Du, Enqi;Yao, Lunguang;Xu, Hua;Lu, Songya;Qi, Yipeng
BMB Reports
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제40권2호
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pp.232-238
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2007
The p13 gene is uniquely present in Group II nucleopolyhedroviruses (NPVs) and some granuloviruses, but not in Group I NPVs. p13 gene was first described by our laboratory in Leucania separatamultiple nuclear polyhedrosis virus (Ls-p13) in 1995. However, the functions of Ls-P13 and of its homologues are unknown. When Ls-p13 was inserted into Autographa californica nucleopolyhedrovirus, a Group I NPV, polyhedra yield was inhibited. However, this inhibition was prevented when the leucine zipper-like domain of Ls-p13 was mutated. To determine the cause of this marked difference between Ls-P13 and leucine zipper mutated Ls-P13 (Ls-P13mL), oligomerization and secondary structure analyses were performed. High performance liquid chromatography and yeast two-hybrid assays indicated that neither Ls-P13 nor Ls-P13mL could form oligomers. Informatics and circular dichroism spectropolarimetry results further indicated marked secondary structural differences between Ls-P13 and Ls-P13mL. The LZLD of Ls-P13 has two extended heptad repeat units which form a hydrophobic surface, but it is short of a third hydrophobic heptad repeat unit for oligomerization. However, the mutated LZLD of Ls-P13mL lacks the above hydrophobic surface, and its secondary structure is markedly different. This difference in its secondary structure may explain why Ls-P13mL is unable to inhibit polyhedra yield.
This study is to investigate the content of crude protein intruded in the sericin of cocoon shell and pupa by treatment of buffer solution (pH 1 to pH 13) 20 ml per 1 gram for 30 and 60 minutes at 30$^{\circ}C$, 60$^{\circ}C$ and 100${\pm}$2$^{\circ}C$, respectively. The results obtained are summarized as follows. 1. The quantity of total crude protein obtained from cocoon shell and pupa by treatment during 30 minutes at 30$^{\circ}C$ was dissolved as the largest quantity of 11.874 mg/g at pH 1 and l5.93mg/g at pH 13, but dissolved the smallest quantity 1.75g/g at pH 5 as known. and tile quantity of crude protein treated for 60 minutes is 13.437mg/g at pH 1 and 22.50mg/g at pH 13. Also, the smallest quantity is 2. 813mg/g at pH 5 as known. 2. By the treatment during 30 minutes at 60$^{\circ}C$, the dissolved largest quantity was 13.12mg/g at pH 1 and 21.875 mg/g at pH 13, but the smallest quantity is 2.375mg/g at pH 5 as known After treatment for 60 minutes at 60$^{\circ}C$, the dissolved largest quantity was 17.500 mg/g at pH 1 and 31.56mg/g at pH 13, bu the smallest quantity is 3.849 mg/g at pH 5. 3. The dissolved crude protein from the cocoon shell and pupa by treatment for 30 minutes at 100${\pm}$2$^{\circ}C$ was the largest quantity of 147.000mg/g at pH 1 and 398. 125mg/g at pH 13, but the smallest quantity is 75.00mg/g at pH 5 as known. After treatment for 60 minutes at 100${\pm}$2$^{\circ}C$, the largest quantity was 253.76 mg/g at pH 1 and 460.625mg/g at pH 13, but the smallest quantity is 139.375mg/g at pH 5 as known. 4. The dissolved crude protein from the cocoon shell and pupa was not different in quantity by treatment at 30$^{\circ}C$ or 60$^{\circ}C$. But dissolved crude protein was large quantity from cocoon shell more than pupa, as known. 5. The treatment of cocoon shell and pupa during 60 minutes at 100${\pm}$20$^{\circ}C$ was increased to the dissolved largest quantity of crude protein of 19.20% at pH 1 and 22. 18% at pH 13 from the cocoon shell and 6. 12% at pH, an d 23.87% at pH 13 from the pupa. But dissolved crude protein was increased to the larger quantity from pupa more than cocoon shell.
It is known that ${\delta}^{13}C_{DIC}$ (carbon-13 isotope of dissolved inorganic carbonate (DIC) ions) of water increases when dissolved $CO_2$ degases. However, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ could decrease when the pH of water is lower than 5.5 at the early stage of degassing. Laboratory experiments were performed to observe the changes of ${\delta}^{13}C_{DIC}$ as $CO_2$ degassed from three different artificial $CO_2$-rich waters (ACWs) in which the initial pH was 4.9, 5.4, and 6.4, respectively. The pH, alkalinity and ${\delta}^{13}C_{DIC}$ were measured until 240 hours after degassing began and those data were compared with kinetic isotope fractionation calculations. Furthermore, same experiment was conducted with the natural $CO_2$-rich water (pH 4.9) from Daepyeong, Sejong City. As a result of experiments, we could observe the decrease of DIC and increase of pH as the degassing progressed. ACW with an initial pH of 6.4, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ kept increasing but, in cases where the initial pH was lower than 5.5, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ decreased until 6 hours. After 6 hours ${\delta}^{13}C_{DIC}$ increased within all cases because the $CO_2$ degassing caused pH increase and subsequently the ratio of $HCO_3{^-}$ in solution. In the early stage of $CO_2$ degassing, the laboratory measurements were well matched with the calculations, but after about 48 hours, the experiment results were deviated from the calculations, probably due to the equilibrium interaction with the atmosphere and precipitation of carbonates. The result of this study may be not applicable to all natural environments because the pressure and $CO_2$ concentration in headspace of reaction vessels was not maintained constant as well as the temperature. Nevertheless, this study provides fundamental knowledge on the ${\delta}^{13}C_{DIC}$ evolution during $CO_2$ degassing, and therefore it can be utilized in the studies about carbonated water with low pH and the monitoring of geologic carbon sequestration.
최근 진단 분야에서 PET/CT는 종양학 분야는 물론 심장, 신경 등 여러 가지 분야에서 널리 활용되고 있다. 그 중 심장 분야에서 $^{13}N-NH_3$ 심근 관류 PET/CT는 MBF를 이용한 절대 심근 관류의 측정이 가능하며 심근 관류 SPECT에 비하여 공간 분해능과 대조도가 우수하고 CT를 이용한 보다 정확한 감쇄 보정이 가능하다는 장점을 가지고 있다. 본 연구에서는 $^{13}N-NH_3$ PET/CT 검사 시 각 재구성 방법에 따른 정량적 심근 관류, 반정량 심근 관류 지표의 변화와 image quality의 변화를 비교하였다. 2013년 1월부터 11월까지 서울대학교병원에서 $^{13}N-NH_3$ PET/CT 검사를 시행받은 14명(평균연령 $60.24{\pm}7.21$세, 평균 몸무게 $71.54{\pm}7.43kg$, 남자 8명, 여자 6명)의 데이터를 분석하였다. 안정기, 부하기 각 10분 listmode scan의 data를 이용 동적, 정적 영상을 FBP, iterative2D, Iterative3D, TrueX의 재구성 방법을 이용하여 재구성하였다. 안정기, 부하기의 각 동적 영상을 이용하여 MBF에서 재구성 방법에 따른 RCA, LAD, LCX의 각 territory 별 심근관류와 global, reserve (stress/rest)값을 비교하였다. 또한 정적 영상을 이용 QPS에서 각 재구성 방법에 따른 extent와 TPD 를 비교하였으며 재구성 방법 별 정적 영상의 snapshoot을 제작하여 영상의 해상력과 노이즈, 판독의 용이성을 기반으로 핵의학과 판독의 5명의 blind test를 시행하였다. 각 재구성 방법에 따라 vendor에서 권고 되는 iterative2D 대비 정량적 심근 관류의 CFR은 최소 -18.68% (P=0.0002)에서 최대 7.91% (P<0.0001)의 변화를 보였으며, 반 정량적 지표들은 안정기에서 extent는 최소 -0.86%p (P=0.1953)에서 최대 5.36%p (P<0.0001), TPD는 최소 -0.57%p (P=0.2053)에서 최대 4.36%p (P<0.0001), 부하기에서 extent는 최소 1.93%p (P=0.4275)에서 최대 5.43%p (P=0.0003), TPD는 최소 1.57%p (P=0.4595)에서 3.93%p (P<0.0001) 증가된 값을 보였다. 영상의 해상력과 노이즈, 판독의 용이성을 기반으로 핵의학과 판독의 5명의 blind test에서는 FBP로 재구성된 영상이 최하위로 평가 되었으며 TrueX, iterative2D, iterative3D 순으로 평가되어 iterative3D로 재구성된 영상이 판독 시 가장 우수한 영상을 평가되었다. 각 병원은 장비에 따른 각 재구성 방법에 의한 정량적 심근 관류의 변화, 반 정략적 지표들의 과대 또는 과소평가되는 정도를 확인하고 병원 장비의 실정에 적합한 동적, 정적 재구성 방법을 확립하여 진단에 보다 유용하고 정확한 심근 관류 값을 제공하여야 할 것이다.
한국미생물생명공학회 2000년도 Proceedings of 2000 KSAM International Symposium and Spring Meeting
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pp.208-213
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2000
Penicillium fellutanum produces a phosphorylated, choline-containing extracellular peptido-polysaccharide, peptidophosphogalactomannan (pPxGM) (8). The $\^$13/C-methyl labeled pPxGM ([methyl-$\^$13/C]pPxGM) was prepared from the cultures supplemented with L-[methyl-$\^$13/C]methionine or [2-$\^$13/C]glycine and was used as a probe to monitor the fate of phosphocholine in this polymer. Addition of purified [methyl-$\^$l3/C]pPxGM to growing cultures in low phosphate medium resulted in the disappearance of [methyl-$\^$13/C]phosphocholine and -N,N'-dimethyl-phosphoethanolamine from the added [methyl-$\^$13/C]pPxGM. Two $\^$l3/C-methyl-enriched cytoplasmic solutes, choline-O-sulfate and glycine betaine, were found in mycelial extracts, suggesting that phosphocholine-containing extracellular pPxGM of P.fellutanum is a precursor of intracellular choline-O-sulfate and glycine betaine and thus of phosphatydilcholine (l0). $\^$13/C-Methyl-labeled cells grown in 3 M NaCl-containing medium showed 2.6- and 22-fold more accumulation of $\^$13/C-methyl labeled choline-O-sulfate and glycine betaine, respectively, originated from the extracellular [$\^$13/C-methyl]pPxGM than those grown without added NaCl. The results suggest that, in addition to glycerol and erythritol, glycine betaine and choline-O-sulfate and thus choline are also osmoprotectants and hence that pPxGM is involved in osmotolerance of this fungus (11). Taken collectively, the $\^$l3/C- and $\^$31/P-NMR analyses of cytosolic solute pools and structural modulation of extracellular pPxGM corresponding to environmental stimuli in P. fellutanum, provided evidence that pPxGM is involved in cellular choline metabolism, osmotolerance, and recycling of metabolites.
고형 양식사료에 포함된 질소와 인의 미생물학적 제거 공정을 알아보기 위하여 벤치규모의 실험을 수행하였다. CK-10과 CK-13 균주가 새우양식장의 물시료로부터 분리되었다. CK-10과 CK-13의 혼합배양에서 N/P의 동시제거 실험을 실시하였다. 그 결과, $400\;{\mu}M\;NH^{+}_4$ 와 $NO^{-}_2$는 12시간 이내에 제거되었고, $NO^{-}_3$는 36시간 이내에 각각 제거되었으며, $500\;{\mu}M\;PO^{3-}_4$ 36시간 이내에 제거되었다. CK-10과 CK-13 배양을 새우양식사료에서 용출된 N와 P의 제거에 적용하였다. HPAEC-PAD 시스템을 이용하여 양식사료의 당을 분석하였으며, glucose, galactose, galatosamine, mammonse, fucose 등의 여러 가지 당이 분석되었다. 세균에 의한 질소와 인 제거를 수행하기 위하여 인공 해수에서 $0.2\%$(w/v)의 양식사료를 용출시켰으며, 72 시간동안 용출된 질소의 양은 대략 $33.3\;{\mu}M\;NH^{+}_4,\;12.9\;{\mu}M\;NO^{-}_2.\;81.5\;{\mu}M\;NO^{-}_3,\;248\;{\mu}M\;PO^{-3}_4$였다. 혼합배양은 $0.2\%$ 사료에 포함된 질소와 인을 84시간 이내에 완전히 제거하였으나, 단일배양은 주어진 배양기간동안 질소와 인을 완전제거 하지 못하였다. 이 연구에서 CK-10과 CK-13 배양은 새우양식사료에서 유래하는 질소와 인을 효과적으로 제거하는 것이 입증되었다.
본 시험은 기초사료의 에너지수준을 2,400Kcal/kg에서 3,000Kcal/kg까지 달리하고 옥수수와 대두박의 apparent metabolism energy (AME), true metabolism energy (TME)가에 미치는 영창을 검토하고자 실시한바 다음의 결과를 얻었다. 1. 옥수수의 AME 측정치는 2,400Kcal/13%를 계외하곤 각 처리간 유의차가 인정되지 않았으며(P>0.05) 대두박은 2,800Kcal/13%와 2,800Kcal/15%, 3,000Kcal/16% 간에 유의차가 있었으나, (P<0.05) 2,600 Kcal/14% 처리와는 유의성이 발견되지 않았다. (P>0.05) 2. 기초사료의 에너지수준은 2,400kcal/13%를 제외하곤 옥수수 대두박의 AME가에 영향하지 않아 시험사료에 따라 기초사료의 에너지수준을 달리할 필요가 없다. 3. 옥수수 보다 대두박의 표준오차 값이 큰 것은 대치율이 옥수수보다 낮은데서 기인하였다. 4. 옥수수의 TME치는 AME치와 그 경향이 같았으나 대두박의 TME치는 전처리간 없었다. (P>0.05) 5. 옥수수와 대두박의 AME치와 옥수수의 TME치가 2,400Kcal/13% 처리에서 현저히 감소한 것은 사료내 단미사료간 상호작용에 기인한다고 할 수가 있다.
Nano-silver 용액의 식물병원성 세균에 대한 항균 활성 검정을 하기 위해 Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis를 포함한 10가지 균주를 대상으로 실험을 수행 하였다. Nano-silver용액은 바이오 (주)플러스에서 제공된 WA-CV-WA13B, WA-AT-WB13R과 WA-PR-WB13R용액을 사용하였으며, 10 ppm, 25 ppm, 50 ppm, 100 ppm 농도로 nano-silver 용액을 배지에 첨가하여 nano-silver 배지를 제조한 후 실험대상 세균 균주를 72 h 배양 후 생장억제 정도를 관찰하기 위하여 세균의 colony 수를 세었다. 실험 결과, WA-CV-WA13B 용액의 경우 C-1에 대하여 10 ppm에서도 높은 생장 억제 효과를 나타냈고, P-6, X-1, 그리고 X-2에 대해서도 생장억제 효과를 나타냈고, WA-AT-WB13R용액의 경우 10 ppm의 농도에서 P-6에 대하여 살균효과가 나타났다. 10 ppm의 농도에서는 C-1, X-1, 그리고 X-2에 대해서 약간의 생장억제 효과가 관찰 되었다. WA-PR-WB13R용액의 경우 10 ppm 혹은 그이상의 농도가 P-5, P-6, 그리고 X-2 균주에 대하여 살균효과를 나타내었다. 실험에 사용된 3가지 nano-silver 용액 모두 25 ppm 이상에서 모든 실험대상 식물병원성 세균에 대하여 살균효과를 나타내었으며, 이러한 결과는 nano-silver 용액을 식물병원성 세균의 방제제로 활용할 수 있는 가능성을 보여주는 결과라고 판된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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