This study was carried out to investigate the effect of vitrification and slow freezing methods on the post-thaw developmental rate of rabbit zygotes. After exposing rabbit zygotes in EFS solution for 0.5, 1, 2, 3 and S min at room temperature, they were washed with 0.5 M sucrose solution, D-PBS and TCM-199 and then cultured in TCM-199 plus 10% FBS with bovine oviduct epithelial cells(BOEC) to examine whether the cryoprotectant induced injury during the various exposure periods. The embryo development rates to hatched blastocyst after exposing in EFS solution for 3 and 5 min(40.0 and 16.7%) were significantly lower than in 0.5, 1 and 2 min(63.0, 72.0 and 54.5%), respectively. The post-thaw development rates to hatched blastocyst were significantly(P<0.05) higher in in vivo morula with intact mucin coat(85.2%) and mucin seperated morula(77.8%) than those of in vitro morula(58.5%) and zygote(5.9%), hut no difference was shown between in vitro morulae and mucin separated morula. The cryoprotectant dilution procedures showed no effects on the post-thaw development rates to hatched blastocyst under the present culture conditions. The post-thaw development to hatched blastocyst in the rabbit zygotes was not significantly different between the slow freezing(12.8%) and vitrification(5.9%). These results indicated that the rabbit frozen zygotes could he successfully developed in vitro to hatched blastocysts, though their developmental rate was very low, compared with morula stage embryos, in either vitrification or slow freezing procedure under the present conditions.
This study was conducted to establish the optimal culture conditions for in vitro production of bovine embryos derived from slaughter house ovaries. Cumulus-oocyte- complexes (COCs) collected by aspiration from follicles of 2~7 mm in diameter were matured in Ham's F-10 medium supplemented with 0.01 $\mu\textrm{g}$/m1 epidermal growth factor (EGF) at 39$^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_2$in air. After 24 hrs of culture, the oocytes were co-cultured with epididymal sperm selected off by Percoll-density gradient in TALP medium for 24 hrs. The presumptive zygotes were cultured in HECM-6 medium for 3 d post-insemination, and followed by cultured in TCM199 medium until 7 to 10d post-insemination. The cultures were compared of their cleavage and development into later stage in culture medium by additions of different protein sources (PVA, BSA and BCS) and by different embryo density. The rates of cleavage and development rates into blastocyst were not significantly (P<0.05) different among the culture media containing with BSA (75.0% and 40.5%), BCS (76.7% and 38.0%) and PVA (72.5% and 42.2%), respectively. Significantly (P<0.05) higher blastocysts rates were obtained in culturing of 30 and 40 embryos in each 50$\mu$l droplets of culture medium than in 5, 10 and 20 embryos. These results indicate that the optimal density of embryos is 30~40 embryos in a 50$\mu$l droplet of culture medium. Furthermore there is no effect of different protein sources on early embryonic development.
To improve the efficiency of nuclear transplantation in the rabbit, this study were evaluated the influence of celly cycle of donor nuclei on the in vitro developmental potential in the nuclear transplant embryos. The embryos of 16-cell stage were collected from the mated does at 48h post-hCG injection and they were synchronized to G1 phase of 32-cell stage. Synchronization of the cell cylce of blastomeres were induced, first, using an microtubules polymerization inhibitor, 0.5$\mu\textrm{g}$/ml colcemid for 10h to arrest blastomeres in metaphase, and secondly, using a DNA synthesis inhibitor, 0.1$\mu\textrm{g}$/ml aphidicolin for 1.5 to 2h to cleave to 32-cell stage and arrest them in G1 phase. The separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were injectied into enucleated recipient cytoplasms by micromanipulation. After culture until 20h post-hCG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused and activated by electrical stimulation. The nuclear transplant embryos were co-cultured for 120h. In vitro cultured embryos were monitored every 24h to assess for development rate. After in vitro cultue for 120h, the nuclear transplant embryos developed to blastocyst stage were stained with Hoechst 33342 dye for counting the number of blastomeres under a fluorescence microscopy. The cleavage rate of blastomeres from 16-cell stage stage rabbit embryos treated with colcemid for 10h or aphidicolin for 6h following colcemid for 10h were not significantly different. The electrofusion rate was similar by high in S and G1 phase donor nuclei as 80.6 and 79.1%, respectively. However, the nuclear transplant embryos using G1 phase donor nuclei were developed to blastocyst at high rate(60.3%) than those using S phase donor nuclei(26.0%). Moreover, the mean blastocyst stage were increased significantly(P<0.05) with the G1 phase donor nuclei(176.6 cells and 1.50 cycles), as compared with the S phase donor nuclei(136.6 cells and 1.42 cycles). These results show that the blastomeres of G1 phase were more successful as donor nuclei in the nuclear transplant procedure, compared with S phase.
Objectives : King Hyojong (1619-1659) was the 17th king of the Joseon Dynasty. He was on the throne from 1649 to 1659. The king was a center of state rule in ancient times. This meant that the physical and mental status of a king was very confidential information. In the royal court of Joseon Korea, the treatment process for the king had to be performed under the surveillance of close associates, and this whole process had to be recorded by the official secretary. This is the reason that I referred to the Daily Records of Royal Secretariat of Joseon Dynasty. Methods : Relevant articles were extracted from Daily Records of Royal Secretariat of Joseon Dynasty and analyzed according to the main arguments of this paper. Some other related sources were referred in terms of King Hyojong's ailments and treatments. Results & Conclusions : King Hyojong suffered from various diseases during his time on the throne. Fever was the most frequent ailment; he also often had diarrhea followed by poor appetite. I assume that he must have suffered from diabetes considering his ailments. Additionally, his final treatment records clearly show that his ailments were similar to diabetic complications.
An animal health monitoring system in Gyeongnam area (near-Chinju) was studied to evaluate the environmental risk factors, physical examinations and 4 disease entities(abomasal displacement, traumatic reticulopericarditis & -peritonitis, milk fever and lameness) in 40(34 in second year)dairy herds (total 1253 dairy cattle). In feeding environments, we examined housing system, forage percentage in ration, stall types, playground, cleanness of stall. In housing system, most of herds (60%) have tie-stall types and 36 herds are open-type housing. The forage ratio of ration was less than 50% in most of herds (67%). 39 herds had their own playgrounds and the frequency of playground cleanness was irregular, Physical examinations included the T(temperature), P (pulse), R (respiration), abnormalities of superficial lymph nodes, claw examination and total CBC with blood from tail veins. T, P, R are within normal limits (T : 38.1$\pm$0.6$^{\circ}C$, P : 84.6$\pm$12.9/min., R : 24.0$\pm$7.6/min. ,respectively), the swelling of lymph nodes were shown in 13 cattle and overall claw trimming was required in 3 herds. In blood examination, 23 cattle showed leuko-cytosis and 7 cattle showed low RBC and hemoglobin level, the other cattle were within normal limits (WBC : 8.90$\pm$2.06 10$^3$/ul., RBC : 6.36$\pm$1.02 10$^{6}$ ul, Hb : 9.83$\pm$ 1.20 g/dl PCV : 27.43$\pm$5.67 %, respectively). In 4 disease entities, we found some metallic foreign bodies in men of 13 cattle, which had predisposing factors of traumatic reticulopericarditis and reticuloperitonitis, 13 abomasal displacement, 51 milk fever and lameness in 39 cattle.
Sixty-six dogs diagnosed with cystolithiasis at animal clinics in the Busan area between April 2002, and April 2003, were reviewed. The chemical analysis of cystoliths from 66 dogs indicated that the predominant mineral component was struvite (45 dogs), calcium oxalate (14 dogs), or urate (6 dogs). Animals affected with struvite were grouped into four (s-1; struvite only, s-2; struvite mixed with lesser quantities of calcium oxalate or ammonium urate, s-3; nuclei and lamination, s-4; struvite nucleus surrounded by other minerals), with calcium oxalate into six(o-1; calcium oxalate monohydrate only, o-2; calcium oxalate dihydrate only, o-3; combination of calcium oxalate monohydrate and dihydrate, o-4; calcium oxalate nucleus surrounded by other minerals, o-5; 100% calcium oxalate monohydrate nucleus surrounded by 100% calcium oxalate dihydrate, o-6; mixed calcium oxalate monohydrate nucleus surrounded by mixed calcium oxalate dihydrate), and with urate into two(u-1; ammonium acid urate only, u-2; ammonium acid urate mixed with lesser quantities of other minerals). In this study, the numbers of 4 groups of struvite were (s-1; 10, s-2; 9, s-3; 21, s-4; 5), 6 groups of calcium oxalate were (o-1; 0, o-2; 1, o-3; 2, o-4; 3, o-5; 2, o-6; 6), and 2 groups of urate were (u-1; 6, u-2; 0). The data from each group was analyzed and compared. Shih Tzu(14 cases), Yorkshire terrier(10 cases), mixed-breed(10 cases) and Miniature schnauzer(7 cases) were more frequently affected than the other breeds. Females(40 cases) were affected more than males(26 cases). Twenty-nine dogs had cystoliths associated with a bacterial urinary tract infection, and uroliths tended to recur. We conclude eradication of urinary infection along with appropriate food (e.g. prescription diet) with client compliance should help in reducing the incidence or severity of the disease.
Kim, Young-Ki;Lee, Scott-S.;Park, Se-Jin;Lee, Seung-Yong;Lee, Hee-Chun;Chang, Hong-Hee;Lee, Hyo-Jong;Yeon, Seong-Chan
Journal of Veterinary Clinics
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v.28
no.1
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pp.149-153
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2011
In this report, laparoscopic ovariohysterectomy (LOHE) was performed on two, healthy, intact female dogs. Three ports, umbilical port for placing the laparoscope and the left and right paramedian instrument ports were placed into the abdominal cavity. First, in order to isolate the right ovary, the vascular pedicle was coagulated by activating the universal bipolar forceps. Then, the pedicle and suspensory ligament were transected by the bipolar electrocauterization scissors. In the same manner, the left ovary was isolated. The uterine body and the uterine arteries were coagulated bilaterally and transected just rostral to the cervix. The isolated ovaries and uterus were exteriorized through the left paramedian instrument port, which was extended by approximately 1 cm to allow for tissue removal. The skin and subcutaneous tissue were closed in a routine manner. Surgical times for LOHE in two dogs were 35, 40 min respectively. Total length of abdominal incision was shorter than 3 cm in two dogs. No clinical complications related to the LOHE were observed during 1.5 years after surgery. The LOHE is an alternative surgical technique that deserves further investigation.
A 8-year-old female Shih-tzu dog (weighting 4.5 kg) with history of both hindlimb lameness and cervical mass was presented to Veterinary Teaching Hospital, Gyeongsang National University. In physical examination, ataxia, kyphosis, back pain and cervical mass were identified. Marked periosteal new bone formation of the fourth lumbar vertebra and soft tissue opacity mass of cervical region were observed in survey radiographs. Transverse computed tomography (CT) scan obtained at the lumbar and cervical lesions shown a well defined multilobulated bony mass and partially destructive lytic lesions the fourth lumbar vertebral body and a enlarged retropharyngeal lymph node with heterogeneous contrast enhancement and moderately enhancing left tonsillar mass. Neoplastic squamous epithelium which have developed vessel and lymphocyte infiltration in surrounding tissue were confirmed based on histopathologic examination. Based on the diagnostic findings the dog was diagnosed as a cervical lymph node metastases of tonsillar squamous cell carcinoma.
The present study has been carried out to elucidate the antiestrogenic effects of tamoxifen on RNA and protein synthesis in uteri of immature rats. Immature female Sprague-Dawley rats were allocated into 4 groups and injected with $5{\mu}g$ of estradiol-$17{\beta}$, $50{\mu}g$ of tamoxifen, a combination of both, or vehicle only subcutaneously three times with an interval of 24 hours respectively. The specific activities of $^3H$-uridine incorporation into uterine RNA and those of $^3H$-leucine incorporation into uterine protein were measured before and 1, 3, 6, 12, 24, 48 and 72 hours after the above treatments. The results obtained were summarized as follows; 1. Tamoxifen itself increased RNA synthesis an hour after treatment(169.18% of control), but it's specific activity was reduced to control level after 3 hours. Tamoxifen inhibited significantly (p<0.01) the activity of RNA synthesis of estradiol-$17{\beta}$. 2. The increasing rate of protein synthesis was lower in tamoxifen treated group than that in estradiol-$17{\beta}$ treated group. While the rate was steadily increased up to 357.4% of control by estradiol-$17{\beta}$ in 72 hours, tamoxifen itself failed to increase the rate after 24 hours and significantly (p<0.01) inhibited the activity of estradiol-$17{\beta}$(-167.4%).
The aim of the present study was to analyse grunts of the sows and to extract parameters from the time and frequency signals in nursing behavior. Five crossbred $Landrace{\times}Yorkshire$ sows were used on day 5 or 6 postpartum. The grunts and the behaviors of the five sows were recorded with five digital camcorders. Three parameter groups [Group I: Formant vector alone, Group II: Formant vector+parameters from time signal, Group III: Formant vector+parameters from time signal-parameters eliminated by stepwise discriminant analysis backward (SDAB)] with parameter vectors extracted from single grunts in the maximum grunting rate period were used for individuality of the sows. The parameter groups were compared by a discriminant function analysis. The classification system adopted in the Group II represented the higher discriniation rate than those in other groups (Group I: 63.3%, Group II: 83.0%, Group III: 80.0%). This study demonstrated that formant, intensity, and pitch were available sound parameters for individuality of the sows during nursing behavior.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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