• 제목/요약/키워드: 1,3-glucanase

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Arthrobacter luteus가 생산(生産)하는 효모(酵母) 세포벽(細胞壁) 용해(溶解) 촉진인자(促進因子)의 정제(精製) 및 그 이화학적(理化學的) 성질(性質) (Purification and Properties of the Factor from Arthrobacter luteus, Capable of Accelerating the Lysis of Yeast Cell Walls)

  • 오홍록;아이조노 야스오;시모다 타다히사;마사루 푸나트수
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제12권4호
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    • pp.387-394
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    • 1983
  • zymolyase(${\beta}-1$, 3-glucanase)의 효모(酵母) 세포벽(細胞壁)에 대한 용해작용(溶解作用)을 촉진(促進)시키는 인자(因子)를 zymolyase의 조효소(粗酵素)로부터 분리(分離)하여 Sephadex G-75 gel 여과(濾過) 및 조제용(調製用) PAG-전기영동법(電氣泳動法)에 의하여 전기영동적(電氣泳動的)으로 균일(均一)하게 정제(精製)하였다. SDS-PAG 전기영동법(電氣泳動法)에 의하여 측정한 정제(精製) 인자(因子)의 분자량(分子量)은 40,500이었고, 등전점(等電點)은 pH 9.6이었다. 정제(精製)된 촉진인자(促進因子)는 395개(個)의 아미노산 잔기(殘基)로 구성(構成)되는 단일(單一) polypeptide의 염기성(鹽基性) protease임이 밝혀졌으며, 이 protease의 흡광계수(吸光係數)($E_{208,cm}^{1%}$)는 11.9, 분자흡광계수(分子吸光係數)(${\varepsilon}_{280,}mole/l$)는 $4.83{\times}10^4$이었다.

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Enzyme Activities of the Fruit Body of Ramaria botrytis DGUM 29001

  • Lee, Tae-Hee;Han, Yeong-Hwan
    • Mycobiology
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    • 제29권3호
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    • pp.173-175
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    • 2001
  • The fruit body of Ramaria botrytis DGUM 29001 was used to determine enzyme activities of fruit body. The specific activity of laccase was the highest(6.5 unit/mg$\cdot$protein) and that of $\alpha$-amylase and xylanase was relatively high. However, little or no enzyme activity of $\beta$-glucosidase, CMCase, exo-$\beta$-1,4-glucanase, chitinase, lipase and protease was found.

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효모 자가분해물의 새로운 제조방법 개발 및 품질검사 (Development of a New Processing Method and Quality Evaluation of Yeast Autolyzate)

  • 이영춘;김용수
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.78-82
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    • 1993
  • 이 연구는 재래방법과 비교하여 수율이 높고 품질이 향상된 효모 자가분해들의 제조방법을 연구하는데 그 목적을 두었다. 제빵용 생 효모에 glucanase와 protease의 복합효소를 작용시킨 다음, 10,000 psi의 고압으로 균질하면 약 85.3%의 효모 세포벽이 파손되었다. 세포벽이 파손된 효모를 사용하여 자가분해 시키는데 가장 적당한 조건을 반응 표변방법(RSM)을 이용하여 조사한 결과는 pH 7.0, 온도 $30^{\circ}C$ 에탄올 4%, 소금 3%이었다. 세포벽이 파손된 효모를 위와 같은 최적조건에서 3일간 분해시켜 얻은 효모 자가분해물의 수율은 2.6배 향상되었으며, 총 아미노산의 함량도 현저히 증가(2.8배)하였다. 그리고 관능적인 품질도 재래방법으로 제조된 시료보다 고기 향미가 많고, 이미-이취가 현저하게 적어서 전체인 기호도에서도 상당히 우수한 것으로 평가되었다.

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베타-1,3-글루칸 생합성에 관여하는 Saccharomyces cerevisiae 유전자의 클로닝 (Cloning of a Gene Involved in Biosynthesis of ${\beta}-1,3-glucan$ in Saccharomyces cerevisiae)

  • 진은희;이동원;김진미;박희문
    • 한국균학회지
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    • 제23권2호통권73호
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    • pp.129-138
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    • 1995
  • 비허용온도인 $37^{\circ}C$에서 삼투감수성을 보이며 베타-1,3-글루칸 합성능이 현저히 손상된 Saccharomyces cerevisiae mutant(LP353)를 YCp50으로 제조한 yeast genomic library로 형질전환시킨 후, 콜로니 자기방사법으로 형질전환체의 선별을 시도한 결과, LP353의 베타-1,3-글루칸 합성능을 부분적으로 회복시켜 주는 약 8.5-kb 크기의 DNA 절편을 클로닝하는데 성공하였다. 클로닝된 8.5-kb의 DNA 절편은 copy 수에 무관하게 LP353의 또 다른 표현형질인 온도의존적 삼투감수성은 회복시켜 주지 못하였으나, 세포벽의 베타-1,3-글루칸 함량과 베타-1,3-글루칸 분해효소인 ${\beta}-glucanase$에 대한 내성은 copy수에 무관하게 증가시켜 주었다. 한편, 8.5-kb의 DNA 절편은 $37^{\circ}C$의 삼투안정제가 첨가된 액체배지에서 잘 자라지 못하는 LP353의 돌연변이 형질을 회복시켜 야생형의 수준에 근접하는 생장양상을 보여 주었다. 이상의 결과로 클로닝된 8.5-kb 크기의 DNA 절편은 S. cerevisiae의 베타-1,3-글루칸 생합성에 관여하는 유전자의 하나인 BGS2를 포함하고 있는 것으로 보여지며, subcloning을 통한 기능부위 분석 결과, 4.8-kb 크기의 BglII-KpnI DNA 절편에 BGS2가 존재하는 것으로 추정되었다.

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Possible Roles of LAMMER Kinase Lkh1 in Fission Yeast by Comparative Proteome Analysis

  • Cho, Soo-Jin;Kim, Young-Hwan;Park, Hee-Moon;Shin, Kwang-Soo
    • Mycobiology
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    • 제38권2호
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    • pp.108-112
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    • 2010
  • To investigate the possible roles of LAMMER kinase homologue, Lkh1, in Schizosaccharomyces pombe, whole proteins were extracted from wild type and lkh1-deletion mutant cells and subjected to polyacrylamide gel electrophoresis. Differentially expressed proteins were identified by tandem mass spectrometry (MS/MS) and were compared with a protein database. In whole-cell extracts, 10 proteins were up-regulated and 9 proteins were down-regulated in the mutant. In extracellular preparations, 6 proteins were up-regulated in the lkh1+ null mutant and 4 proteins successfully identified: glycolipid anchored surface precursor, $\beta$-glucosidase (Psu1), cell surface protein, glucan 1,3-$\beta$-glucosidase (Bgl2), and exo-1,3 $\beta$-glucanase (Exg1). These results suggest that Lkh1 is involved in regulating cell wall assembly.

Expression of heterologous genes using the slpA promoter and signal sequence in Lactobacilli

  • 강승하;복진덕;조광근;조재순;최윤재
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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    • pp.202-205
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    • 2000
  • A gene coding $endo-{\beta}$,-1, 4 glucanase from Actinomyces sp. KNG40 and phytase from Hansenula polymorpha were cloned into Esherichia coli JM101 by using E. coli/Lactobacillus shuttle vector pNZ3004 and pNZ123. The plasmid p3PS(1-4) and p123(1-4) have slpA promoter and slpA signal sequence. So, I constructed expression vectors, p3PS(1-4)Endo, phy and p123(1-4)Endo, phy. These constructed vector was transformed in target host Lactobacillus gasseri and reutri. These transformed host expressed endoglucanase and phytase as extracellular fraction. In the enzyme activity of the same vector, host L, gasseri was higher activity than L. reuteri. This indicates that L. gasseri recongnize promoter and signal sequence very well.

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Trichoderma asperellum T-5를 이용한 오이 모잘록병(Rhizoctonia solani)의 생물학적 제어 (Biocontrol of Damping-Off(Rhizoctonia solani) in Cucumber by Trichoderma asperellum T-5)

  • 류지연;김영덕;김용웅;이향범;김길용
    • 한국토양비료학회지
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    • 제39권4호
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    • pp.185-194
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    • 2006
  • 몇 년동안 게껍질이 풍부하게 있었던 밭토양에서 강한 키틴분해능력을 가진 Trichoderma 곰팡이를 분리하였다. 분리된 곰팡이의 5.8S rRNA, partial 18S, 28S rRNA genes, ITS1, ITS2 sequence 분석과 형태학적 특징을 살펴본 결과 Trichoderma asperellum으로 동정되었고, 이를 Trichoderma asperellum T-5 (TaT-5)로 명명하였다. 이 곰팡이는 chitianse와 ${\beta}$-1,3-glucanase같은 lytic enzyme을 분비하며, 키틴배지 상에서 6가지의 항 곰팡이성 물질을 생산했다. R. solani가 원인인 오이의 모잘록병에 대해 TaT 5의 방제효과를 보기 위해서 TaT-5 배양액(TA), chitin medium(CM), 증류수(DW)를 씨를 심은 후 10일 째에 각 pot에 관주했다. 그리고 관주 1주일 후에 R. solani의 균사를 갈아서 각 pot에 주었다. 실험기간 동안에 오이의 지상부와 지하부 생체중은 다른 처리구에 비하여 TA 처리구가 더 많이 증가하였다. 오이 잎에서 PR-protein (chitianse, ${\beta}$-1,3-glucanase) 활성은 R. solani 감염 후 CM과 DW에서 증가를 보였고, TA 처리구에서는 증가하다가 감소하는 경향을 보였다. 뿌리에서는 모든 처리구가 감소하는 경향을 보였지만 TA 처리구가 CM과 DW 처리구보다 감소하는 정도가 적었다. 오이의 잎과 뿌리에서 lignification related enzyme(POD, PPO, PAL)활성은 R. solani 감염 초기에는 증가하다가 점점 감소하는 경향을 보였다. 이러한 결과들은 TaT-5에 의하여 생산된 lytic enzymes와 항 곰팡이성 물질들이 오이에 R. solani의 공격을 줄여준다고 생각된다.

Development of Appropriate Fibrolytic Enzyme Combination for Maize Stover and Its Effect on Rumen Fermentation in Sheep

  • Bhasker, T. Vijay;Nagalakshmi, D.;Rao, D. Srinivasa
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제26권7호
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    • pp.945-951
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    • 2013
  • In vitro studies were undertaken to develop an appropriate fibrolytic enzymes cocktail comprising of cellulase, xylanase and ${\beta}$-D-glucanase for maize stover with an aim to increase its nutrient utilization in sheep. Cellulase and xylanase added individually to ground maize stover at an increasing dose rates (0, 100, 200, 400, 800, 1,600, 3,200, 6,400, 12,800, 25,600, 32,000, 38,400, and 44,800 IU/g DM), increased (p<0.01) the in vitro dry matter digestibility and in vitro sugar release. The doses selected for studying the combination effect of enzymes were 6,400 to 32,000 IU/g of cellulase and 12,800 to 44,800 IU/g of xylanase. At cellulase concentration of 6,400 IU/g, IVDMD % was higher (p<0.01) at higher xylanase doses (25,600 to 44,800 IU/g). While at cellulase doses (12,800 to 32,000 IU/g), IVDMD % was higher at lower xylanase doses (12,800 and 25,600 IU/g) compared to higher xylanase doses (32,000 to 44,800 IU/g). At cellulase concentration of the 6,400 to 32,000 IU/g, the amount of sugar released increased (p<0.01) with increasing levels of xylanase concentrations except for the concentration of 44,800 IU/g. No effect of ${\beta}$-D-glucanase (100 to 300 IU/g) was observed at lower cellulase-xylanase dose (cellulase-xylanase 12,800 to 12,800 IU/g). Based on the IVDMD, the enzyme combination cellulase-xylanase 12,800 to 12,800 IU/g was selected to study its effect on feed intake and rumen fermentation pattern, conducted on 12 rams (6 to 8 months; $20.34{\pm}2.369$ kg body weight) fed 50% maize stover based TMR. The total volatile fatty acids (p<0.01) and ammonia-N concentration was higher in enzyme supplemented group, while no effect was observed on dry matter intake, ruminal pH and total nitrogen concentration.

Cloning and Characterization of an Endoglucanase Gene from Actinomyces sp. Korean Native Goat 40

  • Kim, Sung Chan;Kang, Seung Ha;Choi, Eun Young;Hong, Yeon Hee;Bok, Jin Duck;Kim, Jae Yeong;Lee, Sang Suk;Choi, Yun Jaie;Choi, In Soon;Cho, Kwang Keun
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제29권1호
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    • pp.126-133
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    • 2016
  • A gene from Actinomyces sp. Korean native goat (KNG) 40 that encodes an endo-${\beta}$-1,4-glucanase, EG1, was cloned and expressed in Escherichia coli (E. coli) $DH5{\alpha}$. Recombinant plasmid DNA from a positive clone with a 3.2 kb insert hydrolyzing carboxyl methyl-cellulose (CMC) was designated as pDS3. The entire nucleotide sequence was determined, and an open-reading frame (ORF) was deduced. The ORF encodes a polypeptide of 684 amino acids. The recombinant EG1 produced in E. coli $DH5{\alpha}$ harboring pDS3 was purified in one step using affinity chromatography on crystalline cellulose and characterized. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis/zymogram analysis of the purified enzyme revealed two protein bands of 57.1 and 54.1 kDa. The amino terminal sequences of these two bands matched those of the deduced ones, starting from residue 166 and 208, respectively. Putative signal sequences, a Shine.Dalgarno-type ribosomal binding site, and promoter sequences related to the consensus sequences were deduced. EG1 has a typical tripartite structure of cellulase, a catalytic domain, a serine-rich linker region, and a cellulose-binding domain. The optimal temperature for the activity of the purified enzyme was $55^{\circ}C$, but it retained over 90% of maximum activity in a broad temperature range ($40^{\circ}C$ to $60^{\circ}C$). The optimal pH for the enzyme activity was 6.0. Kinetic parameters, $K_m$ and $V_{max}$ of rEG1 were 0.39% CMC and 143 U/mg, respectively.