Kim, Myeong-Dong;Gang, Hyeon-A;Lee, Sang-Gi;Seo, Jin-Ho
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.99-102
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2001
Recombinant Saccharomyces cerevisiae strains harboring various copy numbers of hirudin gene were developed to study dependency of hirudin expression level on its gene copy number. A linear relationship between the copy number of hirudin expression cassette and hirudin expression level was observed up to 10 copies. A double <5-integration vector truncated wi 디 1 the unnecessary bacterial genes before yeast transformation showed a four-fold increase in transformation efficiency and a 1.3-fold enhancement in hirudin expression level compared with a single <5 system. Gratuitous hirudin expression strain was developed by disrupting the GALl gene of S. cerevisiae. Glucose that was fed in a limited manner effectively supported cell growth and hi겨din expression by the gratuitous strain. Effects of methanol concentrations on hirudin production in recombinant Hansenula polymorpha were investigated in continuous and fed-batch cultures. At a steady-state of continuous culture, an optimum methanol concentration of 1.7 g/L was determined at a dilution rate of 0.18 $h^{-1}$ with 1.8 mg/L ${\cdot}$ h hirudin productivity.
The waste gained from alcohol production with sweet potato was considered as a potential substrate for the production of single cell protein (SCP). The high content in organic materials, simplicity to filtrate and a suitable pH for the growth of yeasts were indicated as a good substrate. A yeast utilizing this substrate was isolated from the compost ground and identified as Candida boidinii. The strain was the highest in assimilation of this alcoholic waste and the yield was maximized at pH 5.0, $30^{\circ}C$ after 72 hrs incubation. The dry cell weight and crude protein content at optimal conditions were 1.02g/100ml and 54.5%, respectively. The growth of the yeast was stimulated with the addition of 0.2% urea, 0.1% $K_2HPO_4$, and 0.02% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.12
no.3
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pp.119-125
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2004
Sugar beet stillages were used as a substrate for the production of single cell protein by a thermotolerant yeast Candida rugosa. 3 Stillage substrates were nutritionally optimized for the better production of yeast biomass and for the reduction of COD. The addition of Phosphorus(P) was required for all stillages, but Nitrogen(N) only when the residual sugar remained. The addition of P increased the biomass production to 23-61%. The addition of N increased the biomass production only a little, but when added together with P increased to 90%. The COD decreased to 26-46% when P was added, but decreased to 85% when P was added together with N.
The research has been carried out to optimize a recombinant S. cerevisine fermentation process for the production of an anticoagulant hirudin. The structural gene coding for hirudin was combined with the GAL10 promoter for controlled expression, the MFal signal sequence for hirudin secretion, and the GAL7 terminator for transcriptional termination. Growth medium composition and environmental conditions were optimized for maximizing cell growth and final hirudin concentration. The optimized conditions included yeast extract 40g/$\ell$, casamino acid 5g/$\ell$, g1ucose 20g/$\ell$, galactose 30g/$\ell$, DO 50% and temperature $30^{\circ}C$. These conditions yielded the specific cell growth rate of $0.13hr^{-1}$, the final cell density of 30g cell/$\ell$ and the final hirudin concentration of 64mg/$\ell$ in the batch fermentation with a 2.5$\ell$ jar fermentor.
Seven strains of methanol assimilating yeasts were isolated from soil enriched with tetracycline. Among them two better growing strains were selected and partially identified as species belonging to genus Candida. The both Candida 1-B and 25-A, grew best under conditions of pH 5.0 and 28$^{\circ}C$. The optimal methol concentration in the medium was found to be 1%, Whereas the organism, could grow up to the 4% level. Biotin was required by the organisms for growth and organic nitrogen sources raised the rate of growth. The field of biomass per unit weight of consumed methanol after 96 hours were 36.9% by Candida 1-B and 39.2% by 25-A.
A yeast loading biochemical oxygen demand (BOD) sensor was designed and constructed to quickly measure the concentration of biologically assimilable organic substances dissolved in water as BOD values to feed back to the waste water treating processes. The sensitivity of the BOD sensor reached maximum at around pH 7.0 and $30^{\circ}C$ where yeast showed the highest assimilation activity. Biomass also affected the sensor output, and biomass of $ 0.14\;mg/cm^2$ on the dialysis membrane appeared to be the optimum cell mass level. The sensitivity of the sensor depended on the kinds of pollutants and increased considerably when the yeast was preincubated in the solution of respective pollutants before loading on the sensor.
Rhodotorula glutinis was inoculated in the medium containing 0 ($S_0$), 0.01 ($S_1$), 0.1 ($S_2$) and 1.0% ($S_3$) Ganodoma lucidum extract and incubated in a shaking incubator at $30^{\circ}C$ for 8 days and the cell growth, sugarity, lipid content, and fatty acid composition were measured to investigate the effects of G. lucidum extract on the growth and biosynthesis of fatty acids by oleaginous yeast, Rhodotorula glutinis. After the 8 day incubation, the cell growth of $S_1,\;S_2\;and\;S_3$ increased 1.6, 1.7 and 2.1 times, respectively, than that of $S_0$. Sugar consumption of incubating medium was decreased but the crude lipid content in R. glutinis was increased with increase of the amount of G. Lucidum extract. Myristic, palmitic, stearic, oleic and linoleic acids were identified by GC as the major fatty acids in the crude lipid produced by R. glutinis and the content of unsaturated fatty acids (38.6 mg/g) was greater than that of saturated fatty acids (22.3 mg/g). As the G. lucidum extract concentration increased, fatty acids contents were increased except myristic acid, and the most increase occurred at the addition of 0.1% while they were considerably decreased in the case of the addition of 1.0% G. lucidum extract.
Glutathione is a well known chemotherapeutic agent for liver disease and is a popular nutritional supplement in the United States. Previous our studies reported the suppressive effects of glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain (FF-8GY) on carbon tetrachloride- and alcohol-induced hepatotoxicity. The primary objective of this study was to investigate the comparative effects of FF-8GY and commercially available glutathione-enriched yeast extract (GYE) against the oxidative stress in alcohol-induced fatty liver of rats. The lipid peroxidative index (thiobarbituric acid-reactive substances, TBARS) and antioxidant status (reduced glutathione level) were used to monitor those protective roles of FF-8GY or GYE treatment. When the rat was treated alcohol, the TBARS levels in the whole liver and the subfractions of microsomal and mitochondria were significantly increased but these were significantly decreased by FF-8GY treatment and tended to be lowered by GYE treatment. The concentration of hepatic glutathione is known to be closely associated with antioxidant system and this was slightly deplete in the alcohol-induced rats, but this was recovered by treating with FF-8GY. However, the glutathione concentration was more significantly decreased in the GYE supplementation in alcohol feeding rats. Alcohol treatment also negatively affected the serum total protein and albumin, but these were significantly increased near normal levels in FF-8GY coadministered rats. These results suggest that glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain may have positively mediate the alcohol-induced oxidative stress, and this effect was more pronounced in FF-8GY compared to GYE.
In order to obtain basic information on the production of single cell protein from petroleum, more than 400 yeast strains were isolated from various soil samples in Korea utilizing petroleum hydrocarbon as the sole carbon source. A yeast strain showing the highest cell yield among the isolated strains was selected and identified. The optimal culture condition was searched in the flasks shaken throughout the procedure. And the growing characteristics for the selected yeast strain and chemical analysis of the yeast cell component were carried out. The results obtained were as follows: 1. The selected yeast strain was identified as Candida curvata and we named it Candida curvata-SNU 70. 2. The composition of the medium proposed for the present yeast strain is: Light Gas Oil 30ml, Urea 400mg, Ammonium sulfate 100mg, Potasium phosphate (monobasic) 670mg, Sodium phosphate (dibasic) 330mg, Magnesium sulfate 500mg, Calcium carbonate 3g, Yeast extract 50mg, Tween 20 0.05ml, Tap water 1,000ml. 3. Other culture conditions employed for the yeast were pH 5.5-7.0, temp. $30^{\circ}C$ under an affluent aerobic state. 4. Addition of light gas oil in portions to the culture media as the growth proceeded was more effective, especially in the cultivation on the higher oil concentration media. 5. Studies on the propagation of the yeast cells in the light gas oil medium revealed that the yeast has the lag phase lasted 16 hours and the logarithmic growth phase covered 16 to 28 hours. The specific growth rate was about $0.22\;hr^{-1}$ and doubling time was 3.2 hrs. during the logarithmic growth phase. 6. Under the cultural condition employed, the cell yield against the amount of light gas oil (wt%) was 16.1% and the protein content of the dried yeast cells was 48.4%.
Ethyl caproate is one of the important flavor compounds produced during the brewing of rice wine. The rice wine yeast and koji were reported to produce the esterases which synthesize and also hydrolyze ethyl caproate. From the results of monitoring the esterase activities of rice wine yeast and koji, their roles for producing ethyl caproate during brewing were postulated. In case of rice wine yeast, the production of esterase synthesizing ethyl caproate was influenced by the substrate, caproate but that of esterase hydrolyzing ethyl caproate was promoted by ethyl caproate but inhibited by caproate. The production of esterases of koji were not influenced by the substrates for ethyl caproate production but influenced by the growth of koji. The maximum concentration of ethyl caproate produced by rice wine yeast was 0.4 ppm in this research but the production of ethyl caproate by koji was not detected under our experimental conditions. Considering the results of this research, ethyl caproate is not produced by the esterases of koji during brewing but produced by the esterases of rice wine yeast. The growth of rice wine yeast represses that of koji because of the high concentration of ethanol produced by rice wine yeast. The esterases of rice wine yeast may decide the production of ethyl caproate during brewing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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