본 연구는 지각과민처치제에 항균 물질을 첨가하여 항균실험 및 지각과민처치제의 세포독성실험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 항균실험에서는 Micro Prime은 항균 약물의 농도가 높을수록 항균력도 높게 나타나 각 그룹간의 항균 범위는 통계적인 유의차를 나타내었다(p<0.05). Hurri Seal에서는 gallic acid 항균 약물 농도가 높을수록 항균력이 높게 나타났지만(p<0.05), tetracycline을 함유한 desensitizer에서는 농도가 높을수록 항균효과는 떨어지는 것으로 나타났다(p<0.05). 또한 chlorhexidine과 cetylpyridinium chloride에서는 대조군에서만 차이를 나타내고(p<0.05), 각 실험군에서 차이를 나타내지 않았다. 세포독성도를 평가한 결과 Micro Prime은 미약한 세포독성을 나타냈으며, Hurri Sea은 심한 세포독성을 나타냈다. 이상의 연구결과로 지각과민처치제에 항균물질을 첨가할 경우 우수한 항균력이 나타났기 때문에 지각과민 환자의 동통을 줄여 줄 것으로 사료되며 항균성을 가진 지각과민처치제로 사용이 가능할 것으로 판단된다.
B. subtilis cx1이 생산하는 박테리오신(BSCX1)을 부분 정제하고 특성을 규명하였다. BSCX1은 pH 안정성 실험에서 pH 2.5~9.5 구간에서도 안정되게 항균활성을 유지하였다. 각종 효소에 대한 안정성 실험에서는 protease, trypsin, proteinase K, 그리고 carboxypeptidase로 처리하였을 때는 완전히 항균활성이 사라졌고, $\alpha$-amylase, lipase, aminopeptidase는 항균활성에 영향을 미치지 못하였다. 이상의 결과로 본 항균물질이 단백질계열의 물질이며 당이나 지질 결합은 항균활성에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 추정되었다. 그러나 열에는 불안정하여 $60^{\circ}C$이상에서는 15분 안에 완전히 그 항균활성을 상실하였으며 $50^{\circ}C$ 에서는 15분만에 역가의 50%가 실활 되었다. 이에 반하여 저온에서는 무척 안정하여 $-20^{\circ}C$와 $-70^{\circ}C$에서 수개월간 보관하여도 여전히 항균활성을 그대로 유지하였다. Tricin-SDS-PAGE를 통하여 BSCX1의 분자량은 약 9,500 dalton으로 확인되었ekl. BSCX1은 pH2.5에서 9.5에 이르는 넓은 pH 영역에서 그 활성을 유지하므로, 기존에 개발된 nisin이나 유산균 유래의 항균물질이 pH 안정성이 떨어진다는 단점을 보완할 수 있는 생물학적 식품보존제로서의 개발 가능성을 높이 시사하였다.
이 연구는 분리된 토양 세균에 의해 생성된 항균물질의 효과를 평가하기 위해 수행되었다. 2000여개의 세균 분리주 중 Paenibacillus elgii DS381이 여러 인간 피부 상재균과 병원성 세균에 대해 높은 항균활성을 나타내었다. DS381 균주는 agar well diffusion test에서 모든 대상 세균과 효모에 대해 15.3~26.0 mm 직경의 저해대를 형성하였다. DS381이 생성한 항균 펩티드는 모든 대상 미생물에 낮은 최소저해농도 (0.039-5.000 mg/ml)를 나타내었다. DS381 균주는 lipopeptide 같은 생물계면활성제 생산을 나타내었는데, 배양 상등액의 표면장력을 60.0에서 40.3 mN/m으로 낮추었다. DS381은 또한 $1.56{\pm}0.13U/ml$의 chitinase 활성도 나타내었다. 이 결과들은 P. elgii DS381이 일부 중요한 인간 피부 상재균과 병원성 세균에 대한 효율적인 생물제어제로 사용될 수 있음을 가리킨다.
석유에테르, 80% 에탄올 및 물로 추출하여 얻은 204개의 추출물 각각에 대해서 8종류의 곰팡이에 대한 항균활성을 검색하였다. 그 결과 Abortiporus DGU-L6 버섯의 석유에테르 추출물은 Microsporum gypseum균에 대하여 항균활성을 나타내었고, Cortinarius DGU-L51 버섯의 알콜추출물에서는 A. niger, Marasminus DGU-L67 버섯의 알콜 추출물 및 물 추출물에서는 A. niger(KCTC 2118)과 A. versicolor(KCTC 2120) 균에 대해서 항균활성을 나타내었다. 그리고 Hetero DGU-L25 버섯의 석유에테르 추출물은 8종류의 곰팡이에 대해서 모두 항균활성을 나타내었고, 이중 특히 모창을 유발하는 균에 대해서는 40 mg/ml의 아주 낮은 최소억제농도 값을 나타내었다.
53종의 한국산 야생버섯 중 12종의 버섯으로부터 석유에테르, 80% 에탄올 및 증류수로 추출하여 얻은 14개의 추출물이 6종의 그람양성균에 대하여 각각 선택적으로 항균활성을 나타내었다. 3 종류의 추출용매 중 에탄올 추출물에 대부분의 항균활성이 존재하였으며, 특히 Thylopilus PS-5, Pulveroboletus PS-7 및 Russula PS-9의 추출물들은 다른 종의 버섯에 비교하여 항균활성의 선택성이 다양하였다. Pulveroboletus PS-7과 Boletus PS-8의 에탄올 추출물은 B. subtilis에 대하여 $300\;{\mu}g/ml$, Trichaptium PS-3의 에탄올 추출물은 M. luteus에 대하여 $500\;{\mu}g/ml$를 나타내었으며, 이외의 추출물은 모두 $1000\;{\mu}g/ml$ 이상의 비교적 큰 값의 MIC를 나타냄으로써 향후 좀 더 정제단계를 거쳐 이상의 버섯 중의 항균활성 물질의 구명을 위한 연구를 시도할 필요가 요구된다.
최근 발효식품의 건강학적 활용면에 관한 연구는 활발히 진행되고 있다. 또한 발효식품 중에 가장 중요한 간장 발효미생물의 건강제품의 활용에 대해서 많은 연구가 진행되었다. 재래식 간장에 관한 연구결과로 항암작용, 노화지연, 호르몬 분비 촉진 등이 보고되고 있으나, 구강질환 원인균에 대한 방제효과가 있는가에 관한 연구는 거의 이루어지지 않고 있는 실정이다. 본 연구는 치아우식 등 구강질환 원인균인 Streptococcus sanguis, S. salivarius, S. mutans들의 성장을 억제하는 방제균을 선발하고 이들을 동정하기 위해 시행되었다. 우선 25종의 간장발효 균주를 분리하였고, 그 중 구강질환 방제력이 높은 2 균주(NG 06, NG 16)를 선별하였다. Bergey's manual of systematic bacteriology의 세균분류동정표에 의해 각종 동정에 필요한 배양학적, 형태학적, 생화학적 특성을 시험한 결과와 $Biolog^{(R)}$사의 세균동정시스템(MicroLogTM 3)을 이용하여 검정 실험한 결과 NG 06은 Bacillus racemilacticus로 NG 16은 Bacillus amyloliquefaciens으로 최종 확인, 동정되었다(Table 3). 앞으로 이 균들이 생산해내는 항균물질의 길항 기작에 관한 연구와 그 효능을 검증하고자 하며 그 항균물질 효과생산 최적조건에 대한 연구를 수행할 계획이다. 나아가 세치제 및 구강위생용품으로 활용면에 관한 연구를 확대하고자 한다.
매실박 메탄을 추출물의 항균력을 조사한 결과, $500{\mu}g/mL$ 이상의 농도에서 뚜렷한 항균활성을 보였고, 광역의 변패성 미생물들에 대하여 항균활성을 나타내었다. 또한, 매실박 메탄올추출물의 항균물질은 높은 온도$(100^{\circ}C)$에서 30분 동안 안정하였으며, 넓은 범위의 pH(3-11)에서 안정성을 나타냈다. 따라서 매실박 메탄올 추출물의 항균물질은 항균활성이 높고, 항균s spectrum이 광범위할 뿐 아니라, 높은 온도 및 넓은 범위의 pH에 안정하여 이상적인 천연 항균제로서의 개발가능성을 제시하였다. 아울러, 매실박 메탄올 추출물의 주요 항균작용은 세포막 perturbation에 기인한 것으로 생각되었다.
박테리오신은 미생물이 생산하는 단백질성의 항균물질이다. 본 연구에서는 Enterococcus faecium CJNU 2008 균주로부터 생산되는 박테리오신에 대한 일부 특성을 규명하였다. 부분 정제 박테리오신은 열처리($100^{\circ}C$ 30분, $121^{\circ}C$ 15분) 및 유기용매(메탄올, 에탄올, 아세톤, 아세토니트릴, 클로로포름)에 대한 안정성이 우수하였으며 효소처리의 경우 Lipase와 ${\alpha}-amylase$에 대해서는 안정하였으나 Protease 처리에서 활성이 소실되었다. 이는 E. faecium CJNU 2008균주가 생산하는 항균물질이 단백질성의 박테리오신임을 추가적으로 증명하는 것이다. 병원성 세균인 Listeria monocytogenes 균주를 지시균으로 사용했을 때 박테리오신은 살균(bactericidal)의 작용양상을 보였다. Tricine-SDS-PAGE를 이용한 박테리오신의 분자량은 6.5 kDa 이하로 확인되었다. 부분 정제된 박테리오신을 이용하여 HPLC법을 활용한 정제를 수행하였으며 크로마토그램 상에서 단일 피크를 얻었을 수 있었다. 앞으로 정제된 박테리오신은 생화학적 분석 등에 활용할 계획이다.
In the present study, we investigated the neutralization activity of various antimicrobials against lipopolysaccharide (LPS) as well as interaction between two antimicrobials (enrofioxacin and coilstin) using checkerboard method. The neutralization activity of antimicrobials used in the test was assayed by means of LAL chromogenic test after reaction of LPS with colistin, enorfioxacin, ampicillin, polymyxin B, oxytetracycline, streptomycin, and erythromycin. As the results, the neutralization activity of coltstin and polymixin B had a more stronger than that of tested other antimicrobials. In bacterial culture broth, the best neutralization activity of the antibiotics was also shown to coltstin and polymixin B. Meanwhile, It was shown to have synergism between enorfloxacin and coltstin on the basts of FIC (fractional inhibition concentration). The FIC of enorfioxacin-colistin combinations was 0.50-1.03 to Staphylococcus aureus R-209, 1.03-1.06 to Salmonella typhimurium, 0.75-1.25 to Bordetella Bronchtseptica and 1.02-1.25 to E. coli K88ab. On the basts of the above results, the present study may be of clinical usefulness in the choice of an antibiotic therapy for severe sepsts in animals.
4차 암모늄(QACs)은 주로 항균물질로 사용되는 것들 중의 하나이다. 항균성을 가진 고분자 물질들은 주로 생의학적인 도구들로써 사용된다, 본 연구에서는 새로운 특수 콘택트렌즈를 제조하기 위해 4차 암모늄 작용기 부분을 포함하는 새로운 메타아크릴레이트(Methacrylate) 물질을 합성하여 콘택트렌즈를 제조하였으며, S. aureus, E. coli and P. aeruginosa. 각각의 균에 대한 항균성을 조사하였다. 그 결과 합성된 콘택트렌즈 재료는 모든 균에 대하여 4차 암모늄을 포함하고 있지 않은 고분자에 대해 훨씬 더 높은 항균성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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