모성 및 부성 genome의 기능을 알아보기 위하여 미세조작기법과 Sendai virus를 이용한 핵융합 기술을 이용하여 2개의 자성전핵만으로 구성된 2배체의 gynogenetic 수정란을 그리고 2개의 웅성전핵만으로 구성된 2배체의 androgenetic 수정란을 인위적으로 작출하였다. 이들의 작출효율은 biparental 수정란에서는 56%, gynogenetic 수정란에서는 50% 그리고 androgenetic 수정란에서는 56% 이었다. 이들을 체외에서 배양한 결과 gynogenetic 및 androgenetic 수정란은 2-세포기 이후에는 biparental 및 intact 수정란에 비하여 그 발달능이 매우 저조하였으나 이들 중 25% 이상이 포배까지 발달한 수 있음을 확인하였다. Gynogenetic 및 androgenetic 수정란을 동기화된 수란생쥐의 난관내에 이식하였던 바, androgenetic 수정란은 전혀 착상 되지 않았으나, gynogenetic 수정란에서는 착상이 확인되었다. 핵이식기법으로 인위조작된 2배체의 biparental 수정란으로부터 28마리의 생쥐 신생자를 생산하였다.
This study was carried out to develop a newly designed ovum pick-up(OPU) instrument for ultrasound-guided transvaginal follicular aspiration in cows. This new instrument consists of out- & inner-layer stainless pipes and a grip with a trigger(hand) switch. Some gauge types of disposable needles and tubes can be attached to this inner pipe. With this instrument, while grasping an ovary with one hand, the other hand can handle in apiration and vacuum on/off with the least assitant's help. With this instrument the mean recovery rate of bovine follicular oocytes was 45.2%. In recovered oocytes, usable oocytes(Grade I & II) were 30.4% and this rate meant 1.4 oocytes per ovary. For 30 days after initial aspiration with this instrument, some adverse effects such as adhesion, hemorrhage, hematoma and other mass formation in/with ovaries were also examined by rectal examination, ultrasonographic and endoscopic images. Adhesion was found in one ovary 1 week after aspiration, and hemorrhagic lesion was found 1-2 days and petechia were found 3-5 days after aspiration and there was no remarkable adverse effects. It was found that this instrument could be applicable and safe for ovum pick-up in cows.
반도체 다마신배선용 도금용 구리도금첨가제는 대표적으로 accelerator, suppressor 및 leveler 첨가제를 사용하여 다마신 패턴을 채우고 평탄화를 시킬 수 있다. Si 반도체 공정기술에 기반한 정확한 구조분석을 통해 각각의 첨가제의 기능이 비교적 체계적으로 연구되었으며, 최근에는 유속영향을 많이 받는 것으로 알려진 leveler 첨가제에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 본 연구는 대표적 leveler 첨가제의 하나인 Janus Green B(JGB, $C_{30}H_{31}ClN_6$)를 0 ~ 1 mM을 첨가하여 Si 기판위에 증착된 Cu 씨드층 상의 도금후 표면상태 및 불순물의 농도를 분석하고, 이 박막층들의 결정립 성장 경향성을 electron backscattered diffraction(EBSD) 분석을 통해 진행하였다. C, H, N 등의 불순물이 JGB 농도와 선형적 관계를 가지고 증가하는 것을 알 수 있었으며, S와 O의 불순물도 JGB 농도 증가에 따라 증가하는 것을 알 수 있었다. 또한 0.1 mM 첨가한 경우에 60% 정도 결정립 성장이 진행된 것을 알 수 있었으며, 0.2 mM을 넣은 경우에는 결정립 성장이 일어나지 않은 것을 알 수 있었다. 흥미로운 점은 4 point probe를 통한 면저항 측정을 통해 EBSD를 통한 결정립성장이 관찰되지 않은 0.2 mM JGB를 첨가한 경우에 대해서도 면저항의 감소가 관찰되며, 오히려 JGB 농도가 높을수록 이러한 면저항의 감소가 빠르게 시작되는 것을 관찰할 수 있었다. 이는 JGB 농도 증가에 따라 박막층의 불순물의 농도가 증가하고 막내에 존재하는 불순물의 농도가 증가하면 내부응력장이 커짐으로 인해 더욱 빠른 속도로 불순물의 재배치가 일어난 것으로 보인다. 이러한 불순물이 결정립계면에 편석되는 경우에 pinning을 통해 결정립계면의 이동을 저하시킬 수 있으므로 결정립의 성장 억제가 가능해진 것으로 판단된다.
현재 사용되고 있는 두뇌영상의 제거 방법은 비록 환자의 개인 정보를 보호하고 있으나, 과도한 제거로 정확한 두뇌영상의 무결성을 손실할 수 있다. 원래 두뇌의 영상과 동일한 두뇌 조직을 나타내면서 환자의 신원을 감출 수 있는 새로운 익명화 얼굴모델을 생성시키는 방법을 연구하였다. 제안방법은 두 단계로 구성되었다: 10명의 두뇌영상을 정규화시켜서 모조 두뇌 표본 영상을 생성하는 단계와 실험영상 두뇌의 외곽부를 모조 두뇌의 안면부로 대체시키는 단계이다. 전체 두뇌영상에서 두피와 두개골 영역을 분할하기 위하여 레벨셋 알고리즘을 적용하였다. 영역화된 모조 두뇌를 대상 두뇌영상에 동일하게 배치하고 정규화를 시켜서 익명화된 얼굴 모델을 생성하였다. 원래 영상과 변형된 영상의 두뇌 조직부의 밝기 변화를 비교하여 제안 알고리즘의 타당성을 실험하였다. 실험 결과 두 두뇌영상은 두뇌 조직에서 완전히 동일하면서 신원을 파악할 수 없는 것을 검증하였다.
이동차량 혹은 이동로봇의 자율 주행에 있어서 주변 환경의 인식을 통하여 산출되는 자기위치확인은 가장 핵심적인 요소이다. 일반적으로 GPS나 INS를 통합하여 이동차량 혹은 이동로봇에 장착된 카메라의 위치와 방향을 얻을 수 있지만, 이 경우 정확한 자기위치인식을 위해서는 충분한 지상 기준점을 이용해야만 한다. 본 연구에서는 기존의 호모그래피 방법이 2차원 특징점의 상관관계를 이용하는 것과는 다르게 GPS와 INS 입력값을 이용하여 이전 시점 영상과 중첩된 3차원 모델로부터 얻어진 3차원 좌표를 투영 변환함으로써 예측한 위치와 현재 시점 영상으로부터 KLT 추적방법을 사용하여 산출된 대응 특징점의 위치 사이의 관계로부터 카메라의 위치와 방향을 산출하는 방법을 제안한다. 제안하는 방법의 성능을 평가하기 위해 무선으로 운행되는 간이실험장치 내에 CCD카메라, GPS, INS 등을 장착하였으며, 영상은 15Hz의 프레임율로 획득한 비디오시퀀스를 사용하여 실시간으로 카메라 위치와 방향을 산출하는 실험을 수행하였다.
오늘날 촬영 상황을 조절할 수 있는 환경, 즉 고정된 촬영각이나 일관된 조도 조건에서는 얼굴인식 기술 수준은 신뢰할 수 있을 정도로 높다. 그러나 복잡한 현실에서의 얼굴 인식은 여전히 어려운 과제이다. SIFT 알고리즘은 촬영각의 변화가 미미할 때에 한하여, 크기와 회전 변화에 무관하게 우수한 성능을 보여주고 있다. 본 논문에서는 다양하게 촬영각이 변하는 환경에서도 얼굴 인식을 할 수 있는 어파인 불변 지역 서술자를 탐지하는 ASIFT(Affine SIFT)라는 알고리즘을 적용하였다. SIFT 알고리즘을 확장하여 만든 ASIFT 알고리즘은 촬영각 변화에 취약한 단점을 극복하였다. 제안하는 방법에서 ASIFT 알고리즘은 표본 이미지에, SIFT 알고리즘은 검증 이미지에 적용하였다. ASIFT 방법은 어파인 변환을 사용하여 다양한 시각에 따른 영상을 생성할 수 있기 때문에 ASIFT 알고리즘은 저장 영상과 실험 영상의 시각 차이에 따른 문제를 해결할 수 있었다. 실험결과 FERET 데이터를 사용했을 때 제안한 방법은 촬영각의 변화가 큰 경우에 기존의 시프트 알고리즘보다도 높은 인식률을 보여주었다.
Although the royal tomb keeper's house in the late Joseon period did not undergo dramatic changes, overall, the keeper's house of Yeong Mausoleum, the tomb of King Hyojong, and other royal tombs afterward showed the classification of its rooms according to their purpose and the expansion of its size. During King Yeongjo's reign, the tomb keeper's house tended to consist of Jaesil, Anhyangcheong, Jeonsacheong and Haenggak. The size and arragement pattern of the tomb keeper's house of Yeong Mausoleum were partially maintained in royal mausoleums constructed afterward. Especially Anhyangcheong was first established on the tomb keeper's house of Yeong Mausoleum and its architectural form was maintained until that of Ye Mausoleum, the tomb of King Cheoljong. The tomb keeper's house of Yeong mausoleum in Yeoju was constructed in 1659 and then moved in 1673 and 1674. In order to bury King Hyojong's wife with King Hyojong, the site of Yeong Mausoleum was moved twice with using almost all materials used for the initial tomb. In addition, as norms related to rites performed at royal tombs were created in the early 20th century, the tomb keeper's house of Yeong Mausoleum was selected as an exemplary tomb keeper's house representing the royal tomb keeper's house of the Joseon era, and it mostly coincides with its remaining arrangement pattern. Through records distributed in relatively similar periods, it is considered that most of the features fo royal tomb keeper's house in the Joseon period have been inherited until today and that Yeong Mausoleum has a very higher architectural status as an especially valuable tomb keeper's house among royal tomb keepr's houses in the Joseon era.
가각고는 국왕의 명령인 수교(受敎)를 비롯한 국가 중요문서와 노비문서·행사기록 등 다양한 국가기록을 보존하는 일종의 기록보존을 위한 공간이었다. 때문에 가각고에 대한 연구는 조선의 전반적인 기록보존 공간 운영의 실상을 파악할 수 있는 기초적인 자료로 활용될 수 있으리라 여겨진다. 이를 위해 본 논문에서는 가각고의 인력구성과 혁파시점을 중심으로 가각고의 실상을 보다 상세히 규명해 보고자 하였다. 먼저 가각고는 운영을 위해 별도의 실무인력을 두었으나, 조선 초기 정치적 환경 변화에 따라 가각고의 소속과 인력 구성 또한 변경되었다. 그리고 이에 따라 가각고의 위상 및 그 운영의 양상 또한 변동되었다. 이후 세조대 들어 가각고는 혁파되었다고 알려졌으나, 조선 후기 효종~영조 연간 가각고라는 이름의 기관이 운영되었음이 확인된다. 이 가각고 또한 조선초기 가각고와 마찬가지로 실무 인력을 배치하고 기록을 보존하는 공간으로서의 역할을 수행하였다. 이는 가각고의 존재에 대한 재논의가 필요함을 보여주는 사료라고 할 수 있다. 이상의 연구를 통해 가각고 운영과 조선 기록보존의 실상에 보다 근접할 수 있을 것으로 기대한다.
The long term goal of this research is to develop an efficient procedure for large scale production of genetically identical or cloned animals. To improve nuclear transpalntation efficiency in the rabbit, this study evaluated the age of nuclear recipient oocytes on the different steps of nuclear transplantation. The ovulated oocytes in different ages were collected from the superovulated does by flushing oviducts with Dulbecco's phosphate buffered saline(D-PBS) supplemented with 10% fetal calf serum(FCS) from 13 to 15, 17 to 20 and 23 to 26 hours after hCG injection. The denuded oocytes were used as nuclear recipient cytoplasm following enucleation by micromanipulation. The blastomeres separated from the 8-cell embryos were used as nuclear donor. The enucleated oocytes receiving a blastomere in the perivitteline space were fused in the 0.28 M mannitol solution at 1.5 kV/cm, 60 sec for three times. The fused oocytes were co-cultured with the monolayered rabbit oviductal epithelial cells in TGM-199 solution with 10% FCS for 72 hours at 37$^{\circ}C$ in a 5% $CO_2$ incubator. The cultured nuclear transplant embryos and in vivo developed embryos collected at 72 hours after hCG injection were stained with Hoechst 33342 dye. Their cell numbers were counted under a fluorescent microscope. The results obtained were summarized as follows ; 1. The aged oocytes(20 hrs. post hCG) showed significantly(P<0.05) higher fusionrates(70 ~ 90%) than the recently ovulated oocytes(30.8%) 2. The aged oocytes which were electrically activated and fused at 20 hours developed to blastocyst at significantly(P<0.05) high rate, while none of the recently ovulated oocytes developed to blastocyst. 3. Even though the aged oocytes at 23~26 hours showed higher fusion rate(85.7%), not only they were inadequate to manipulate but also their developmental potential to blastocyst was highly impaired. 4. The developmental potential in vitro of nuclear transplant embryos was significantly retarded than in vivo deveolped embryos.
The present study was conducted to investigate the influence of embryo cell stage at 18h post-fusion and oocyte preactivation on sebsequent in vitro developmental potential in the nuclear transplant rabbit embryos. The embryos of 16-cell stage were collected and synchronized to G$_1$ phase of 32-cell stage. The recipient cytoplasms were obtained by removing the first polar body and chromosome rnass from the oocytes collected by non-dis-ruptive microsurgery procedure. The separated G$_1$ phase blastomeres of 32-cell stage were injected into non-preactivated recipient cytoplasms. Otherwise, the enucleated recipient cytoplasms were preactivated by electrical stimulation at 18h post-hCG injection and the separated G$_1$ phase blastomeres of 32-cell stage were injected. Mter culture until 20h post-hOG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused by electrical stimulation. The fused nuclear transplant embryos were classified into 3~4-cell, 2-cell and 1-cell stage at 18 hrs post-fusion and cultured until the embryos reached blastocyst stage. The developmental rate to blastocyst stage was significantly (P <0.05) higher in all the reconstituted embryos of 3~4-cell stage(58.0%) than in 2 and icell stage. The developmental rate to blastocyst stage in the embryos of 3~4-cell stage at 18 hrs post-fusion was significantly (P<0.05) higher in the reconstituted without oocyte preactivation(77.8%) than in the oocyte-preactivated embryos (33.3%). These results indicated that the higher rate of in the in vitro development to blastocyst stage might be obtained form the embryos which were reconstituted with nuclear donor of G$_1$ phase and non-preactivated oocyte, and developed more rapidly for 18 hrs post-fusion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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