19-nortestosterone(NORA)와 19-norandrostenedione(NT)는 정소내 aromatization과정중 중간 대사물로 검출된다. 본 연구는 이들을 장기간 투여하여 정소 및 부속기관의 무게, 혈청내 testosterone(T)의 농도, 정자형성에 미치는 영향을 조사하였다. NORA, NT 및 TE를 $300/50{\mu}l$농도로 주당 3회씩 12주간 정소에 직접 주사(intratesticular injection, i.t.)하였다. 또한 GnRH antagonist(RS68439)를 처리하여 혈청내 생식소자극호르몬 (GTH)을 감소시킨후 위 호르몬들을 동일방법으로 처리하여 이들의 보상작용을 조사하였다. NORA는 정소무게를 감소시키지 않았으나 GnRH antagonist를 처리하여 감소된 정소무게를 현저하게 보상하였다(P<0.05). NORA, NT, TE는 모두 부속기관의 무게를 증가시켰으며, RS68439가 감소시킨 부속기관의 무게를 현저히 증가시켰다. 그러나 이들은 부정소(epididymis)에는 영향을 주지않았으며 RS68439처리군에서는 보상작용을 나타내었다. 이들의 처리로 혈청내 LH농도는 완전히 감소하였으나 FSH의 농도에는 영향을 나타내지 않았다. 그리고 혈청내 T의 농도를 증가시켰다. NORA는 정자형성과정중 7단계의 spermatid의 수를 현저히 감소시켰다. 위 결과로 보아 NORA는 GnRH antagonist로 FSH의 분비가 억제된 쥐의 FSH분비를 촉진하며, T의 농도를 증가시켜 정자형성과정을 억제하는 것으로 추론된다.
21명의 간흡충 감염환자 및 15명의 건강인으로부터 혈청을 수집하여 혈청내 IgE와 간흡충에 대한 특이 IgE 항체를 RIST와 RAST법을 이용하여 측정하였다. 간흡충 감염환자 및 건강인의 혈청 IgE와 특이 IgE는 각각 2,372 lU/ml과 364IU/ml 그리고 52.0%와 4.4%로 간흡충 감염자에서 모두 유의하게 상승되어 있었으며 (p<0.001 및 p<0.01), 혈청 IgE의 상승과 특이 IgE의 상승은 상호 밀접한 관계가 있었고(r=0.9451), 혈청 IgE와 EPG(r=0.6056), 특이 IgE와 EPG(r=0.5693) 역시 상관 관계가 있었다. 이상의 결과로 보아 간흡충 감염은 인체 혈청내 IgE 및 특이 IgE항체를 상승시키며, IgE 및 간흡충에 대한 특이 IgK는 숙주-기생충간의 면역반응에 관여할 것으로 생각된다.
포유류 배아의 착상기작을 규명하고자 본 연구에서는 착상시기에 수정된 배아가 착상부위를 어떻게 인식하는 지 그리고 착상부위의 분화유발요인이 무엇인지를 조사하였다. 착상시기(임신 제6일)와 착상후 초기배아 발생기간(임신 제9일)중 혈청내 estradiol (E2)과 Progesterone(P4)의 농도를 측정하였으며, 자궁내막 조직을 착상부위 (antimesome trium)와 비 착상부위(mesometrium)로 분리하여 P4의 수용체 농도를 측정하였다. 혈청내 E2의 농도는 임신 제6일군에서 E2처리군에서 가장 높았으며, 임신 제9일에서는 intact 대조군에서 가장 높고 제9일의 모든 실험군의 농도는 임신 제6일군보다 높았다. 혈청내 P4 농도는 임신 제6일과 9일에서 다같이 대조군에서 가장 높으며 처리군 중에서는 P4처리군에서 높아지고 있다. P4 농도 역시 임신 제9일의 모든 실험군에서 제6일의 실험군보다 높았다. P4수용체 농도는 착상부위가 비 착상부위보다 높으며, 대조군(P < 0.01)과 P처리 군(P < 0.05)에서는 유의한 차이로 비 착상부위보다 높았다. 자궁내막조직 착상을 위한 분화에는 P4의 영향이 크며 P4의 혈청내 농도와 핵의 수용체 농도는 모든 실험군에서 상응하는 관계를 나타내었다. 이 결과는 앞서 일차적으로 발표한 알카리성 phosphatase (ALPase) 활성과도 상응하는 것이다.
본 연구는 정상 및 호흡곤란 신생아의 혈청내에 존재하는 nitric oxide(NO)의 생성을 관찰하고 erythropoietin (EPO)의 생성을 보기 위하여 정상 신생아 18명과 호흡곤란 신생아 16명으로부터 혈액을 채취하여 혈청내에서의 NO 및 EPO 생성량을 enzyme-linked immunosorbant assay법으로 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 정상신생아의 혈청내 nitrite ion은 14.9$\pm$3.2 $\mu$M을 나타냈고 호흡곤란신생아군에서는 12.8$\pm$3.3 $\mu$M을 나타냄으로서 정상 대조군보다 호흡곤란군이 NO생성량이 낮음을 알 수 있었다. 2. 정상신생아의 혈청내 EPO는 16.2$\pm$3.4 mU/ml을 나타냈고 호흡곤란신생아군에서는 21.2 $\pm$5.4 mU/ml을 나타냄으로서 정상 대조군보다 호흡곤란군이 EPO생성량이 많음을 알 수 있었으며 통계학적으로 매우 유의한 차이를 나타냈다. 이상의 결과에서 호흡곤란증후군에서는 정상대조군에 비하여 NO생성이 대체적으로 저하되어 있음을 알 수 있었고 반대로 EPO의 생성은 증가되어 나타남으로서 EPO 상승에 따른 임상증상도 발현될 가능성이 있다하겠다.
한우와 Charolais와의 교잡종 빈우에 있어서 초발정일령과 체중 및 성장중의 혈중 LH, FSH prolactin, progesterone과 estradiol수준의 변화를 알고저 본 시험을 시도하였다. 공시된 빈우는 한우 4두와 교잡종$(F_1)$, 4두로서 NRC 사용표준에 따라 사료를 급여하였고 군사하였다. 체중은 출생일로부터 1개월 간격으로 16개월령까지 측정하였으며 13개월령까지 체중측정시마다 채혈한 다음 분리된 혈청내의 호르몬을 RIA로 분석하였다. 초발정일령은 유의성이 없었으나 교잡종이 한우보다 빨랐다($326.7{\pm}51.6$일과 $372.5{\pm}31.9$일) 초발정시 체중은 교잡종이 한우보다 월등히 (p<0.01) 무거웠다 ($223.0{\pm}16.6kg$과 $175.3{\pm}10.3kg$). 혈청내 LH와 FSH는 1두의 교잡종에서 출생시와 3개월령에서 높게 나타난 것을 제외하고는 전빈우의 전월령에서 본 시험에서의 호르몬분석한계수준(LH, $1.5mIU/m\ell$ : FSH, $1.2mIU/m\ell$) 이하였다. 혈청내 prolactin은 다른 월령에서 보다 $5\~8$개월령에서 더욱 높았고 $11\~12$개월령에서는 개체간 차이가 많았다. 혈청내 progesterone은 출생시는 낮았으며 그 후 $6\~8$개월령에서 높았고 8개월령 이후에서 $0.1\~0.2ng/m\ell$으로 다시 감소하였다. 혈청내 estradiol수준은 전빈우의 모든 월령에서 본 시험의 호르몬분석 한계수준$(10pg/m\ell)$ 이하였다. 성성숙동안에 LH, FSH와 estradiol의 수준이 낮았던 원인은 이들 호르몬의 상승을 측정하기에는 너무 채혈간격이 길었던 것으로 추측된다.
혈청내 비타민 E 농도는 부화후 1주된 군과 4주된 군 모두에서 비타민 E를 첨가해 준 II(CE)군과 IV(PE)군이 그렇지 않은 I(C)군과 III(P)군보다 각각 더 높았고, 식이내 비타민 E의 혈중 비타민 E 농도에 대한 반영은 부화후 1주된 군이 부화후 4주된 군보다 더 컸다. 2. 부후화 1주된 군의 경우 실험 3주에 비타민 E를 더 첨가해준 군(II군과IV)에서 PUFA에 의한 혈청 비타민 E 감소효과가 나타났다. 3. 간조직내 비타민 E 농도는 혈청에서와 마찬가지로 부화후 1주된 군과 4주된 군 모두에서 II(CE)군과 IV(PE)군 I(C)군과 III(P)군보다 높았고 (p<0.05), 실험 3주에 부화후 1주된군과 4주된 군에서 비타민 E를 더 참가해 준 경우에 과량의 PUFA에 의한 간조직내 비타민E 농도 감소를 보였다. 4. 실험 3주에 부화후 4주된 군의 뇌조직내 비타민 E 농도가 실험 초기에 비해 증가하는 경향을 보인것 이외에는 식이에 따라 뇌조직내 비타민 E 농도에 큰 변화가 없었고, 모든 실험 군에서 뇌조직의 비타민 E 농도는 혈청과 간조직 내의 비나민 E 농도에 비해 전반적으로 변화가 적으므로 혈청이나 간조직보다는 식이내의 비타민 E의 영향을 적게 받는 것으로 나타났다.
폐츱충(Paragonimus westermani) 감염시 탈낭유충은 숙주내 여러조직을 거친 후 폐에 기생하게 되는데 이때 조직반응과 더불어 혈액내 호산구와 IgE 항체가의 변등이 일어난다. 이 실험에서는 백서에 폐흡충을 감염시키고 혈청내 총 IgE와 특이 IgG 항체값을 시간 경과별로 측정하여 감염후 혈청내 항체가의 변증을 관찰하였다. 폐흡충 퍼낭유충 20개를 백서에 경구 감염시키고 시기별(0,1,2,3,4,0,8주)로 IgE의 변동을 avidin-biotin을 이용하여 효소표식 면역검사법 (enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 측정하였으며 IgG는 통상적인 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. 실험군의 혈청내 총 IgE치는 감염 3주와 3주 후에 흡광도가 각각 0.18±0.042, 0.18±0.081이었으나, 4주에 0.28±0.151로 급격히 중가하었으며 8주까지 지속적인 상승(0,43±0,055)을 보였다. 반면 대조군의 경우 전 실험기간을 통해 0.07∼0.12로 낮은 항체가가 유지되었다. 또한 실험군의 혈청내 IgG 항체는 감염 3주 후에 흡광토 0.20±0,032로 증가하기 시작하여 8주에 0.31±0.067을 보였으나 대조군에 비해 크게 증가되지 않았다. 이상의 결과로 보아 비호적숙주인 백서에서 폐흡충의 감염이 IgE 및 IgG 항체를 증가시킴을 알 수 있었다.
본 연구는 흰쥐의 난소제거로 유발한 골다공증에 대한 흥화씨(Carhamus inctorius L)의 투여 효과를 알아보기 위하여 혈청내 호르몬과 골소주의 변화를 관찰하였다 실험동물은 4개월 령의 흰쥐를 난소절제를 실시하여 골다공증을 유발 시킨 후 실험에 이용하였으며 30일간 격일 간격으로 0.03g/kg의 용량을 투여 하였다. 혈청 내에서 Insulin-like Growth Factors, Insulin-like Growth Factor binding protein-3 (IGFBP-3), Estrogen, Bone-specific alkaline phosphotase, Calcium, and Phospotase를 매 10일 간격으로 측정하였으며 비골의 골간을 채취하여 조직 형태학적인 검사를 실시하였고 체중에 대한 대퇴골 무게를 측정하였다. 홍화씨 투여 10일과 20일에서는 혈청내 IGF-I, IGF-II그리고 IGFBP-3의 변화는 대조군에 비하여 유의성 있는 변화를 관찰할 수 없었으나 홍화씨 투여 30일에 있어서는 IGF-I, IGF-II그리고 IGFBP-3의 변화가 대조군에 비하여 현저히 높은 유의서 있는 변화를 관찰할 수 있었다(p<0.05). Bone alkaline phosphatase(BALP)에 있어서도 홍화씨 투여 30일 에 가장 많은 변화가 있었으나 estrogen과 체중에 대한 대퇴골의 무게에 있어서는 유의성 있는 변화를 관찰하지 못했다. 오히려 이시기에 난소를 절제하지 않는 대조군의 estrogen치가 높게 나타났다. 난소절제로 골다공증을 유발시킨 흰쥐에 있어서 흥화씨의 투여는 혈청내 IGFs, IGFBP-3 and BALP을 높임으로서 골다공증 치료에 효과가 있는 것으로 사료됩니다.
질트리코모나스(Trichomonas vaginalis)감염 환자 30명과 비감염 건강 대조군 30명을 패 상으로 혈청 내 항-질트리코모나스 IgG 및 IgM 항체가를 효소표식 면역검사법(enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 측정하여 이 질환 진단법으로서 ELISA의 이용 가능성을 검토 하고, 현펑 내 IgG 및 IsM 항체가의 상관성을 알아보았다. 질트리코모나스 환자의 혈청 내 IgG 항체가는 0.37±0.134로 건강 대조군의 0.21±0.054 보다 유 의하게 높았다(p<0.005). 또 혈청 내 IgG 항체가 0.32 이상을 양성으로 하였을 때 ELISA 진단법 의 감수성은 70.0%이었고 특이성은 96.7%이었다. 질트리코모나스 환자의 혈청 내 IsM 항체가는 0.33±0.177로 건강 대조군의 0.11±0.051 보다 유의하게 높았다(p<0.005). 또 혈청 내 Is변 항체 가 0.21 이상을 양성 반응으로 하였을 때 감수성은 70.0%이었고 특이성은 96.7%이었다. 질트리코 모나스 환자의 혈청 내 IgG 와 IsM 항체가의 상관 관계는 상관계수 r=0.77로 유의한 상관관계가 인 정 되 었 다(p<0.005). 이상의 결과로 보아 질트리코모나스 환자에서 혈청 내 19G 및 IsM 항체가를 ELISA법으로 측정 함으로써 질트리코모나스 감염을 진단하거나 역학적 조사에 이용할 수 있을 것으로 생각된다.
혈액에서 생물학적 활성을 나타내는 (bioavailable) steroid hormone은 주로 비결합형(free form)과 알부민 결합형(albumin-bound form)으로 구성된다. 특히 Testosterone (T)과 5 alpha-Dihydrotestosterone (DHT)의 활성적 분획이 전체의 T, DHT 양에 비해 생리적 현상과 보다 잘 일치하는 것으로 알려지고 있다. 본 연구는 섬광면역측정법(Luminescence immunoassay, LIA)으로 혈청내 활성적 T 및 DHT의 농도의 측정에 이용하고져 하였다. 항체는 T- 또는 DHT-3-CMO-BSA를 항원으로 토끼에 면역주사하여 얻었다. 추적자는 T-3-CMO, DHT-3-CMO에 aminobutylethylisoluminol(ABEI)를 부착시켜 사용하였다. 항체중 IgG분획을 Protein-A-Sepharose CL-4B로 분리한 후 Immunobead(Bio-Rad)에 부착시켜 Solid-phase LIA를 실시하였다. 본 연구에서 LIA는 정확도(accuracy), 정밀도(precision), 감도(sensitivity), 교차반응도(specificity)등을 조사하고, 기존의 방사면역측정법(RIA)과 비교하여 만족할만한 결과를 얻었다. 혈청내 T및 DHT의 활성적 분획의 농도를 측정한 결과는 다음과 같았다. T의 경우는 남성에서 T의 전체량의 33% 이상으로 $7.1{\pm}1.5nmol/l$, 여성에서는 26% 이상으로 $0.28{\pm}0.05nmol/l$이었다. DHT의 활성적 분획은 남성의 경우 $601.7{\pm}85.8pmol/l$, 여성의경우 $52.4{\pm}19.9\;pmol/l$이었다. 이상의 결과를 보아 본 연구에서 이용된 LIA는 혈청내 활성적 농도를 측정하기에 충분하다고 사료된다. 또한 이 방법을 이용하여 여성의 Androgenicity 및 남성 정소기능등의 제어방법에 응용될 수 있을 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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