대표적인 azo계 반응성 염료인 Remazol Black B에 대한 탈색능이 우수한 신규 백색부후균인 Phanerochaete sp. EJ-31L의 탈색 특성을 평가해 보았다. 보조 탄소원 농도, 질소원, pH 등의 배양조건이 염료 탈색율에 미치는 영향을 분석한 결과, 3%(w/v)의 sucrore, 0.05%(w/v)의 $(NH_4)_2SO_4$를 첨가한 배지에서 pH 6.5의 조건에서 탈색능이 우수하였다. 혐기적 조건에서는 호기적 조건 대비 27% 수준의 탈색 효율을 보였으며, 진탕배양에서의 탈색율이 정치배양 대비 2배이상 높아 Phanerochaete sp. EJ-31L은 호기적 조건에서 탈색능이 우수함을 알 수 있었다. 초기 Remazol Black B 농도 50 ppm에 대한 회분식 처리시 약 95% 이상의 탈색율을 보여 향후 azo계 염료 처리용 생물공정에 백색부후균인 Phanerochaete sp. EJ-31L을 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
여러가지 난분해성 물질에 대한 생분해능을 지닌 백색부후균에 의한 매립지 침출수의 탈색을 조사하였다. 국내에서 분리한 Coriolus versicolor KR-11W와 Irpex lacteus KR-39W가 이제까지 주로 연구되어 온 Phanerochaete chrysosporium보다 높은 탈색능을 나타내었는데 I. lacteus KR-39W는 산소공급시 10%의 침출수가 함유된 YMG 배지의 진탕배양에서 85%의 색도제거율을 나타내었으며 최소배지에서도 80%의 탈색율을 보였다. P. chrysosporium에 의한 리그닌 분해능 및 분해효소 생성 보고들과 달리 진탕배양이 정치배양보다 탈색능이 높았으며 산소공급은 색도제거에 증가효과가 있었다. 균체 접종량(10-30%)과 온도(25,37.deg. C)는 탈색에 큰 차이를 보이지 않았으나 탄소원과 질소원의 농도는 상당한 영향을 나타내었다. 리그닌 분해효소군의 여러 가지 inducer와 cofactor를 C. versicolor KR-11W 배양에 첨가한 결과 많은 경우 균접종 대조군보다 2배 이상의 탈색율과 lignin peroxidase 활성의 증가를 보였으며 FeS $O_{5}$ 첨가시에는 최대 2.9배의 증가를 나타내었다. 탈색에 관여하는 효소군은 접종물에 이미 어느 정도 존재할 수 있으며 배지 및 배양조건에 따라 그 생성이 변화할 수 있으므로 이런 조건들을 잘 맞출 경우 보다 높은 탈색능이 기대된다.
높은 laccase 활성을 보유한 큰느타리 수확 후 배지추출물(SMSE)은 bromophenol blue과 remazol brillient blue R염료에서 각각 93.7%와 88.7%의 높은 탈색효과를 나타내었다. 그 외의 Congo red는 72.13%을 보인 반면에 다른 염료는 60% 내의 탈색효과를 나타내었다. 특히 직물염색에 사용되는 Rit (red)와 Rit (blue)는 51.6%와 30.4%의 비교적 낮은 탈색율을 보였으며 Methylen blue 염료는 탈색률이 검출되지 않았다. 염료는 $20{\sim}30^{\circ}C$의 온도에서 가장 높은 탈색률을 보였고, $50^{\circ}C$까지 높은 염료 탈색효과를 보였다. 시간에 따른 염료 탈색효과 실험에서 bromophenol blue와 remazol brillient blue R은 SMSE 처리 1시간 후에 반응이 나타나기 시작하여 12시간 후에는 80% 이상의 높은 탈색율을 보였으나 다른 염료들은 탈색 정도가 서서히 증가되어 24시간 후 최고 60%의 탈색율을 보였다. 큰느타리 SMSE는 섬유공장으로부터 수집한 산업 폐 염료의 탈색효과를 나타내어 환경친화적인 염료탈색의 산업적 이용성을 제시하였다.
본 연구에서는 천연 오일인 시벅턴 오일의 천연 자외선 흡수제로의 사용 가능성을 알아보기 위하여 시벅턴 원유에 대한 흡착 탈색공정을 수행하고, 이를 CCD-RSM (central composite design model-response surface methodology)을 이용하여 최적화하였다. CCD-RSM의 반응치로는 탈색과정의 탈색효과, 탈색 후 정제유의 산가 및 290 nm에서의 자외선흡광도로 설정하였으며, 독립변수로는 탈색제의 첨가량, 탈색온도, 탈색시간으로 설정하였다. CCD-RSM에 의한 통계학적 최적화 결과와 수학적 최적화 결과를 비교한 결과 3가지 반응치를 동시에 만족하는 최적조건으로 탈색제의 첨가량(4.32 wt.%), 탈색온도(134.9 ℃) 및 탈색시간(19.8 min)으로 나타났다. 이 최적 조건하에서 예측된 반응치 중 탈색과정의 탈색효과는 94.78%, 탈색 후 정제유의 산가는 2.08 mg/g KOH, 그리고 290 nm에서의 자외선 흡광도는 2.91로 나타났으며, 오차율은 2% 이하로 낮게 나타났다. 따라서 CCD-RSM을 시벅턴 원유의 흡착 탈색공정에 적용할 경우 매우 높은 수준의 만족하는 결과를 얻을 수 있음을 확인하였으며 천연 식물성 오일인 시벅턴 오일을 천연 자외선 흡수제로서 사용 가능함을 확인하였다.
황산암모늄분획침전, CM-cellulose, DEAE-cellulose 이온교환크로마토그라피를 이용하여 감자에서 2종의 lipoxygenase isoenzymes(LOX-1, LOX-2)을 분리, 정제하여 isoenzyme 각각의 베타-카로텐에 대한 탈색능을 실험하였다. LOX-1, LOX-2는 linoleic acid 존재하에서 베타-카로텐에 대해 탈색효과를 나타냈으며 탈색효과는 공역산의 감소와 더불어 일어났다. 베타-카로텐 탈색시 공역산의 감소는 LOX-2에 비해 LOX-1이 더 컸으나 탈색효과는 LOX-2가 더 높았다.
곰팡중에서 melanoidin의 탈색력이 있는 Aspergillus awamori, B-2을 선별하여 탈색력을 실험하였다. Aspergillus awamori, B-2는 3.0% glucose, 0.5% yeast extract, 0.1% $KH_2PO_4$, 및 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$을 함유하는 melanoidin 용액(pH 7.0) 에서 5일 동안 $37^{\circ}C$에서 배양했을때 가장 높은 탈색력을 나타내었다. 탈색력을 효과적으로 하기 위하여 Ca-alginate로 고정화하여 최적조건에서 계속적으로 탈색하였을때 mycelia 단독보다는 더욱 효과적이었다. Melanoidin 탈색력은 최적 조건에서 10일 동안 반응하였을때 약 70%을 나타내었다. 고정 화한 mycelia의 재사용에 의한 계속적인 탈색을 시도하였던바 15일 동안 연속적으로 반응시켜도 약 60-70%의 탈색력을 계속 유지하였다.
담자균류 백색부후균의 일종인 흰구름버섯(Coriolus hirsutus)을 실험균주로 하여 수종의 난분해성 방향족염료의 분해능을 측정하였다. 사용된 4종류의 염료 중, triphenyl methane 염료인 bromophenol blue가 탈색율 95% 이상으로 가장 잘 탈색되었으며, Congo red와 Poly R-478은 이보다는 낮은 57%, 55%가 탈색되었다. 그러나, heterocyclic 염료인 methylene blue는 본 균주에 의해 거의 탈색되지 않았으며, UV-visible spectrum상에서의 심색성 이동만 관찰되었다. 세포외 laccase와 peroxidase의 활성은 각 염료의 탈색율과 비례하여 나타났으며, 최대 활성 또한 최대 탈색시기에 관찰되었다. 효소의 활성 염색시 모든 염료의 탈색배지에서 공통적인 laccase와 peroxidase의 활성 띠가 관찰되었다. 이러한 결과로 볼 때, 세포외 laccase와 peroxidase가 난분해성 염료의 탈색에 중요한 역할을 할 것으로 판단된다.
Triphenylmethane계 염료 탈색균인 E. cloacae MG 82를 이용한 crystal violet의 탈색 특성을 조사하였다. 배지내의 용존산소의 양이 많을수록 crystal violet의 탈색과 E. cloacae MG82의 균생장이 좋았다. 균생장 중기의 세포 군에서 crystal violet의 탈색능이 가장 활발하였고 염료의 농도가 높아짐에 따라 균생장과 탈색능이 억제되었으며, 균생장이 가능한 crystal violet의 최고 농도치는 375 $\mu$M이었다. E. cloacae MG82는 crystal violet을 유일한 탄소원으로 이용할 수 없었고, 균생장 및 염료의 탈색에 또 다른 에너지원을 필요로 하였다.
염색가공 폐액중의 반응성 염료에 대한 탈색효과를 검토하기 위하여 산화력이 강한 오존을 사용하여 염료의 농도, 처리용액의 pH, 처리용액의 온도조건 등을 변화시켜 가며 오존의 농도와 피로시간에 대한 염료의 탈색과정에 대하여 연구하였다. 오존의 처리 능력은 염료 폐액의 농도가 높아지면 그만큼 오존이 많이 필요하게 되므로 처리 속도도 떨어졌다. 반응성 염료의 탈색 속도는 진한 색상인 blue가 제일 늦었으며 옅은 색상일수록 빠르게 탈색이 진행되었다. 오존의 처리 시간이 경과함에 따라 반응성 염료의 색상은 중간색을 거쳐 무색으로 변하여 색상이 파괴됨을 보였다. 반응성 염료는 색상에 따라 약간의 차이는 있지만 알칼리 영역에서보다는 산성영역에서 더 빠르게 탈색이 진행되었다. 오존처리 온도가 낮을수록 탈색속도가 빠르게 나타났지만 그 차이는 적었다.
Azo계 염색 폐수 처리에 활용되었던 활성 슬러지의 미생물 군집체로부터 diazo계 반응성 염료인 Reactive Black 5를 유일 탄소원으로 성장할 수 있는 Comamonas sp. AEBL-85를 분리ㆍ동정하고, Comamonas sp. AEBL-85를 이용한 Reactive Slacks에 대한 회분식 탈색 특성을 평가하였다. 염료탈색 반응 효율 향상을 위해 보조 탄소원 및 질소원 첨가하고, pH, 온도 등의 분해조건이 탈색율에 미치는 영향을 분석한 결과, 3% (w/v)의 포도당, 0.5% (w/v)의 yeast extract를 첨가한 MSM에서 pH 6.0, 온도 35$^{\circ}C$의 조건에서 탈색효율이 가장 높았다. 초기농도 50 mg/l의 Reactive Black 5에 대하여 40시간의 회분식 탈색반응을 통해 약 95% 이상의 탈색율을 얻을 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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