• 제목/요약/키워드: 3T3 NRU PT

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Comparison of Sensitivity Between Balb/c 3T3 Cell and HaCaT Cell by NRU Assay to Predict Skin Phototoxicity Potential

  • Lee, Jong-Kwon;Lee, Eun-Hee;Lee, Sun-Hee
    • Toxicological Research
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    • 제18권3호
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    • pp.227-232
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    • 2002
  • In order to find out the appropriate in vitro method for high correlation with in vivo, we com-pared the sensitivities of phototoxicity (PT) in vitro method between in human keratinocytes, HaCaT cells and in 3T3 fibroblast cells derived from Balb/c mice. Both cells were exposed to six known phototoxic chemicals : promethazine, neutral red, chlortetracycline, amiodarone, bithionol, 8-methoxypsoralen, or non-phototoxic chemical, ALS (ammonium laureth sulfate) and then irradiated with 5 J/$cm^2$ of UVA. Cell viability ($IC_{50}$ ) was measured by neutral red uptake (NRU) assay. The ratio of $IC_{50}$ value of chemicals in the presence and absence of UVA was determined by the cut-off value. The phototoxic potential of test chemicals in NRU assay was determined by measuring the photoirriation factor (PIF) with a cut-off value of 5. In both 3T3 and HaCaT cells, all known phototoxic chemicals were positive (over 5 of PIF value), except that bithionol was found to be non-phototoxic to HaCaT cells, and ALS, non-phototoxic chemical was negative. These results suggest that Balb/c 3T3 cell was more sensitive than HaCaT cell to predict phototoxicity potential.

COMBINED IN VITRO ASSAY FOR 3T3 NRU PT ASSAY AND PHOTOHEMOLYSIS AS PART OF PHOTOTOXICITY TEST

  • Chunja Nam;Kim, Baehwan;Lee, Byoungseok;Seongjoon Moon;Ihseop Chang
    • 한국독성학회:학술대회논문집
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    • 한국독성학회 2001년도 International Symposium on Signal transduction in Toxicology
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    • pp.117-117
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    • 2001
  • The aim of this study was to assess a possible alternative method as replacement for in vivo phototoxicity test. The 3T3 mouse fibroblast neutral red uptake phototoxicity assay (3T3 NRU PT assay) is a screening method for studying DNA or cellular damage. Photohemolysis assay is a mechanistic study for investigating oxygen-dependent membrane damage.(omitted)

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화장품 광독성 평가와 동물대체시험법 (Evaluation of Phototoxicity for Cosmetics and Alternative Method)

  • 이종권;신지순;김진호;엄준호;김형수;박귀례
    • 대한화장품학회지
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    • 제31권3호
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    • pp.245-251
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    • 2005
  • 화장품은 의약품과 달리 남녀노소를 불문하고 거의 평생에 걸쳐 사용하는 제품이므로 피부 및 인체의 안전성 확보는 중요한 문제라고 할 수 있다. 화장품의 안전성 평가는 화장품법에 식품의약품안전청장이 고시하도록 되어있어 현재 식약청고시 '기능성화장품등의 심사에 관한 규정'에서 정하고 있다. 자외선에 의한 피부독성은 피부노화, 피부홍반, 피부손상, 피부암 유발 면역계장애 등이 있으며, IARC (International agency for research on cancer)에서는 자외선을 사람에게 암을 유발하는 물질로 분류하고 있다. 자외선 노출에 의하여 설치류에 대한 피부암 유발보고는 많이 있고, 현재 전 세계적으로 자외선에 의한 피부 암화 과정에 대하여 활발한 연구가 진행되고 있다. 화장품이 광에 의한 영향을 평가하는 시험은 광독성시험으로, 국내에서 광독성에 대한 규정은 자외선에서 흡수가 없음을 증명하는 흡광도 시험자료를 제출하는 경우는 면제이고 그 외의 경우는 상기 고시에 의한 광독성 시험과 광감작성 시험을 실시하도록 되어 있다. 이 시험은 일반적으로 기니픽 또는 토끼를 포함한 적절한 동물로 실시하도록 규정되어 있다. 화장품 안전성 평가에 있어서 동물대체시험법의 요구는 3R (replacement, refinement, reduction) 운동으로 유럽을 중심으로 시작하여 이제는 전세계로 확대되어 있으며, 화장품 안전성심사에 있어 중요한 이슈로 대두되고 있다 화장품의 광독성 평가에 대한 대체시험법으로 3T3 NRU(neutral red uptake) 광독성시험이 2004년 4월 OECD 독성시험 기준으로 채택되었다. In vitro 광독성 시험법은 마우스 유래의 섬유아세포인 3T3 cell을 이용하여 광조사한 것과 광조사하지 않은 세포와의 세포독성을 NRU 시험을 이용하여 그 정도를 비교하여 그 차이(PIF, photoirritation factor)가 5배 이상이 되면 광독성 물질로 분류하는 평가방법이다.