This study was designed to determine the effects of daidzein (DE) on hepatic lipid metabolism in chicks fed with low protein (LP) diet based on casein. In experiment 1, the male chicks were fed with one of the three levels of dietary protein containing 10.95%, 21.9% and 43.8% protein content for 2 days. In experiment 2, the chicks were fed one of the three levels of protein with or without DE at 1,000 mg/kg diet for 2 days. Experiment 3 was conducted to compare DE (LP+DE) with estradiol (LP+E2) in chicks fed with LP diet for 7 days. Plasma lipid profiles, hepatic lipid profiles, activities of hepatic malic enzyme and isocitrate dehydrogenase (ICDH) were measured. Transcriptions of hepatic fatty acid synthase, apolipoprotein-B (APO-B), and fructose bisphosphatase mRNA were measured by RT-PCR. Increasing dietary protein levels markedly decreased the concentrations of plasma triglycerides, hepatic total lipids, hepatic TG, and the mRNA transcriptions while the increased dietary protein levels increased hepatic ICDH activities in experiment 1. In experiment 2, the effects of dietary protein levels on blood and hepatic lipid content were more prominent than those of the additional DE. Interestingly, plasma TG levels were affected by DE supplementation (p<0.05). In experiment 3, DE inhibited APO-B mRNA expressions and stimulated the accumulation of lipid in the liver through mechanisms different from E2. In this study, we demonstrate that DE has beneficial effects on blood lipid profiles, but that it inhibits APO-B mRNA transcription and aggravates the fatty liver induced by LP diet in chicks.
The dietary vitamin $B_6$ intake of 218 Korean young women (aged 20-26y), who had no health problems, and their sources were estimated using a modified Korean vitamin $B_6$ database. The average daily vitamin $B_6$ intake was 0.987 mg for the subjects. About 87.2% of the subjects consumed less than the Korean Recommended Dietary Allowance (RDA) of vitamin $B_6$. The average ratio of vitamin $B_6$ intake to daily protein intake was 0.014 mg/g protein, and approximately 91% of subjects consumed 〈 0.02 mg/g protein. Vitamin $B_6$ intake was significantly (p〈.01 -p〈.001) positively correlated to the intakes of all other nutrients. Between animal and vegetable protein, animal protein had a stronger positive correlation with vitamin $B_6$. Major dietary sources of vitamin $B_6$, the top 10 foods provided nearly 64% of total vitamin $B_6$, and dietary contributors of vitamin $B_6$ for Koreans are less varied than those for Americans.
Overexpressions of the estrogen receptors(ER), progesterone receptors(PR) and C-erbB-2 protein are important determiners of the response to chemotherapy in the breast cancer. For detecting ER, PR and C-erbB-2, immunohistochemistry are currently regarded as standard method. The purposes of this study compared to histologic grade and expression of the ER, PR and C-erbB-2 in breast cancer. We examined overexpression of ER, PR and C-erbB-2 protein in 84 breast carcinomas by using immunohistochemical stains. The following results were obtained. For histologic grade, 10 cases(11.9%) showed carcinoma in situ, 16 cases(19%) showed grade I, 36 cases (42.9%) showed grade II, and 22 cases(26.2%) showed grade III among the 84 test samples. The average positive rate ER and PR was 63%, 46% showed carcinoma in situ, 80%, 60% showed grade I, 64%, 41% showed grade II, 34%, 23% showed grade III, respectively. The induction of PR increased when induction of ER increased, thus showing significant relationship(p<0.05). The expression of C-erbB-2 protein was 9 cases(10.7%) in one positive(1+), 9 cases(10.7%) in two positive(2+), and 9 cases(10.7%) in three positive(3+). C-erbB-2 protein expression showed no statistical significance. In conclusion, ER and PR positive rates were inversely associated with histologic grades significantly(p<0.05). C-erbB-2 showed no significant difference with histologic grade. However ER, PR and C-erbB-2 showed significant relationship with each other(p<0.05). Therefore, these findings might be an important prognostic factor and might be arranged as a regular pathological examination in cases of breast cancer.
Many studies have provided evidences that hepatitis B surface antigen (HBsAg) including preS region could be an ideal candidate for a new hepatitis B virus (HBV) vaccine with higher efficacy. We established CHO cell lines, IY-CHO-2 and IY-CHO-11 expressing high levels of HBsAg containing preS2 and S protein by stable transfection method. These cell lines expressed the correct size (about 1 kb in length) of HBsAg mRNA as expected. The purified protein from the culture supernatants of the clones showed the same sizes as those expressed in native hepatitis B virus (24 kDa, 27 kDa, 34 kDa and 36 kDa). Antibody productivity of CHO-derived HBsAg protein at lower dose challenge was higher than the protein containing S region alone expressed in yeast system. These results indicate that CHO-derived HBsAg protein containing preS2 and S region can be effectively used for a better immune response as a HBV vaccine.
Protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) is predicted to be therapeutic target in treatment of type 2 diabetes and obesity. Thus, in order to search for PTP1B inhibitors, we screened the inhibitory activity of PTP1B in the water extracts of 84 medicinal herbs. Among them, the extracts of Pini Folium, Magnoliae Cortex, Artemisiae asiaticae Herba, Schizonepetae Herba, Menthae Herba, Mume Fructus, Cimicifugae Rhizoma, and Amomi Cardamomi Fructus showed relatively significant (58-68%) inhibitory activity against PTP1B. Especially, the methylene chloride fraction of the methanol extract of Menthae Herba (81% inhibition at 30 ${\mu}g$/ml) showed more potent inhibitory activity against PTP1B than others.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.6
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pp.1572-1578
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2008
In previous report, Seungmagalgeun-tang (SGT) could exert its anti-inflammatory actions in the BV-2 microglial cells. However, study on the anti-inflammatory effect of SGT in mast cells has not been identified. Therefore, we examined on the anti-inflammatory effect of SGT on the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and calcium ionophore A23187-induced rat basophilic leukemia (RBL-2H3) cells. SGT inhibited the release of ${\beta}$-hexosaminidase and secretion and expression of pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-4 on RBL-2H3 cells, without affecting cell viability. The protein expression level of nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ (p65) was decreased in the nucleus by SGT. In addition, SGT suppressed the degradation of inhibitory protein $I{\kappa}B-{\alpha}$ protein, the activation of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK), and the expressions of cyclooxygenase (COX)-2 mRNA and protein level in RBL-2H3 cells. These results suggest that SGT could be involved anti-allergic effect by control of NF-${\kappa}B$ (p65) translocation into the nucleus through inhibition of $I{\kappa}B-{\alpha}$ degradation and suppression of COX-2 expression.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.36
no.1
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pp.1-20
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2023
Objectives : The purpose of this study was to evaluate the anti-inflammatory effect of Tanghwajitongsan(THJTS) through inhibition of NF-κB and MAPK. Methods : We evaluated cell survival rate by MTT assay, NO production by nitrite content in the culture medium. We quantified TNF-α, IL-1β, IL-6 and PGE2 of the cultured supernatant by ELISA. And we evaluated the effect of THJTS on protein expression of NF-κB, MAPK, iNOS and COX-2 by Western blot analysis. THJTS ameliorates LPS-activated alterations in protein expression of NF-κB, p-38, iNOS and COX-2 and production of NO, pro-inflammatory cytokines and PGE2. Also, THJTS ameliorates LOX, PGN and FLA-activated alterations in protein expression of NO, iNOS. THJTS ameliorates only PGN-activated alterations in protein expression of COX-2. Results : THJTS ameliorates LPS-activated alterations in protein expression of NF-κB, p-38, iNOS and COX-2 and production of NO, pro-inflammatory cytokines and PGE2. Also, THJTS ameliorates LOX, PGN and FLA-activated alterations in protein expression of NO, iNOS. THJTS ameliorates only PGN-activated alterations in protein expression of COX-2. Conclusions : This study can provide scientific evidence for the anti-inflammatory effects and underlying mechanisms of THJTS.
Park, Jung Sun;Choi, Hoon In;Bae, Eun Hui;Ma, Seong Kwon;Kim, Soo Wan
The Korean journal of internal medicine
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v.34
no.1
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pp.146-155
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2019
Background/Aims: Indoxyl sulfate (IS) is a uremic toxin and an important causative factor in the progression of chronic kidney disease. Recently, paricalcitol (19-nor-1,25-dihydroxyvitamin D2) was shown to exhibit protective effects in kidney injury. Here, we investigated the effects of paricalcitol treatment on IS-induced renal tubular injury. Methods: The fluorescent dye 2',7'-dichlorofluorescein diacetate was used to measure intracellular reactive oxygen species (ROS) following IS administration in human renal proximal tubular epithelial (HK-2) cells. The effects of IS on cell viability were determined using MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assays and levels of apoptosis-related proteins (Bcl-2-associated protein X [Bax] and B-cell lymphoma 2 [Bcl-2]), nuclear $factor-{\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$) p65, and phosphorylation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) and protein kinase B (Akt) were determined by semiquantitative immunoblotting. The promoter activity of $NF-{\kappa}B$ was measured by luciferase assays and apoptosis was determined by f low cytometry of cells stained with f luorescein isothiocyanate-conjugated Annexin V protein. Results: IS treatment increased ROS production, decreased cell viability and induced apoptosis in HK-2 cells. IS treatment increased the expression of apoptosis-related protein Bax, decreased Bcl-2 expression, and activated phosphorylation of MAPK, $NF-{\kappa}B$ p65, and Akt. In contrast, paricalcitol treatment decreased Bax expression, increased Bcl-2 expression, and inhibited phosphorylation of MAPK, $NF-{\kappa}B$ p65, and Akt in HK-2 cells. $NF-{\kappa}B$ promoter activity was increased following IS, administration and was counteracted by pretreatment with paricalcitol. Additionally, flow cytometry analysis revealed that IS-induced apoptosis was attenuated by paricalcitol treatment, which resulted in decreased numbers of fluorescein isothiocyanate-conjugated Annexin V positive cells. Conclusions: Treatment with paricalcitol inhibited IS-induced apoptosis by regulating MAPK, $NF-{\kappa}B$, and Akt signaling pathway in HK-2 cells.
Recently, considerable attention has been focused on the role of cyclooxygenase-2 (COX-2) in the carcinogenesis as well as in inflammation. Improperly overexpressed COX-2 has been observed in many types of human cancers and transformed cells in culture. Thus, it is conceivable that targeted inhibition of abnormally or improperly up-regulated COX-2 provides one of the most effective and promising strategies for cancer prevention. A ubiquitous eukaryotic transcription factor, NF-kB is considered to be involved in regulation of COX-2 expression. Furthermore, extracellular-regulated protein kinase and p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase appear to be key elements of the intracellular signaling cascades involved in NF-kB activation in response to a wide array of external stimuli. Certain chemopreventive phytochemicals suppress activation of NF-kB by blocking one or more of the MAP kinases, which may contribute to their inhibitory effects on COX-2 induction. One of the plausible mechanisms by which chemopreventive phytochemicals inhibit NF-kB activation involves suppression of degradation of the inhibitory unit I kB, which hampers subsequent translocation of p65, the functionally active subunit of NF-kB.
Protein B23 is one of the major nucleolar phosphoproteins associated with pre-ribosomal particles, and is localized in the granular region of the nucleolus. Recent studies suggest that protein B23 shuttles between nucleus and cytoplasm and also interacts with HIV Rev. These findings indicate that protein B23 is important in nucleocytoplasmic relationship and viral replication. However, the exact function of protein B23 is not clear yet. In acute nucleolar hypertrophy of rat liver, treated with thioacetamide, there was observed an increase of not only protein B23 but also B23-like protein p45 when anti-B23 monoclonal antibody (MAb) was used for identification. On the basis of the large B23 specific epitope structure composed of 68 amino acids, a hypothesis was formulated to examine that p45 is the pre-B23 resulting from excessive production of B23. In an attempt to investigate the precursor of B23, we analyzed the subcellular fractions and microsomal subfractions. Subsequently, we analyzed the finger printings of B23-like proteins using the tryptic peptide mapping. The results are summarized: 1) Using B23 MAb, we observed the presence of B23-like proteins in nucleolar fraction, nucleoplasmic fraction and microsomal fraction. 2) In the further microsomal subfractionation, we could partially purify B23-like protein in 2M layer of sucrose gradient. 3) When ion exchange chromatography was employed, there were protein species 80kDa(p80), 65kDa(p65) and 60kDa(p60). 4) Based on the tryptic map analysis of $^{125}I$ labeled proteins, the similarity between B23 and p80 was found only in 9 out of 14(B23) and 21(p80) peptides, and difference was found in the remaining peptides. p80 and p60 had 18 common peptides, and all the peptides of p60 were similar to those of p80. From these results, it is proposed that p45 is an abnormal metabolite resulting from carcinogenesis by thioacetamide, and it is not the precursor of B23. In addition, we suggest that p80 may be a precursor of p45.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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