Many enzymes catalyze a primary reaction and/or secondary reaction. Dextransucrase usually synthesizes dextran from sucrose as a primary reaction. The secondary reaction of dextransucrase is the transfer of glucose from sucrose to carbohydrate accepters. We have reacted dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides B-742CB with sucrose and pullulan as an acceptor under different reaction conditions; various concentrations of pullulan, enzyme, sucrose and different pHs and temperatures of reaction digests. The yield of modified pullulan was 57%(<${\pm}$5%) of theoretical under the reaction condition of pH 5.2, temperature 28$^{\circ}C$, 0.37% of pullulan, and 0.l U/$m\ell$ of dextransucrase. Modified products were more resistant against the hydrolysis of pullulanase and endo-dextranase than those of native pullulan. The positions of glucose substitution in the modified products were determined by methylation followed by acid hydrolysis and analyzed by TLC. The products were modified by the addition of glucose to the position of C3, C4, C6 free hydroxyl group of glucose residues in the pullulan.
Background: Some studies confirm the reduction of the number of Streptococcus mutans in saliva and dental plaque by Lactobacillus, however, these effects are not always confirmed in in vitro and clinical studies, and only the risk of dental caries has been reported. Our in vitro study aimed to reveal microbial and biochemical changes in the single cultures of S. mutans, Lactobacillus casei and Aggregatibactor actinomycetemcomitans and co-cultures of S. mutans and L. casei or A. actinomycetemcomitans according to sucrose concentration. We also aimed to confirm the anti-oral bacterial and anti-biofilm activities of L. casei and A. actinomycetemcomitans against S. mutans according to sucrose concentration. Methods: S. mutans (KCCM 40105), L. casei (KCCM 12452), and A. actinomycetemcomitans (KCTC 2581) diluted to 5×106 CFU/ml were single cultured, and L. casei or A. actinomycetemcomitans applied at concentrations of 10%, 20%, 30% and 40% to S. mutans were co-cultured with selective medium containing 0%, 1% and 5% sucrose at 36.5℃ for 24 hours. Measurements of bacterial growth value and acid production, disk diffusion and biofilm formation assays were performed. Results: In the medium containing sucrose, the bacterial growth and biofilm formation by S. mutans, L. casei, and A. actinomycetemcomitans were increased. In contrast, 30% and 40% of L. casei in the medium containing 0% sucrose showed both anti-oral bacterial and anti-biofilm activities. This implies that L. casei can be used as probiotic therapy to reduce S. mutans in a 0% sucrose environment. Conclusion: The concentration of sucrose in the oral environment is important for the control of pathogenic bacteria that cause dental caries and periodontitis. To apply probiotic therapy using L. casei for S. mutans reduction, the concentration of sucrose must be considered.
Optimal pH temperature and sucrose content for the production of vitamin B$_{12}$ and riboflavin by Bacillus megaterium and Enterobacter aerogenes was studied by microbiological analysis. Optimal pH for the production of B$_{12}$ was 6.0 by B. megaterium while the pH for E. aerogenes was 5.0. However, upon the addition of sucrose the optimal pH for B. megaterium shifted to 7.5 but E. aerogenes remained at pH 5.0. In the absence of sucrose, pH did not influence the yields of riboflavin produced by either bacterium. Addition of sucrose stimulated synthesis of riboflavin by both bacteria. Temperature had little effect on the production of vitamins by either bacterium.
Khezri, A.;Rezayazdi, K.;Mesgaran, M. Danesh;Moradi-Sharbabk, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.22
no.5
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pp.651-658
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2009
Four multiparous lactating Holstein cows fitted with rumen cannulae were fed diets varying in the amount and source of rumen-degradable carbohydrates (starch vs. sucrose) to examine their effects on rumen fermentation, nitrogen metabolism and lactation performance. A $4{\times}4$ Latin square with four diets and four periods of 28 days each was employed. Corn starch and sucrose were added to diets and corn starch was replaced with sucrose at 0 (0 S), 2.5 (2.5 S), 5.0 (5.0 S) 7.5% (7.5 S) of diet dry matter in a total mixed ration (TMR) containing 60% concentrate and 40% forage (DM basis). Replacing corn starch with sucrose did not affect (p>0.05) ruminal pH which averaged 6.41, but the ruminal pH for 7.5 S decreased more rapidly at 2 h after morning feeding compared with other treatments. Sucrose reduced ($p{\leq}0.05$) ruminal $NH_3-N$ concentration (13.90 vs. 17.09 mg/dl) but did not affect peptide-N concentration. There was no dietary effect on total volatile fatty acids (110.53 mmol/L) or the acetate to propionate ratio (2.72). No differences (p>0.05) in molar proportion of most of the individual VFA were found among diets, except for the molar proportion of butyrate that was increased ($p{\leq}0.05$) with the inclusion of sucrose. Total branched chain volatile fatty acids tended to increase ($p{\geq}0.051$) for the control treatment (0 S) compared with the 7.5 S treatment. Dry matter intake, body weight changes and digestibility of DM, OM, CP, NDF and ADF were not affected by treatments. Sucrose inclusion in the total mixed ration did not affect milk yield, but increased milk fat and total solid percentage ($p{\leq}0.05$). Sucrose tended ($p{\geq}0.063$) to increase milk protein percentage (3.28 vs. 3.05) and reduced ($p{\leq}0.05$) milk urea nitrogen concentration (12.75 vs. 15.48 mg/dl), suggesting a more efficient utilization of the rapidly available nitrogen components in the diet and hence improving nitrogen metabolism in the rumen.
An optimum seeding date for carrots growing in Jeju was determined. In early growth stage, the number of leaves was more in Hyang-yang #2 cultivar (HY2) than that in the others, meanwhile that of Hukjun 5 chon (H5) and Shinhukjun 5 chon (S5) was higher in the latter half of the growing season. The weight of leaves was greater in HY2 until 2 months after seeding, but thereafter drastically increased and resulted significant difference at harvest in S5. The length of roots was greater in H5 and S5 than in HY2 when seeded on July 17 and measured after September 13, but it was similar in all cultivars when seeded on August 1 and later. The diameter of the roots was greatest in HY2, regardless of seeding dates, meanwhile no difference was found among other cultivars. The weight of roots was greatest in HY2 when seeded on July 17, August 1 or later, meanwhile it was greater in H5 after November, when seeded on August 15. The percentage of roots cracked was 20, 15, and 10% respectively for HY2, S5 and H5. The percentage of roots branched was 0.3% in HY2. The percentage of roots cracked or branched was much higher when seeded on August 1 than on July 17, and was high (40%) in HY2 and S5, compared to H5 when seeded on August 15. The content of sucrose, glucose and fructose increased until 110 days after seeding in all cultivars, but fructose and glucose contents decreased in about 135 days after seeding, but sucrose contents increased continuously even after 135 days. Sucrose content increased and fructose and glucose contents decreased in S5, but this trend was reversed after late November. Sugar contents was different among the cultivars seeded on August 15, while sucrose content decreased and glucose and fructose contents increased with time. The content of ${\beta}$-carotene was more than 12,000 IU in all cultivars, but decreased in 170 days after seeded on July 17. The content was highest in HY2 and followed by S5 and H5 in order. It was not different among the cultivars in 170 days after seeding on August 1, but was higher in S5 than the other cultivars in 170 days after seeded on late and decreased with seeding date.
The twin-scale segments of nerine (Nerine bowdenii) were cultured to investigate the influence of NAA, BA and sucrose concentrations on in vitro bulblet formation. The formation of bulblets from twin-scale segments showed a good response both the percentage of bulblet formation and the number of bulblets per explant on MS medium supplemented with 1mg/L NAA and 2 mg/L BA. Formation of bulblet showed the highest efficiency on medium containing 30g/L, and the formation of bulblets was strongly inhibited on medium containing over 90g/L. When the twin-scale segments formed bulblets were subcultured three times to the same medium by 60 day subculture interval, the number of bulblets per explant was 6.5, 7.3 and 8.2 in order of first, second and third. The bulblets over 3mm in diameter were hypertrophied and rooted after transferring to the hormone-free MS medium. The plantlets over 50mm in height were successfully acclimatized in the soil mixed with the same volume of vermiculite and perlite, and the survival rate was over 95%.
This study was conducted to investigate the effects of equilibration and dilution methods on the survival rate of vitrified IVM-IVF bovine blastocysts. Vitrification solution was composed with 20% glycerol, 20% ethylene glycol, 3/8 M sucrose and 3/8 M dextrose in D-PBS supplemented with 20% FBS (GESD). Embryos were equilibrated in 1 of 3 methods: 3-step (El), 2-step (E2), or 1-step (E3), and after loading into 0.25-ml straws, were plunged into liquid nitrogen. After warming in water bath at 2$0^{\circ}C$, cryoprotectants were diluted in 1 of 3 methods: 1) D1(VS+1/2 M sucrose, 1/2 M sucrose and l/4 M sucrose), 2) D2 (1/2 M sucrose and 1/4 M sucrose), or 3) D3(1/2 M sucrose only). All procedures except warming were conducted at room temperature. Survival and hatching rates of blastocysts and expanded blastocysts following equilibration methods were 50 and 83.6%, and 27.8 and 67.3%, respectively in El, which were significantly higher (P〈0.01) than those of E2 (16.7 and 23.2%, and 7.4 and 12.5%, respectively) and 23 (0 and 3.7%, and 0 and 0%, respectively). Survival and hatching rates of expanded blastocysts were significantly (P〈0.01) higher than those of blastocysts in El. Survival rates of blastocysts and expanded blastocysts following dilution methods were 52% and 80.6% in D2, which were significantly higher (P〈0.05) than those of D1 (29.6 and 48.3%) and D3 (47.2 and 63.8%). Hatching rates of blastocysts were similar in D1, D2 and D3, however in expanded blastocysts, that of D2(61.3%) was significantly higher (P〈0.01) than that of D1(34.5%). Survival rates of expanded blastocysts in D1 and D2, and hatching rates in D2 and D3 were significantly higher(P〈0.01) than those of blastocysts. These results indicate that the viability of vitrified blastocysts was improved by the several steps of equilibration, and by 2-steps dilution after warming, independently of their stage of development. The results also indicated that the expanded blastocysts are more profitable to vitrification than blastocysts.
In this study we tried to optimize the enzyme reaction conditions for the synthesis of highly branched isomaltodextrin (Mw > 2.5 kDa) using two dextransucrases from L. mesenteroides B-742CB and B-512FMCM that are dextransucrase constitutive mutants. As the concentration of sucrose or the ratio of maltose to sucrose increased, the amount of dextran decreased and the number and the amount of acceptor-products (of sucrose or maltose) increased. With high sucrose concentration (over 34%), there was more branched isomaltodextrin (as acceptor products) than dextran. When the ratio of sucrose to maltose was 2.5, there produced 86.7% of isomaltodextrin were produced. The Mw of dextrans, however, was over 2${\times}$10(sup)6 and there was no significant amounts of branched clinical dextran or high molecular weight oligosaccharides. With the combined activities of B-742CB dextransucrase and B-512FMCM dextransucrase we could synthesize high molecular weight branched isomaltodextrin (Mw>2.5 kDa). The high molecular weight dextran was composed of high branches as B-742CB dextran.
Han Bong-Hee;Lee Soo-Young;Shu Eun-Jung;Woo Jong-Gyu
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.2
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pp.123-128
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2005
A series of experiments were performed to establish regeneration system through friable embryogenic callus (FFC) of Lilium longiflorum 'Nellie White'. Only hard and regular callus was induced from bulb scales on medium containing 2.0 mg/L dicamba and $30{\sim}90$ g/L sucrose. The induced hard callus was subcultured on medium with 2.0 mg/L dicamba and 30 g/L sucrose, and used as a material for induction of FEC. In order to induce FEC, induced hard and regular callus was chopped into $1{\sim}2\;mm$ segments, and re-cultured on medium with 2.0 mg/L dicamba and 90 g/L sucrose. FEC was induced from chopped hard calli by the subcultures of two months interval. The induction rate of FEC was enhanced when hard callus was subcultured on same medium. FEC was proliferated more than 5 times on medium with $1.0{\sim}2.0\;mg/L$ dicamba and 90 g/L sucrose. Bulblet differentiation from FEC was very favorable on MS medium supplemented with 0.1 mg/L BA, 1.0 mg/L NAA and 30 g/L maltose, but many differentiated bulblets were changed to vitrificated ones. The differentiation of normal bulblets was most effective on medium containing $0.5{\sim}1.0\%$ activated charcoal and 30 g/L sucrose.
The influence of various levels of major medium components such as sucrose, nitrate, phosphate, plant growth regulators, and light intensity for cell growth and the production of anthocyanin content in cell cultures of Populus alba ${\times}$ P. glandulosa were investigated. Best results for anthocyanin yield were obtained using Murashige and Skoog(MS) medium containing 5% sucrose, 12.5% nitrate, 200% phosphate, 1.0mg/l indole-3-acetic acid(IAA), 1.0mg/l benaylaminopurine(BAP), and continuous illumination of 7,000 lux. On the other hand, maximum cell growth was achieved with 5% sucrose, 50% nitrate above 400% phosphate compare with that of MS basal mediumi, and 0.5mg/l 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid(2, 4-D). Anthocyanin accumulation in a suspension cultured cells of given genotype was stimulated by subculturing onto the medium lacking 2, 4-D. Pigmented cell clusters were extracted with methanol containing 1% hydrochloric acid (HCl) and then anthocyanin was identified by thin layer chromatography (TLC) and U. V. spectrophotometer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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