The change of microbial communities during cyanobacterial bloom was comparatively analyzed by 16S rDNA PCR-DGGE in Daechung Reservoir during 2003~2005. Morphological analysis showed that Cyanophyceae dominated algal community in the bloom. Dominant cyanobacteria were Microcystis, Planktothrix (Oscillatoria), Phormidium and Anabaena. We used 16S rDNA-denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) profiles and phylogenetic affiliations of the DGGE bands to analyze the community structure and diversity of the predominant microbial community. The DGGE band patterns demonstrated that the most frequent bands were identified as Microcystis during the monitoring periods, Planktothrix also dominated on September 2003 and 2004, whereas Anabaena was showed a peak on September 2005 and Aphanizomenon on August 2003. DGGE and phylogenetic analysis provided us new information that could not be obtained by traditional, morphological analysis. The relationship between cyanobacteria and other aquatic bacteria can be traced and their genetic diversity also identified in detail.
The composition of the bacterial populations in Gorosoe(Acer mono Max.) sap was characterized during storage with different heat treatments($63^{\circ}C$ for 30 min and $73^{\circ}C$ for 15 sec). The saps were aseptically collected at 0, 15 and 30 days of storage and analyzed by dilution plating and 16S rDNA PCR-DGGE analysis. There were significant differences in the total number of colony forming units(CFUs) of bacteria between heated and nonheated saps. Bacteria of nonheated sap were present at a level of $3.4{\times}10^7CFU/m{\ell}^{-1}$, whereas living bacteria were not detected in the heated sap. According to the 16S rDNA sequence and DGGE analysis, Pseudomonas sp. was the most abundant bacterial strain in the samlpes, and the bacterial community structures become more simplified with time and were composed of the Chryseobacterium sp. with time. These results allowed us to characterize the dominant bacteria involved in Gorosoe sap and to better understand their dynamics throughout storage.
Ko So-Ra;Park Seong-Joo;Ahn Chi-Yong;Choi Aeran;Lee Jung-Sook;Kim Hee-Sik;Yoon Byung-Dae;Oh Hee-Mock
Korean Journal of Microbiology
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v.40
no.3
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pp.205-210
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2004
The change of bacterial communities during cyanobacterial bloom was analyzed by DGGE in Daechung Reservoir from July to October in 2003. The traditional morphological analysis showed that the genera of Microcystis, Chroococcus, Oscillatoria, and Phormidium were dominated. The most frequent band in the DGGE profile by 16S rDNA sequence analysis was identified as Microcystis flos-aquae and the cyanobacterial bloom was peaked on September 2. Oscillatoria spp. were also identified and Aphanizomenon flos-aquae dominated in the middle of August. Judging from the analysis of the digitalized DGGE profiles using the cluster analysis technique, the microbial community on September 2 was considerably different from others. Consequently, it seems that the gene fingerprinting method can give not only the similar results to the traditional morphological method but also additional information on the bacterial species and similarity among the examined microbial communities.
CHANG, CHUNG EUN;SYLVIA I. PAVLOVA;LIN TAO;EUN-KI KIM;SEUNG CHUL KIM;HYUN SHIK YUN;JAE-SEONG SO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.2
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pp.312-317
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2002
Indigenous lactobacilli were isolated from vaginas of Korean women for possible use in ecological treatment of bacterial vaginosis. Vaginal swab samples were obtained from a gynecological clinic and streaked on Rogosa SL agar plates to select the most predominant lactobacilli in each sample. The preliminary identification of the isolates as lactobacilli was based on microscopic observation of Gram-positive rod-shaped cell morphology. The initial characterization was performed on 108 isolates in terms of their cell surface hydrophobicity (CSH), antimicrobial activity, and hydrogen peroxide (H₂O₂) production capability, and 10 isolates were then selected for further molecular identification. For a rapid procedure to identify lactobacilli, polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses of the l6S rRNA genes were applied. The 10 selected lactobacilli and 9 different reference strains of Lactobacillus spp. were characterized by PCR-RFLP where the amplified l6S rDNA was digested with 7 different restriction endonucleases prior to analysis. DNA sequencing of the 16S rRNA gene of one particular isolate, KLB 46, that had been identified as L. crispatus by the PCR-RFLP analysis, further confirmed its identity as L. crispatus.
Plantlets derived from leaf blade-segment culture of a variegated tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4) that was induced by a heavy-ion ($^{14}N$) beam irradiation to proembryos, were characterized. When explants from both white and green sections of leaves of the variegated plant were cultured on MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 1.0 mg/L BAP, the white sections yielded only white shoots, whereas the green sections generated approximately 47.2% green, 37.4% white and 15.4% variegated shoots. In the F1 generation of a green tobacco derived from the leaf blade-segment culture, the segregation ratio of green to white was 1,651:54. Furthermore, reciprocal crosses showed that all of the progenies was green, indicating that the variegation is not maternally inherited. When the signal intensity of photosynthesis genes was determined by DNA gel blot analysis using the variegated leaves derived from green sections of variegated leaves, there were more of the rbcL, psbA, 16S rDNA and 23S rDNA chloroplast genes in the white sections than the chloroplast genes in wild type and green sections of the variegated plants.
This research was carried out to evaluate whether gamma ray is a useful tool for breeding new strains of mushrooms. For this research, 5 mutant groups, 20 strains of Hypsizigus marmoreus, 2 strains of Lyophyllum decastes, and 1 strain of Lyophyllum shimeji were used. Monokaryon spores from one variety of H. marmoreus were irradiated with 50~2,000 Gy of gamma ray. The propriety dose was 50~200 Gy for mutagenesis. Mutant monokaryon mycelia crossed each order to become dikaryon mycelia. The internal transcribed spacer (ITS) regions of rDNA were amplified using PCR, and the products were sequenced. The sequences of the ITS regions (16 partial rDNA, complete ITS1, 5.8 rDNA and partial rDNA) were analyzed by PCR, and strains of H. marmoreus, L. decastes, and L. shimeji were auto-sequenced. The lengths of the sequenced ITSs were 1,052~1,143 nucleotides. Genetic matrices were calculated using Nei-Li's genetic distance coefficient based on ITS sequence. The dissimilarities were 0~3.35% in strains of H. Hypsizigus. In addition, a phylogenetic tree was constructed based on ITS sequences using the neighbor-joining (NJ) method. The phylogenetic tree revealed that 23 strains and 5 mutant groups were divided into 12 clusters; the mutant groups fell into different clusters. These results show that mushroom spores were mutated effectively by gamma ray; therefore, gamma ray could be a useful tool for breeding new strains of mushrooms.
Lee Keun Hee;Yu Hak Sun;Park Sang Kyun;Lee Sun Joo;Lee Kyeong Ah;Kim Sun Mee;Ock Mee Sun;Jeong Hae Jin
Journal of Life Science
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v.16
no.1
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pp.71-75
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2006
We analyzed the phylogenic relationships of 23 partial 18S rDNA sequences of 22 species (1 species has 2 strains) belonging to Sarcorptiforms include 4 new sequences, using several tools. Although geographic distributions are quite far from, sequence similarity of two strains of Dermatophygoides pteronyssinus isolated from Japan and New Zealand were very high. This result suggests that mite migration by animals including human occurred in the two continents. We investigated the Endeostigmata taxonomic relationship between the Prostigmata and Oribatida subgroups using small fragments (340-400 bp) of their 185 rDNA sequences. But Endeostigmata was not grouped with Oribatida or Prostigmata. In conclusion, it is first reported phylogenic relationship for classified mites included in Sarcoptiformes using 185 rDNA sequence analysis and its system is a very powerful tool for classification of mites.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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