This study was aimed to find out the influence of long-term fertilization for 21 years on soil enzyme activities in the silty clay loam textured normal paddy soil. Total urease activity (TUA) and the microbial urease activity (MUA) were shown to be changed significantly, but the accumulated urease activity (AUA) was similar within trial plots. Especially the MUA of the plots annually applied N.P.K. fertilizers with compost and N.P.K. fertilizers with silicate fertilizer were the highest among plots. The total L-glutaminase activity (TGA) and the accumulated L-glutaminase activity(AGA) were changed significantly among trial plots, but the microbial L-glutaminase activity (MGA) was not. By the simple correlation analysis, it was shown that the TGA and the AGA correlated highly significant to available phosphorus available $SiO_2$ content and pH. Addition of the toluene to the incubation mixture did not markedly affect the activity of phosphatase, but the difference of phosphatase activity among plots was significant. By the simple correlation analysis, it was shown that the phosphatase activity ; correlated highly significant to pH, available $SiO_2$, available phosphorus and exchangeable calcium in soils.
The effect of methyl tert-butyl ether (MTBE) and its metabolites like tert-butyl alcohol (TBA), and formaldehyde (FA) on microbial activity and diversity in tidal mud flat was studied. MTBE, TBA, and FA with different concentrations were added into microcosms containing tidal mud samples, and placed at room temperature for 30 days. Then the physico-chemical properties such as pH, moisture contents and organic matter contents in the microcosms were measured. In addition, the total viable cell number and dehydrogenase activity were measured. Bacterial communities in the microcosms were monitored using a 16S rRNA-PCR-DGGE (Denaturing gradient gel electrophoresis) fingerprinting method. As a result, the exposure concentrations of MTBE and its metabolites showed no correlation with the physico-chemical factors (P>0.05). Dehydrogenase activity and total viable cell number were decreased with increasing MTBE, TBA and FA concentrations (P<0.05). The toxic effect was higher the following order: FA > MTBE > TBA. Dominant species in the microcosms contaminated with MTBE and its metabolites were Sphingobacteria, Flavobacteria, delta-proteobacteria, gamma-proteobacteria. The diversity of bacterial community was not significantly influenced by MTBE and its metabolites.
Lee, Sang-Woo;Ham, Sun Nyeoo;Shin, Taek-Soo;Kim, Hye-Kyung;Yeon, Ik-Jun;Kim, Kawng-Yul
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.31
no.1
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pp.35-41
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2009
This study was conducted to investigate feasibility of feedstuff for animal using food waste by fermentation mechanism of indigenous microorganism. To achieve this purpose, indigenous bacteria was isolated from soils to use as an inoculant. Enzyme test was performed to verify activity of amylase, protease and lipase using isolated bacteria. Bacteria(H1, D1), which vigorously express the enzyme activity, was selected and used in the fermentation experiments of food waste. From the analysis of 16s rDNA sequencing, H1 and D1 were identified as Bacillus subtilis and Paenibacillus polymyxa, respectively. In the fermentation experiment, food waste was mixed with rice bran and popped rice to control moisture and nutrient content. Isolated bacteria(B. subtilis and P. polymyxa) was used as an inoculant. From the measured data such as temperature, pH and ORP, it can be verified that food waste adding the indigenous bacteria was effectively fermented. From the nutritional analysis of manufactured feedstuff, it showed that the contents of crude protein, crude fat and crude fiber were enough to use as feedstuff for animal. In addition, harmful components such as Pb, Hg, Cd, aflatoxin and salmonella concentration were not exceeded permitted standards. Therefore, fermented food waste using indigenous bacteria can be used as feedstuff.
Hyporheic zone is an area where hydraulic exchanges occur between surface water and ground water. Such transient area is anticipated to facilitate diverse biogeochemical reactions by providing habitats for various microorganism. However, only a few data are available about microbial properties in hyporheic zone, which would be important in better understanding of biogeochemical reactions in whole streams. The study site is Naesung stream, located in the north Kyoung-Sang Province, of which sediment is sandy with little anthropogenic impacts. Soil samples were collected from a transect placed perpendicular to stream flow. The transect includes upland fringe area dominated by Phragmites japonica, bare soil, and soil adjacent to water. In addition, soil samples were also collected from downwelling and upwelling areas in hyporheic zone within the main channel. Soils were collected from 3 depth in each area, and water content, pH, and DOC were measured. Various microbial properties including extracellular enzyme activities ($\beta$-glucosidase, N-acetylglucosaminidase, phosphatase and arylsulfatase), and microbial community structure using T-RFLP were also determined. The results exhibited a positive correlation between water content and DOC, and between extracellular enzyme activities and DOC. Distinctive patterns were observed in soils adjacent to water and hyporheic zone compared with other soils. Overall results of study provided basic information about microbial properties of hyporheic zone, which appeared to be discernable from other locations in the stream corridor.
Soil management for environment-friendly agriculture depends on the effects of soil microbial activities and soil fertility. To improve soil health for the upland crops, this study evaluated a relationship between soil chemical properties and soil microbial diversities at 25 sites in upland soils in Gyeongnam Province. The average nutrients in the upland soils were 1.7 times for available phosphorous, 1.4 times for exchangeable potassium and 1.5 times for exchangeable calcium higher compared to recommend concentrations in the upland soils. We found a significant positive correlation between the soil organic matter and the soil microbial biomass C (p<0.01). Contents of organic matter and dehydrogenase in the inclined piedmont soils were significantly higher than those in the other topographical soils (p<0.05). In addition, concentrations of organic matter and microbial biomass C in the loam soils were significantly higher than in the silt loam soils (p<0.05). In principal component analyses of chemical properties and microbial populations in the upland soils, our findings suggested that available phosphorous should be considered as potential factor responsible for the clear upland soils differentiation. The soil organic matter was positive correlation with Bacillus sp. and fungi, whereas soil pH was also positive correlation with Pseudomonas sp. in upland soils.
The present study was aimed to evaluate the soil microbial communities by fatty acid methyl ester (FAME) method in paddy soils at 20 sites in Gyeongnam Province. The soil microbial biomass carbon content of fan and valley $1,266mg\;kg^{-1}$ was higher than alluvial plain $578mg\;kg^{-1}$ (p<0.05). In addition, The dehydrogenase activity of fan and valley $204{\mu}g\;TPF\;g^{-1}\;24h^{-1}$ was higher than alluvial plain $93{\mu}g\;TPF\;g^{-1}\;24h^{-1}$ (p<0.05). The communities of total bacteria and Gram-negative bacteria in the fan and valley paddy soils were significantly higher than those in the alluvial plain paddy soils (p<0.05). Total bacteria communities should be considered as a potential responsible factor for the obvious microbial community differentiation that was observed between the fan and valley and alluvial plain in paddy soils.
You Dong-Ju;Park Jung-Ha;You Kyung-Ok;Nam Soo-Wan;Kim Kwang-Hyeon;Kim Byung-Woo;Kwon Hyun-Ju
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.34
no.3
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pp.278-287
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2006
Cycloinulooligosaccharide fructanotransferase (CFTase) converts inulin into cycloinulooligosaccharides (cyclofructan, CF) of ${\beta}-(2{\to}1)$-linked D-fructofuranose as well as hydrolysis of cyclofructan. Sequences analysis indicated that CFTase was divided into five distinct regions containing three repeated sequences (R1, R3, and R4) at the N-terminus and C-terminus. Each domain function was investigated by comparison of wild type CFTase enzyme (CFT148) and deletion mutant proteins (CFT108: R1 and R3 deletion; CFT130: R4 deletion; and CFT88: R1, R3, and R4 deletion) of CFTase. The CFT108 mutant had both CFTase and CF hydrolyzing activity as CFT148 did. CFTase activities and CF hydrolysing activities were disappeared in CFT130 and CFT88 mutants. These results indicated that the C-terminal R4 region of P. polymyxa CFTase is necessary for cyclization and hydrolyzing activity.
A keratinolytic protease was purified from the culture medium of Pseudomonas sp. KP-364 by use of an assay of the hydrolysis of feather keratin. Membrane ultrafiltration and DEAE-cellulose ion-exchange resin and Sephadex G-150 gel chromatographies were used to purify the enzyme. The specific activity of the purified keratinolytic protease relative to that in the original medium was approximately 72-fold high. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and Sephadex G-150 chromatography indicated that the purified keratinolytic protease is monomeric and has a molecular weight of 36 kDa. The optimal pH and temperature of the keratinolytic protease activity were 6.6 and 37 C, respectively, and the keratinolytic protease was relatively stable at pH value from 3.0 to 10.0 at 37 C for 1hour. The keratinolytic protease was inhibited by EDTA and EGTA, indicating that the keratinolytic protease was a kind of metalloprotease that require Li+ for cofactor.
Several microorganisms (esterase-producing group) were isolated by the solid selective media containing-naphtylacetate. Among them, strain 366M-9 having a high activity of cephalosporin-C deacetylase (CAH; EC 3.1.1.41) was selected. The strain 366M-9 was identified as Bacillus sphaericus on the basis of morphological, physiological, and biochemical characteristics. The production of CAH reached at maximum value after 32 hrs, when cultivated in the optimal medium containing dextrin 2.5%, peptone 2.5%, sodium chloride 0.5%, dipotassium phosphate 0.25%, ferrous sulfate 0.02%, and 7-ACA 0.1% at $30^{\circ}C$ with initial pH 6.0. The CAH was purified by 3 steps with ammonium sulfate precipitation, adsorption chromatography on hydroxyapatite column, and Sephadex G-200 gel chromatography. The final enzyme preparation was homogeneous as judged by the analysis of SDS-PAGE and HPLC. Optimum temperature and pH for CAH activity were $50{\circ}C$ and around 7.0, respectively. And the enzyme was stable at pH 6.0~8.0, up to $50^{\circ}C$. The Michaelis-Menten constants ($K_{m}$ ), $V_{max}$ were 0.87 mM and 1.22 unit/ml, respectively.
The optimum conditions for the production of xylanase from Bacillus agaradhaerens DK-2386 have been previously investigated. In this study xylanase was purified by ammonium sulfate precipitation and CM-sepharose ion exchange chromatography. The molecular mass of the xylanase as determined by SDS-PAGE was 23 kDa in a form of monomeric enzyme. The optimum pH and temperature for xylanase activity was 6.0 and $60^{\circ}C$, respectively. Xylanase activity was increased by the addition of EDTA and then stabilized at $40^{\circ}C$ for 24 h. The maximum xylanase activity was obtained when Birchwood xylan was used as a substrate and the $V_{max}$ and $K_m$ were $49,724{\mu}mol/min$ and 6.08 mg/ml, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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