• 분석과학
• /
• 제9권1호
• /
• pp.52-61
• /
• 1996

식품 중의 몇몇 유리 D-아미노산이 column switching method에 의해 검출되었다. D-아미노산과 L-아미노산의 총량의 정량은 $C_{18}$ 컬럼을 사용한 비키랄 분리에 근거한다. L-아미노산에 대한 D-아미노산의 수준은 o-phthalaldehyde로 유도체화된 아미노산의 postcolumn reaction detection을 포함하는 column switching system에 의해 정량되었다. Postcolumn detection system의 키랄 분리는 chiral crown ether 컬럼에 의해 실행되었다. 이 system은 간장과 발효된 콩, 그리고 콩 같은 식품 중에 있는 D-아미노산의 정량에 적용된다. 이 achiral/chiral coupled-column system하에서는 시료 전처리과정이 중요함을 알게 되었다. Phenylalanine은 시판용 간장 속에 242ppm, 재래식 간장 속에는 102ppm, 발효된 콩에는 1g당 8.34mg, 콩에는 1g당 2.87mg이 함유된 것으로 밝혀졌다. D-phenylalanine은 시판용 간장 속에는 0.67%, 재래식 간장에는 0.34%, 발효된 콩에는 1.81% 미만, 콩에는 2.82% 미만이 검출되었다.

• KSBB Journal
• /
• 제28권6호
• /
• pp.423-427
• /
• 2013

A new convenient derivatization method of ${\alpha}$-amino acid esters as nitrobenzoxadiazole (NBD) derivatives for chiral resolution was introduced and the enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as NBD derivatives was performed by normal HPLC using chiral columns based on polysaccharide derivatives. The NBD derivatives were readily prepared by stirring NBD-Cl and ${\alpha}$-amino acid methyl ester HCl with $NaHCO_3$ in ethanol. The performance of Chiralpak IA was superior to the other chiral stationary phases for enantiomer resolution of NBD derivatives of several ${\alpha}$-amino acid methyl esters. Owing to fluorescence detection as well as strong UV absorption, it is expected that the convenient analytical method developed in this study will be very useful for enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as NBD derivatives on polysaccharide-derived chiral columns.

• KSBB Journal
• /
• 제31권3호
• /
• pp.186-191
• /
• 2016

A liquid chromatographic method for the enantiomer separation of fluoxetine was performed using covalently bonded and coated type polysaccharide-derived chiral stationary phases (CSPs). The degree of enantioseparation is affected by the used CSPs and mobile phases. The performance of Chiralpak IC was superior to the other CSPs used in this study. Out of various solvent composition and additives, the greatest separation and resolution was observed using Chiralpak IC with mobile phase of 2-propanol in hexane with diethylamine as an additive. Semi-preparative separation of fluoxetine was performed on the analytical Chiralpak IC column to obtain (R)- and (S)-fluoxetine enantiomer with high chemical and optical purity. From the overall study, the developed liquid chromatographic method on polysaccharide-derived CSPs is expected to be very useful for the enantiomer separation of fluoxetine.

• KSBB Journal
• /
• 제26권2호
• /
• pp.139-142
• /
• 2011

The chromatographic enantiomer separation of 9-anthraldimine derivatives of ${\alpha}$-amino acid methyl and ethyl esters on four polysaccharide based chiral columns was performed. The 9-anthraldehyde Schiff base derivatives of ${\alpha}$- amino acid esters were readily synthesized by stirring the ${\alpha}$- amino acid ester hydrochloride salts with 9-anthraldehyde in the presence of 1,8-diazabicyclo [5.4.0]undec-7-ene as a base and anhydrous $MgSO_4$. Chiralcel OD or Chiralcel OD-H showed the greatest enantiomer resolution of 9-anthraldimine derivatives of ${\alpha}$-amino acid methyl and ethyl esters. The L-enantiomers of all the analytes were preferentially retained on Chiralcel OD or Chiralcel OD-H. This analytical method was applied in the determination of optical purities of several commercially available D- or L-${\alpha}$-amino acid methyl esters.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제34권3호
• /
• pp.204-210
• /
• 2006

각종 니트릴 화합물은 키랄 의약품의 합성에 사용되는 유용한 중간체이다. 본 연구에서는 토양 분리균 중에서 4-chloro-3-hydroxy butyronitrile(CHBN)기질로부터 고지혈증 치료제인 Atorvastatin을 합성하는 데에 필요한 4-chloro-3-hydroxy butyric acid(CHBAc)를 생성하는 균주 2종류를 선발하였다. 16S rRNA 분석을 통해서 균 동정을 수행한 결과, 모두 Rhodococcus erythropolis에 속하는 것으로 밝혀졌으며, TLC 분석 결과로부터 CHBN 기질을 분해하는 효소는 니트릴 히드라타아제(NHase)와 아미다아제(amidase)인 것으로 추정되었다. 분리균의 CHBN 분해효소는 ${\varepsilon}$-카프로락탐에 의해서 발현이 유도되었으며, 균체와 세포 추출액에서 모두 기질 분해활성을 나타났다. 기존에 보고된 효소의 유전자 염기서열로부터 프리머를 제조하고 PCR을 수행함으로써 분리균으로부터 니트릴 히드라타아제와 아미다아제 유전자를 확보하게 되었다. 발굴된 유전자의 염기서열을 분석한 결과, 이미 보고된 Rhodococcus erythropolis의 니트릴 히드라타아제 ${\alpha}$-서브유니트과 ${\beta}$-서브유니트 및 아미다아제와 96% 이상의 상동성을 보였다. 따라서 CHBN기질은 분리균의 니트릴 히드라타아제와 아미다아제 효소에 의해서 아미(CHBAm)를 거쳐 산(CHBAc)으로 전환되는 것을 알게 되었다.

• 공업화학
• /
• 제9권6호
• /
• pp.914-919
• /
• 1998

쉽게 얻을 수 있는 1,2:5,6-di-O-isopropylidene-D-mannitol (1)로부터 $C_2$-대칭성 피롤리딘 아미드 (8)을 합성하였다. 벤질 아민과 dimesylated hexitol (4)를 고리화 반응 시키면 트랜스 형태의 $C_2$-대칭성 피롤리딘 아민(5)가 주생성물로 얻어지나, 이와 함께 이성질화가 일어나 시스 이성질체인 화합물(6)도 생성된다. 피롤리딘 아민 (5,6)을 탈보호된 아민 (7)을 거쳐 아미드 (8,9)로 변형시켜 이를 순수한 형태로 분리하고, 이 $C_2$-대칭성 피롤리딘 아미드(8)의 광학 순도를 측정하기 위해 Mosher 유도체(13,14)를 합성하였다.$^1H$ 과$^{19}F$ NMR 실험으로 Mosher 유도체 (13,14)가 단일 물질임이 밝혀졌고, 이로서 피롤리딘 아미드 (8)이 광학적으로 순수한 화합물임을 확인하였다.

• 멤브레인
• /
• 제16권2호
• /
• pp.133-143
• /
• 2006

방사선 그라프트 중합법을 적용하여, 폴리에틸렌 다공성 중공사막에 전자선을 조사시킨 후, glycidyl methacrylate(GMA)를 그라프트 중합하였다. 그 후, 음이온 교환기로서 diethylamine (DEA), triethylamine (TEA)를 도입시켜 2종류의 음이온 교환막을 합성하였다. DEA막과 TEA막의 이온교환 밀도는 3.4 mmol/g, 1.74 mmol/g으로 DEA막이 TEA막보다 높은 이온교환기를 얻을 수 있었다. 이 2종류의 음이온교환막에 단백질(bovine serum albumin, BSA)을 투과법에 의해 고정시켜 BSA 고정막을 만들었다. DEA-BSA막의 경우, 그라프트 체인에 BSA가 8층 이상으로 다층 흡착하였으나, TEA-BSA막의 경우, 강한 음이온에 의해 다층 흡착이 이루어지지 않았다. DEA-BSA막의 경우, BSA 다층 흡착성 고정을 나타내기 때문에 L-Trp가 D-Trp보다 더 강한 흡착 특성을 나타내었다. L, D-Trp 이성질체 혼합물을 투과시킨 BTC에 있어서, DEA-BSA 막의 경우, BSA에 대한 L-Trp와 D-Trp의 키랄 인식이 다르기 때문에 2단계의 BTC곡선을 얻을 수 있었다.

• Korean Chemical Engineering Research
• /
• 제54권1호
• /
• pp.81-88
• /
• 2016

리모넨은 오렌지 향이 있는 천연의 키랄 화합물로 주로 감귤껍질과 레몬껍질에 함유되어 있다. $4^{\circ}C$로 냉장 보관한 감귤 껍질을 에탄올을 용매로 속슬렛 추출기에서 2시간동안 $120^{\circ}C$에서 추출하였다. 역상 HPLC 분석을 통해 d-리모넨과 불순물의 헨리 상수를 계산하여 $H_{Lim}=8.55$, $H_{imp}=0.223$를 얻었다. Aspen chromatography 프로그램을 사용해서 $0.46{\times}25cm$ 칼럼으로 이루어진 4-bed SMB의 리모넨 전산모사를 수행하였고 삼각도내의 $m_2$, $m_3$ 값을 변경하면서 순도가 가장 높은 분리 조건을 찾았다. 그 결과 가장 높은 순도는 98.59%이고, $m_2=2.57$, $m_3=9.55$였다. 이 때의 feed 유량은 1 mL/min, desorbent 유량은 1.19 mL/min, extract 유량은 0.857 mL/min, raffinate 유량은 1.34 mL/min이었다. Scale-up 전산모사를 위해 칼럼의 직경을 1.6 cm로 늘린 4-bed SMB에서 직경이 0.46 cm인 4-bed SMB와 같은 결과를 갖는 조건을 찾기 위해 유량을 칼럼 부피 비에 정비례하여 증가시켰다. 이 때 feed, desorbent, extract, raffinate의 유량은 각각 12 mL/min, 14 mL/min, 10 mL/min, 16 mL/min이었다. 리모넨과 불순물의 등온흡착곡선을 선형으로 가정하였기에 칼럼 부피에 정비례하여 유량을 증가시키는 scale-up이 가능하였다.

• KSBB Journal
• /
• 제19권4호
• /
• pp.274-283
• /
• 2004

한국산 지렁이 (Lumbricus rubellus) 분쇄액으로부터 연속적인 column chromatography로 6종의 lumbrokinase (LK) fractions를 얻었다. 여섯 종의 LK fractions의 분자량은 24.6∼33.1 kDa 사이였다. rat venous thrombosis를 이용한 실험모델에서, LK분획을 oral administration한 쥐에서 thrombus 중량은 유의하게 감소하였고, APTT, PT와 plasmin 활성도 유의하게 증가하였고, PAI activity도 유의하게 감소하였다. rat platelets를 LK 분획으로 전 처리하였을 때에 thrombin에 의한 응고는 억제되었고, MDA 생산도 감소되었다. 쥐의 흉 대동맥과 장간막동맥을 phenylephrine으로 수축을 시킨 후에 LK 분획을 각각 처리하였을 때에 혈관이 이완되었다. 상기의 결과는 LK분획이 fibrinolytic activity 뿐만 아니라 platelet 응집의 억제와 혈관의 이완작용에도 영향을 준다는 것을 의미한다. 결론적으로 LK는 fibrin clot치료를 위한 hemolytic agent로서 유용하다고 판단한다. 2-아릴프로피온산 계열의 키랄 의약품의 효소적 dynamic kinetic resolution (DKR) 공정에서 라세미화 염기촉매로 트리옥틸아민이 지금까지 주로 사용되어 왔으나 반응매질에 녹은 상태로 작용해 회수 및 재사용이 어려웠다. 본 연구에서는 이를 개선하고자 라세미화 반응을 위한 고효율 고체 염기를 탐색해 보았다. 45$^{\circ}C$, 아이소옥탄 내에서 (S)-나프록센 2,2,2-트리플로로에틸 씨오에스터를 기질로 무기 염기류, 염기성 음이온교환수지류, resin-bound 염기류 등을 시험한 결과, 약 염기성 음이온교환수지인 DIAION WA30을 사용하였을 때 가장 효과적이었다. DIAION WA30의 2차 interconversion constant (k＊$_{int}$)는 8.6${\times}$$10^{-4}$ m $M^{-l}$ $h^{-1}$이며 동일한 실험조건 하에서 수행한 트리옥틸아민 (k＊$_{int}$ =2.5${\times}$$10^{-4}$ m $M^{-1}$ $h^{-1}$)에 비해 약 3배가 높았다. 효소 활성에 필수적인 물의 양에 따른 DIAION WA30의 라세미화 효율에 관하여 실험한 결과, 물의 양이 증가할수록 그 효율은 감소하였다. DIAION WA30을 라세미화 촉매로 사용하여 아이소옥탄 내에서 라세믹 나프록센 2,2,2-트리플로로에틸 씨오에스터의 효소적 DKR 반응을 수행해 보았다. 그 결과 DIAION WA30을 사용하지 않은 경우에 비해 반응 전환율과 생성물의 광학 순도는 급격히 향상되었다. 전통적 광학분할 반응의 최대 50%라는 전환율의 제한이 본 연구에서 찾은 DIAION WA30을 첨가함으로써 성공적으로 극복되었다. 또한 고체 염기촉매인 DIAION WA30의 사용은 라세미화 촉매의 회수 및 재사용이 가능하게 해준다.해준다.