavanine의 세포독성, L-canavanine에 의해 유도되는 apoptotic DNA fragmentation 및 apoptotic sub-$G_1$ peak를 비교하여 본 바, $p56^{lck}$-negative JCaM1.6 세포가 $p56^{lck}$-positive E6.1 세포에 비해 L-canavanine의 apoptotis 유도활성에 훨씬 더 민감한 것으로 나타났다. 이러한 $p56^{lck}$-negative JCaM1.6 세포의 민감성은 JCaM1.6 세포에 $p56^{lck}$ 유전자를 transfection시켜 발현시키면 현저히 감소되었다. L-Canavanine에 의해 유도되는 apoptosis관련 현상들을 $p56^{lck}$-stable transfectant인 JCaM1.6/lck 세포와 empty vector-transfectant 인 $p56^{lck}$-negaive JCaM1.6/vector 세포에서 Western blot analysis로 비교한 결과, L-canavanine에 의해 유도되는 mitochondrial membrane potential (${\Delta\Psi}m$)의 감소, caspase-9, -8, -7 및 -3의 활성화, 그리고 PARP 및 $PLC{\gamma}$-1의 분해가 JCaM1.6/vector 세포에 비해 JCaM1.6/lck 세포에서 더 약하게 나타났다. JCaM1.6/lck 세포를 2.5 mM L-canavanine으로 처리한 다음 세포 내 $p56^{lck}$ kinase 활성의 변화를 $\alpha$-casein을 기질로 하여 시간 별로 측정한 결과, L-canavanine의 처리 후 15분만에 $p56^{lck}$ kinase의 활성이 약 1.6배 증가되었으며 이후 6시간 동안은 약 1.3~1.4 배정도 증가된 수준으로 kinase 활성이 유지되는 것으로 확인되었다. L-Canavanine에 의한 apoptosis의 개시에 Fas/FasL 상호작용이 관련되는지를 규명하기 위해 FADD-negative Jurkat T 세포주 I2.1, caspase-8-negative Jurkat T 세포주 I9.2 및 wild-type Jurkat T 세포주 A3에 대한 L-canavanine의 세포독성을 비교한 결과, A3와 I2.1 세포의 경우는 L-canavanine의 세포독성이 동일하게 나타났고, 특히 caspase-8가 결손된 I9.2 세포의 경우는 L-canavanine의 세포독성에 대한 민감성이 A3와 I2.1 세포에 비해 단지 미약하게만 완화되는 것으로 나타나, L-canavanine의한 apoptosis에는 Fas/FasL 상호작용이 관련되어 있지 않으며, 또한 caspase-8의 역할이 필수적이지 않음을 시사하였다. Jurkat T 세포에 있어서 L-canavanie에 의해 유도되는 sub-$G_1$ peak 및 caspases 활성화에 미치는 pan-caspase inhibitor (z-VAD-fmk), caspase-9 inhibitor (z-LEHD-fmk), caspase-3 inhibitor (z-DEVD-fmk), caspase-4 inhibitor (z-LEVD-fmk) 및 caspase-12 inhibitor (z-ATAD-fmk)의 영향을 조사한 결과, L-canavanie에 의한 apoptosis는 ${\Delta\Psi}m$의 감소, caspase-9 및 caspase -3의 활성화에 뒤따른 caspase-8 및 caspase-7의 활성화, 그리고 PARP의 분해의 순서로 유도되는 것으로 나타났으며, 아울러 caspase-9의 활성화와 함께 caspase-12의 활성화가 L-canavanine 처리에 따른 caspase-3의 활성화에 요구되는 것으로 확인되었다. 결론적으로, L-canavanine 처리에 의한 Jurkat T 세포의 apoptosis는 ${\Delta\Psi}m$ 감소, caspase-9, caspase-3 및 caspase-7의 활성화에 의해 유도되며, 이들 apoptosis 현상들은 $p56^{lck}$에 의해 negative regulation되었다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제46권3호
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• pp.192-196
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• 2013

Background: This study focused on the association between preoperative serum carcinoembryonic antigen (CEA) and cytokeratin 19 fragment (Cyfra 21-1) levels and pathologic parameters in patients with resected non-small-cell lung cancer (NSCLC). Materials and Methods: The records of 527 patients who underwent pulmonary resection of NSCLC were reviewed. The association between preoperative serum CEA and Cyfra 21-1 levels and variables that had p-values of less than 0.05 in a t-test or one-way analyses of variance was analyzed by multiple linear regression. Results: The mean serum CEA and Cyfra 21-1 levels prior to surgery were $6.8{\pm}23.1$ mg/dL (range, 0.01 to 390.8 mg/dL) and $5.4{\pm}12.3$ mg/dL (range, 0.65 to 140.2 mg/dL). The serum CEA levels were associated with tumor (T) and lymph node (N) stage and histology. The serum Cyfra 21-1 levels were associated with T stage, tumor size, and histology. Multiple linear regression indicated that serum CEA levels were associated with T (T3/4 vs. T1: ${\beta}$=8.463, p=0.010) and N stage (N2/3 vs. N0: ${\beta}$=9.208, p<0.001) and histology (adenocarcinoma vs. squamous cell: ${\beta}$=6.838, p=0.001), and serum Cyfra 21-1 levels were associated with tumor size (${\beta}$=2.579, p<0.001) and histology (squamous cell vs. adenocarcinoma: ${\beta}$=4.420, p=0.020). Conclusion: Serum CEA level was correlated with T and N stage, and Cyfra 21-1 with tumor size. CEA and Cyfra 21-1 showed histologic correlation. CEA is mainly elevated in adenocarcinoma and Cyfra 21-1 in squamous cell carcinoma. These results might be helpful for predicting pathologic status in preoperative NSCLC.

• 한방재활의학과학회지
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• 제28권3호
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• pp.1-11
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• 2018

Objectives This study was designed to evaluate the efficacy of Seungyangjeseup-tang on obesity by using 3T3-L1 cells and high fat diet mice. Methods In vitro, Seungyangjeseup-tang extract (SYJST) (10, 50, 100, 200, 400, $800{\mu}g/mL$) ware added in 3T3-L1 cells. SYJST cytotoxicity was measured by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assasy. Adipocyte differentiation was measured by Oil Red-O staining. In vivo, the experimental animals were divided into five groups: normal diet-fed normal group (N), high-fat diet (HFD)-fed control group (Con), HFD+SYJST 100 mg/kg group (SY100), HFD+SYJST 200 mg/kg group (SY200), and HFD+olistat 60 mg/kg as a positive drug control group (Orli). Markers of obesity, such as body weight, liver weight, food intake, serum total cholesterol (TC), triglycerides (TG), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), liver tissue TC, TG and fecal TC, TG were measured. Results In vitro, cytotoxicity was not significant compared with the control group. 3T3-L1 cell's differentiation was significantly decreased in Oil Red-O staining. In vivo, compared with controls, mice treated with SYJST demonstrate lower body and liver weight, and reduced food intake. In addition, SYJST increased TC, TG in the serum but not significance. And SYJST showed decreasing tendency TC, TG in the liver tissue. Furthermore, SYJST increased TC, TG in the facal but not significance. Conclusions Based on the results above, Seungyangjeseup-tang may reduce adipocyte differentiation, body fat, food intake, liver weight in obesity. This suggests that Seungyangjeseup-tang may be clinically useful in obesity treatment.

• Natural Product Sciences
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• 제16권4호
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• pp.291-294
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• 2010

In obesity, adipocytes undergo abnormal growth characterized by increased cell numbers and differentiation. Thus, inhibition of mitogenesis of preadipocytes and their differentiation to adipocytes would be beneficial for the prevention and progression of obesity. In the present study, we attempted to evaluate antiadipogenic activity of adlay (Coix seed, the seed of Coix lacryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf) employing preadipocytes cell line, 3T3-L1 as an in vitro assay system. Because several varieties of adlay are in use in Korea, anti-adipogenic activity of three varieties of adlay such as Sang-Gang, Jo-Hyun and Yulmu-Ilho was evaluated. All the three varieties of adlay showed significant inhibitory activity on adipocyte differentiation as assessed by measuring fat accumulation using Oil Red O staining. Adlay, however, showed little effects on adipocyte proliferation. Further studies with interval treatment demonstrated that adlay exerted inhibitory activity on adipocyte differentiation via acting on early stage of adipogenesis. Taken together, adlay might be useful in the prevention of obesity.