This study was conducted to establish the tissue culture system for Korean domestic Miscanthus sinensis, which is used in various purposes such as forage, and bio-energy resources. With the mature seed of Miscanthus, optimum concentrations of plant growth regulators were identified for an efficient callus induction and regeneration. Among the treatments of 1~10 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, IBA, or NAA, callus induction rate was highest (85.3%) on MS medium containing 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D. Under the condition, the callus were efficiently induced and proliferated with comparably lower frequencies of callus browning. In shoot regeneration, the treatment of NAA combined with BAP seemed to contribute more efficient conditions to shoot regeneration than those of NAA with Kinetin or 2-iP. Especially, regeneration efficiency and number of regenerated plants were 83.7% and 5.5 in 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA with 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP, respectively, which were higher frequencies than those in NAA with Kinetin or 2-iP. In results, 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA combined with 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP were efficient for embryogenic callus induction and regeneration of Miscanthus. This system would be useful for mass-propagation and developing new cultivars via tissue culture of Miscanthus sinensis.
Recently, hydroxymethylfurfrual (HMF) has been highlighted as a key intermediate for the production of liquid biofuels and other valuable compounds. We used sesame roots as a biocatalyst to synthesize HMF using flask cultures. The synthesis of HMF was identified by GC-mass analysis. The highest root growth was observed in cultures with 1.0 mg/l NAA at $30^{\circ}C$, while root growth was not found in those without NAA treatment. When silver nitrate ($AgNO_3$) was added, the root growth was greatest in those treated with 0.5 mg/l $AgNO_3$ and cultured at $30^{\circ}C$. In the case of HMF synthesis, its highest yield was obtained in those treated with 0.5 mg/l NAA at $25^{\circ}C$, but low HMF was detected in those treated without naphthaleneacetic acid (NAA). The addition of $AgNO_$ to the culture medium showed a 8-10% reduction in HMF yield compared to that of the control, indicating its inhibitory effect on the synthesis of HMF. On the whole, an optimal culture temperature for HMF synthesis seemed to be between $25-30^{\circ}C$.
Martin, Kottackal Poulose;Zhang, Chun-Lai;Hembrom, Manoj Emanuel;Slater, Adrian;Madassery, Joseph
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.2
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pp.163-169
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2008
Roots of Ophiorrhiza prostrata D. Don serve as a rich source of camptothecin (CPT), an anticancer drug. Because of the large-scale collection of its roots, the plant has become a threatened species. The present study accomplishes the induction of adventitious roots as a means for the production of CPT as well as for the large-scale propagation of this anticancer drug plant using leaf and internode explants. The biomass yield and CPT content of adventitious roots induced from different explants were compared to roots developed on ex vitro rooted stem cuttings. Adventitious roots were produced on half-strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with $10.74{\mu}M$${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid and $2.32{\mu}M$ kinetin at mean fresh weights of 0.753, 0.739 and 0.748 g roots from leaf, internode and shoot, respectively. CPT yield from in vitro derived roots after 50, 80 and 120 days of incubation (0.028, 0.06 and 0.1% dry weight, respectively) was not significantly different from those harvested at the same age from ex vitro rooted (0.03, 0.06 and 0.13%, respectively) stem cuttings. CPT from subcultured roots derived from solid (0.08%) medium was lower than from suspension culture medium (0.12%). Subsequent cultures of the adventitious roots showed a stable production of CPT (0.16%). The yield of CPT from 360-day-old plant-derived roots was 0.19%. Elicitation using methyl jasmonate and acetyl salicylic acid exhibited no enhancement in CPT yield. In vitro propagation through direct shoot regeneration was achieved from the adventitious roots upon transfer to MS medium with $8.87{\mu}M$$N^6-benzyladenine$ (BA) and $2.46{\mu}M$ indole-3-butyric acid (IBA) with a mean of 21.2 shoots per culture in 50 days. The shoots upon subculture on medium having the same level of BA and IBA underwent rapid proliferation. The shoots transferred to field conditions after in vitro rooting exhibited 95% survival. Adventitious root induction, from leaf and internode explants, enables the feasible production of CPT as well as the large-scale rapid propagation of this species which can safeguard it from extinction.
Hypocotyl explants of Chinese cabbage (cvs. "Jeong Sang") produced transgenic calli on callus induction medium (MS salt, B5 vitamin, 5 mg/L acetosyringone, 1 mg/L 2,4-D, 3% sucrose, 400 mg/L cefotaxime, 100 mg/L paromomycin, pH 5.8) after cocultivation with strains of Agrobacterium tumefaciens (EHA101, LBA4404, GV3101) harboring the pPTN290 containing paromomycin-resistance gene as a selectable marker, and then they transferred to root induction medium (1/2MS salt, MS vitamins, 2% sucrose, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, pH 5.8) and shoot induction medium (MS salt, B5 vitamin, 4 mg/L $AgNO_3$, 4 mg/L 6-benzyladenine, 3 mg/L alpha-naphthaleneacetic acid, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, 3% sucrose, pH 5.8) in order. There was a significant difference in the frequency of transgenic calli depending on Agrobacterium strains. In particular, the highest frequency (6.1%) of transgenic calli was obtained from the hypocotyls cocultivated with EHA101 strains. Also, the frequency (%) of transgenic root and plants from each transgenic callus clone were obtained with 60.7% and 38.2% in EHA101, with 8.3% and 0% in LBA4404, with 20.5% and 85.7% in GV3101 strains, respectively. They were grown to maturity in a greenhouse and normally produced $T_2$ seeds. GUS histochemical assay for progeny ($T_2$) revealed that the transgenes was expressed in the plant genome, and progeny analysis from 7 independent transgenic events demonstrated that the transformants transmitted the transgene as a single or multiple functional locus.
Hypocotyl explants of Chinese cabbage (us. 'Jeong Sang' and 'Seoul') produced adventitious shoots on Murashige and Skoog (MS) basal medium supplemented with 4mg/L $AgNO_3$, 5 mg/L acetosyringone, 4 mg/L 6-benzyladenine and 3mg/L alpha-naphthaleneacetic acid (SI) after cocoultivation with strains of Agrobacterium tumefaciens (LBA4404) harboring the pCAMBIA1301 and the $_PPTN290$ containing hygromycin-resistance gene and paromomycin-resistance gene as a selectable marker genes, respectively. There was a significant difference in the frequency of transgenic plants depending on antibiotics and cultivars used. Paromomycin was better than hygromycin, and cultivar 'Jeong-sang' was higher than 'c.v. Seoul' in the frequency of transgenic plants. In particular, the highest frequency (0.70%) of transgenic plants was obtained from selection medium (SI) containing 100mg/L paromomycin in c.v., 'Jeong-sang' GUS positive response were obtained 9 plants and 3 plants from the cultivars, 'Jeong-sang' and 'Seoul', respectively. They were grown to maturity in a greenhouse and normally produced $T_1$ seeds. GUS histochemical assay for progeny $(T_1)$ revealed that the transgenes were expressed in the plant genome.
Cacalia firma recently has been used increasingly as leaf vegetables but endangered in natural forest. In this work, we established the plant regeneration via adventitious shoot formation from petiole segments of seedling and in vitro plantlets. Wounding of seed coats and $GA_3$ treatments were effective to induce in vitro germination of seeds, whereas, seed did not germinate at all without these treatment. When cotyledon, leaf, petiole, and root segments of seedling were cultured on medium with 2 $mg{\cdot}L^{-1}$ benzyl adenine (BA) and 0.5 $mg{\cdot}L^{-1}$ naphthaleneacetic acid (NAA), petiole segments showed highest number of shoots per explant among the other segments. Among the various kinds of cytokinins, BA, isopentyl adenine (2-ip), kinetin, zeatin, thidiazuron (TDZ), TDZ and BA treatments were effective to induce high frequency of adventitious shoot formation from petiole segments of in vitro propagated plants. NAA stimulated the frequency of adventitious shoot formation but not for number of adventitious shoots per explants compared to TDZ or BA treatment alone. Most of adventitious shoots were developed directly from surfaces of explants. Adventitious shoots were transferred on medium with IBA for root formation, thereafter the plantlets were successfully transferred to soil.
Kwon, Young Hee;Jeong, Jae Hyun;Lee, Jae Sun;Jeon, Jong Ok;Park, Young Uk;Min, Ji Hyun;Chang, Who Bong;Lee, Sang Young;Youn, Cheol Ku;Kim, Ki Hyun
Korean Journal of Plant Resources
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v.31
no.4
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pp.355-362
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2018
This study was performed to develop the mass propagation system using tissue culture technique to supply the seeds of Elephant garlic (Allium ampeloprasum L.) which has difficulty in propagation. Immature spathe of Elephant garlic was cultured on Murashige & Skoog (MS) medium supplemented with two plant growth regulators, naphthaleneacetic acid (NAA) and kinetin. After 6 weeks of culture, the highest number of shoot (14.9/explant) was obtained when the immature spathe with 10 cm length was cultured right after harvesting. In MS medium supplemented with 2 mg/L kinetin and 0.5 mg/L NAA, the most vigorous growth characteristics was observed, the shoot number was 14.9/explant, its length was 11.3 cm, and its fresh weight was 2.5 g. When the bulblets were cultured in MS medium with 2 mg/L kinetin and 0.5 mg/L NAA, the addition of 30 mg/L adenine improved their proliferation and growth significantly, the highest bulblet formation rate (48%) was obtained. The addition of 7% sucrose also increased the bulblet formation rate at the highest frequency of 98.2%. The shoots were shown be more vigorously proliferated at the secondary subculture stage rather than primary culture stage, their propagation rate was 80% after subculture.
This study investigated the effects of flower and fruit thinning agents on fruit set and harvested fruit quality attributes in 'Gamhong' apples. Lime sulfur, MaxCel (1.9% BA), and Fruitone (3.5% NAA) were applied either at post-bloom or fruitlet stages to mature 'Gamhong/M.9' trees. In 2011, the numbers of fruits per cluster in terminal flowers were 1.74, 0.82, and 1.15 for the control, lime sulfur, and Maxcel (applied at 10-mm fruit stage) treatments, respectively. The percentages of single fruit per cluster were 36.0, 47.9, and 48.7% for the control, lime sulfur, and Maxcel (10 mm) treatments, respectively, while the percentages of clusters with three fruits per cluster were 22.9, 1.4, and 5.8%. In lateral flowers, fruit numbers per cluster were 1.20, 0.36, and 0.50 for the control, lime sulfur, and Maxcel (10 mm) treatments, respectively. In 2012, all the thinning treatments showed a positive effect on flower and fruit thinning, compared with the control. Moreover, the treatment with thinning agents did not affect fruit quality. Overall, the results suggest that a single application of flower or fruit thinning agents would be sufficient, rather than the mixed application of thinning agents, based on the observed decrease in fruit setting.
Benzyladenine (BA, 99% purity), MaxCel$^{(R)}$ (1.9% BA), Fruitone (3.5% NAA), MaxCel$^{(R)}$ + Fruitone, a nd s imazine were applied postbloom as fruitlet thinning agents to mature 'Hongro' and 'Fuji' apple (Malus domestica Borkh.) trees. BA and MaxCel$^{(R)}$ were applied at $100mg{\cdot}L^{-1}$ a.i. while Fruitone at $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ a.i. and simazine at $400mg{\cdot}L^{-1}$ a.i. All PGRs were applied at 8 days after full bloom (DAFB, 6 mm fruit diameter) in both cultivars, while simazine was treated twice at 7 and 14 DAFB. In 'Hongro', the number of total fruit set per flower cluster in terminal buds was 1.67, 1.84, and 1.81 in MaxCel$^{(R)}$ + F ruitone, MaxCel$^{(R)}$, and simazine applications, respectively, when compared with 2.35 of water control. These reductions in fruit set were mainly attributed to the increased ratio of defruited clusters by the thinning agents. In 'Fuji' apple, the number of total fruit set per flower cluster in terminal buds was 1.29, 1.60, and 1.76 in MaxCel$^{(R)}$ + Fruitone, Fruitone, and MaxCel$^{(R)}$, respectively, when compared with 2.56 of water control in 'Fuji' apple. The addition of Fruitone to the MaxCel$^{(R)}$ promoted the thinning efficacy in both cultivars, compared to MaxCel$^{(R)}$ only. The thinning efficacies were similarly observed with lateral flowers in both cultivars. A significant increase of fruit weight by the postbloom thinning treatments was observed only in the BA application in 'Hongro', while the effect was observed in BA and MaxCel$^{(R)}$ in 'Fuji'. While the soluble solids content increased in the BA, MaxCel$^{(R)}$ and MaxCel$^{(R)}$+Fruitone treatments in both cultivars, other fruit quality attributes were not affected by the application of post-bloom thinning agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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