가장 효과적인 H-2b 항원에 대한 시험관내 항체 생산 조건을 찾기 위하여 근교계 생쥐인 C57BL/6BySnj의 비장세포를 UV로 불활성학 시킨 후 항원으로 사용하고, A/wySnJ$\times$Sm/J(ASmJF1, hybrid)의 비장세포를 항원 수용자 계통으로 하여 5-7일동안 배양기에서 항체 생산을 유도하였다. 본 실험에서 T 임파구 대식세포와 임파구 분화 촉진 인자인Concanavalin A Lipopolvsaccharide. Pokeweed mitogen 등을 사용하여 20가지 조건으로 실험을 수행하여, 항체 생성 여부는 보체 의존성 세포 장애 실험과 면역 효소법에 의해 조사하였다 그 결과 모든 조건에서 항체생산이 확인되었으며. 가장 좋은 시험관내 항체 생산 조건으로는 T 임파구와 대식세포를 함께 사용하여 면역시킨 것이 가장 효과적이었다. 이 방법을 이용하여 항체 생산을 유도한 후 5일째 면역된 비장세포를 Sp2/0-Ag 14와 세포 융합시켜 H-2b 마우스의 체포 표면 항원에 대한 단일군항체 생산을 시도하였다. 또한 생체내 면역 방법과 비교하기 위해 6주간 C57BL/6BySnJ의 비장세포를 복강내에 주사하여 같은 조건으로 세포융합을 시도하였다. 그 결과 H-2b 세포의 표면 항원에 대한 항체 생산을 하는 세포군은 시험관내 면역 방법에서 3개 생체내 면역 방법에서 4개부 확인되었다.
Herpes simpex virus type 2 (HSV-2) infects the genital and oral mucosae of human and other animals. HSV-2 infection is a widespread health problem causing various clinical syndromes including oral, genital, and ocular lesions, viral encephalitis, and recurrent diseases. Hybridorna cell lines secreting a monoclonal antibody (mAb) against the HSV-2 were produced by fusing spleen cells of HSV-2-immunized mice with Sp2/0-AgI4 myeloma cells. One hybridoma cell line was established and its monoclonal C-2, IgM, recognized the antigens of 134, 86, and 43 kDa in western blot analysis. In SDS-P AGE analysis of HSV -2 antigens, 25 bands were separated between 3D kDa and 159 kDa. In indirect immunofluorescent assay, mAbs exhibited binding to the virus antigen expressed on Vero cell infected with HSV-2.
Purpose: The Helicobacter pylori stool antigen (HpSA) enzyme immunoassay is a non-invasive test for the diagnosis and monitoring of H. pylori infection. But, there are few validation studies on the HpSA test after eradication in children. The aim of this study was to assess the diagnostic accuracy of HpSA enzyme immunoassay for the detection of H. pylori to confirm eradication in children. Methods: From January 2001 to October 2003, 164 tests were performed in 146 children aged 1 to 17.5 years (mean $9.3{\pm}4.3$ years). H. pylori infection was confirmed by endoscopy-based tests (rapid urease test, histology, and culture). All H. pylori infected children were treated with quadruple regimens (Omeprazole, amoxicillin, metronidazole and bismuth subcitrate for 7 days). Stool specimens were collected from all patients for the HpSA enzyme immunoassay (Primier platinum HpSA). The results of HpSA tests were interpreted as positive for $OD{\geq}0.160$, unresolved for $$0.140{\leq_-}OD$$<0.160, and negative for OD<0.140 at 450 nm on spectrophotometer. Results: 1) One hundred thirty-one HpSA tests were performed before treatment. The result of HpSA enzyme immunoassay showed three false positive cases and one false negative case. The sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of HpSA enzyme immunoassay before treatment were 96.4%, 97.1%, 90%, and 99%, respectively. 2) Thirty-three HpSA enzyme immunoassay were performed at least 4 weeks after eradication therapy. The results of HpSA enzyme immunoassay showed two false positive cases and one false negative case. The sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value after treatment were 88.9%, 91.7%, 80%, and 95.7%, respectively. Conclusion: Diagnostic accuracy of the HpSA enzyme immunoassay after eradication therapy was as high as that of the HpSA test before eradication therapy. The HpSA enzyme immunoassay was found to be a useful non-invasive method to confirm H. pylori eradication in children.
Recently, the importance of toxoplasmosis is raised as a complication in immunosuppressed or AIDS patients. Our study focused on the identification of a variety of Toxoplasma antigens by immunoblotting. Rabbits and BALB/c mice were immunized with Toxoplosmo Iysate (RH strain) , frozen tachyzoites (RH strain) or cysts (Beverly and Fukaya strain) . Blood were collected from ear vein, heart or orbital plexus for detecting the serum antibody levels. For excretory-secretory (E.S) antigens, T gondii (RH) tachyzoite were cultured in CHL (Chinese hamster lung) cells with MEM containing of 5% FCS. After 72hrs, culture supernatant was collected. BALB/c mice were inoculated with RH tachyzoite intraperitoneally and peritoneal fluids were extracted three days later. E.S antigens were detected in culture supernatant and infected mouse peritoneal fluid by EITB. Serum IgG levels in rabbit were 1 :512 of 10 days after primary immunization, 1 : 2,048 of 10 days after secondary immunization, 1: 1,024 of 20 days after secondary immunization by IFAT, respectively. Serum IgG levels of immunized mice were 1:128 after 7 weeks. Tachyzoite antigens of the RH strain were detected 25 protein bands ranging 10 kDa-220 kDa of molecular weights with Coomassie blue stain. Toxoplcsma major antigens corresponding to n of 24 kDa, 27 kDa,30 kDa, 35 kDa, 38 kDa were recognized by IgG and IgM antibodies. Excretory-secretory antigens present in culture supernatant with M. W. of 20, 30 kDa and in infected mouse peritoneal fluid with M.W. of 33 (P30), 45 kDa. When RH tachyzoite antigen was probed with different mice sera immunized with 2 strains of T gondii, the IgG antibody bud of Fukaya and Beverly strain (8 week-serum) is identical to those of RH strain. It is considered that the 30 kDa polypeptide detected in excretory- secretory materials and Iysate was important major antigen of T gondii (RH).
Cell surface antigenic relationships between pathogenic mycobacteria have been investigated by the enzyme-linked immunosorbent assay using phenolkilled cells and their rabbits antisera. Homologous and heterologous reactions of Mycobacterium avium-intracellulare antisera before and after homologous and heterologous absorption revealed a close antigenic relationship between strains of the same species and between species if they were members of M. avium(MA)-intracellulare(MI)-scrofulaceum(MG) complex. MAI sera showed a considerable reaction with M. kansasii(MK) and tuberculosis(MTB), but not with the other species. MA(K40004) antiserum reacted with other mycobacteria except few strains of MI and 50~89% of homologous reaction was reduced by heterologous absorption with cells of MI or MS. Intraspecific reaction of MI antisera was natural1y stronger than interspecific reaction and different in extent due to a magnitude of antigenic sharing. Antigenic relationships between N-260D, N-260R, N-260T, and K41014 was somewhat closer than that with N-242D, N-257T, N-28ID, and N-275T. M. nonchromogenicum(MNC) antisera showed a strong interspecific reaction with exception of M. chelonei(MC) and triviale(MTV) to which they reacted weakly or none. Antigenic sharing with M. terrae(MTR) and MG(K30003) was next to intraspecific sharing. NC-3 shared antigens considerably with MA, MC, and M. fortuitum(MF) while NC-11 did not. MTR antisera showed a strong cross-reaction with MI but their homologous reaction was not reduced by MI absorption indicating a paucity of shared antigen of MTR surface. Intraspecific antigenic sharing of course was large with on exception between T-8 and T-13. A considerable amount of antigenic sharing was also found with MNC, MC and MF. Unlike T-8 serum, T-13 antiserum strongly cross-reacted with MA, MG, MK, and MTB. In general, antigenic relationships of mycobacteria, that have been elucidated in this study, well conformed to taxons delineated by the various biological and biochemical means.
기니픽과 New Zealand White Rabbit에서 PDT-Hepa에 대한 항원성 시험을 실시하였다. 1) Active Systemic Anaphylaxis (ASA), 2) Passive Systemic Anaphylaxis (PSA), 3) Passive Custaneous Anaphylaxis (PCA) 시험을 실시한 결과 ASA, PSA 실험에서 anaphylaxis와 관련된 어떠한 특이적인 임상증상도 나타나지 않아 PDT-Hepa는 기니픽과 토끼에서 항원성이 없는 것으로 보인다. 또한 PCA 실험에서 청색반점이 관찰되지 않은 것으로 보아 PDT-Hepa specific IgE는 생성되지 않는 것으로 판단된다.
장관은 우리 몸에서 가장 넓은 표면적을 가지고 있으며, 외부로부터 침입하는 이물에 대항하여 면역세포의 배치가 필수적이다. 항원과 만난 적이 없는 naive lymphocyte는 임파절 등 2차 임파기관의 수지세포(dendritic cell)가 임파구에 항원을 제시할 때 레티노인산(retinoic acid)을 생산하여 제공함으로써, 소장 조직에 특이적으로 임파구가 호밍(homing)하는 능력을 부여한다. 한편, 장에 있어서는 식품항원에 대한 면역반응을 억제할 필요가 있는데, RA는 T세포의 기능분화를 억제하여 면역관용의 성립에도 관여함이 밝혀졌다.
Proceedings of the Korean Information Science Society Conference
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2003.10b
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pp.766-768
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2003
인간 및 다른 생물들의 DNA 서열이 밝혀짐에 따라 DNA 서열 정보를 이용할 수 있는 계산적 처리방식에 대한 요구가 늘어나고 있다. 본 논문에서는 DNA의 패턴을 분류할 수 있는 면역계 부정 선택에 기반한 알고리즘을 제안한다. 부정 선택은 면역세포 생성시 자신을 인식하지 않는 항원 인식부를 생성하기 위한 과정이다. 이 항원 인식부를 통해 자기와 비자기를 구별한다. 이것을 n개의 자기 또는 비자기 집단으로 확장하고 n개의 항원 집단을 구성하면 n개의 패턴 분류가 가능하다. 본 논문에서는 부정 선택에 기반한 DNA 염기 레벨에서의 패턴 분류방법과 아미노산 레벨에서의 패턴분류 방법을 제안한다.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.49
no.5
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pp.271-274
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2013
구제역 방역정책은 국가적으로 운영되어야하고 백신의 사용도 정부 통제하에 사용되어야 한다. 만약 백신생산시 강한 병원성을 지닌 구제역바이러스가 항원으로 사용된다면 적절한 생물안전절차를 수행할 수 있는 생산시설에서 실시되어야 한다. 일반적으로 백신접종은 구제역이 유행되는 지역이나 나라에서 사용된다. 구제역 청정국은 백신접종은 하지 않으나 엄격한 이동제한과 살처분 조치를 취한다. 그럼에도 많은 청정국가가 불활화 항원을 비축하여 필요시 사용하는 전략으로 긴급백신 접종을 선택할 수 있다. 우리나라의 경우도 전국을 대상으로 백신접종을 실시하는 정책을 2011년 1월 이후 시행되고 있고, 이에 따라 구제역 백신의 국내에서 생산을 준비하고 있다. 구제역 백신의 생산과 관리는 주변지역에서 유행하거나 유행되었던 바이러스형에 대한 항원 개발과 원활한 백신의 공급을 통해 우리나라에서 구제역을 근절하고 재유입을 예방하는 데 매우 중요한 요소가 될 것이다. 본 글에서는 백신에 사용되는 종독주, 항원의 생산 및 관리에 대한 세계적인 기준으로 사용되고 있는 세계동물보건기구 (OIE)에서 권고되는 백신에 대한 관리 사항을 알아보고자 하였다.
Jin, Hye Jeong;Lee, Jihoo;Lee, In Seoung;Kim, Hak Yong
Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2015.05a
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pp.227-228
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2015
질병 치료에 대한 패러다임이 과거 치료 위주에서 조기진단 및 예방의 개념으로 전환되고 있으며 진단용 마커와 단클론 항체 제작은 핵심 기술로 부각되고 있다. 현재까지의 항원결정부위(epitope) 예측은 단백질의 1차구조인 아미노산 배열 순서를 바탕으로 추출되어 진다. 하지만 항원결정부위는 수용성의 항체와 직접 결합하기 때문에 친수성 잔기가 차지하는 비율이 높아야 하며, 면역계가 쉽게 인지할 수 있도록 노출되어 있어야하고, 긴 선상의 폴리펩티드 단백질이 3차원 구조를 형성하기 위해 회전, 유연성 등이 요구된다. 따라서 한 가지 성질 중심으로 할 경우 오류가 나올 가능성이 있다. 이를 보완하기 위하여 본 연구에서는 친수성(hydrophilicity), 극성(polarity), 파묻힘성(buried residues), 접근성(accessibility), 회전성(${\beta}-turns$), 유연성(flexibility), 굴절성(refractivity) 등을 분석한 후 통합 예측시스템을 개발하였다. 이를 검증하기 위해 고양이 백혈병 바이러스의 항원결정부위를 예측해보았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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