Lee, Seung Bum;Seong, Dae Hyung;Kim, Hyung Su;Hong, In Kwon
Applied Chemistry for Engineering
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v.7
no.6
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pp.1043-1052
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1996
Supercritical fluid chromatographic method was recommended as an alternative separation method of fatty acids of the conventional method such as distillation or extraction. Although diffusion characteristics are varied by the carbon numbers and the degree of unsaturation of fatty acids, the quantitative data were so rare that the commercialization of supercritical fluid chromatographic method has been hindered. In this study, diffusion coefficients of fatty acids which are differently unsaturated are measured by CPB method in the range of 308.15K to 328.15K and 13MPa to 17MPa in supercritical carbon dioxide. A decrease in the binary diffusion coefficient was observed with an increase in temperature and pressure. Also, the decrease in the binary diffusion coefficient with increasing fluid density and viscosity. Wilke-Chang equation, Funazukuri empirical equation, and Matthews-Akgerman equation are used to correlate the experimental diffusion coefficients of fatty acids in supercritical carbon dioxide. Among the various theoretical equations, Matthews-Akgerman equation based on RHS theory was suggested as a more successful correlation model with experimental data.
An anion exchange chromatography was employed for the purification of mouse monoclonal antibodies from ascitic fluid and in vitro cultivation media. After cultivation of hybridomas, Alps 25-3, HCGK, A4W, and KW, producing IgG1, the culture supernatants were harvested by centrifugation, precipitated with 50-60% ammonium sulfate, and dialyzed against 0.025 M Tris-HCI buffer (pH 8.2). Then the dialyzed samples were loaded into a DEAE-Trisacryl M anion exchange column. Monoclonal antibodies bound to the DEAE-Trisacryl M were eluted with 0.025 M Tris-HCI buffer (pH 8.2) containing 30-40 mM NaCl. In ammonium sulfate precipitation, the recovery of the monoclonal antibody was shown to be 90% and 84% from in vitro culture media containing 10% and 2% fetal bovine serum, respectively. On the other hand, the pretreatment by ultrafiltration enhanced the yield up to 91% whereas the purity was lower than that by ammonium sulfate treatment. Subsequently, in the DEAE-Trisacryl M chromatographic separation, the purities and recoveries of all the monoclonal antibodies from both the in vitro culture supernatants and ascitic fluids were 70-80% and 65% respectively. The monoclonal antibody, Alps 25-3 could be further purified with a purity of 95% through an immunoadsorbent chromatography.
Extraction chromatography was used to scarch optimum separation conditions of terbium. Stationary phase was 2-ethylhexyl-2-ethylhexyl phosphonic acid(HEH[EHP])levextrel (-100~+150 mesh), column size was ${\Phi}20{\times}530mm$ and kept constantly temperature at $50^{\circ}C$, adsorption flow rate of $0.2mL/cm^2{\cdot}min$, elution flow rate of $1.0mL/cm^2{\cdot}min$, column diameter to packing height of 1:15. But to search optimum separation conditions of terbium, it changed the eluent acidity, the loading weight of sample. the composition of sample. In conclusion, acidity was 0.6 N HCl, loading weight of sample was about 5% and composition of sample was $Gd_2O_3(20%)+Tb_4O_7(60%)+Dy_2O_3(20%)$. Moreover purity of separated terbium by ICP-AES analysis was 99.98% in yield of 99.99%.
Analysis for the imidazoline type cationic surfactants was performed by the gas chromatography(GC) and high performance liquid chromatography(HPLC). The composition of the alkyl chain distribution was investigated by GC after base/Acid hydrolysis of the imidazoline ring. The distribution of total alkyl chain was separated clearly by a Bondclone C18/NOVA-Pak C18 HPLC column using 50% acetonitrile in methanol containing 0.1M sodium perchlorate as a mobile phase. Alkyl chain distribution and average molecular weight of imidazoline type cationic surfactants were obtained based on these analytical methods. The agreement of results from GC and HPLC was good. The detection limit of imidazoline by HPLC method was 10ng without pretreatment.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.11
no.3
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pp.37-40
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1982
Fifteen free amino acids except tryptophan, proline and cystine were identified from Korean red ginseng and dried ginsengs from Korea, America and Canada using by high performance liquid chromatography (HPLC). Arginine was 72.6% of total free amino acids in the red ginseng and 48.2 to 68.7% in the dried ginsengs. The content of each free amino acid was lower in the red ginseng than in Korean dried ginseng. Most free amino acids in Korean dried ginseng showed higher content than those in American and Canadian ones. Tryptophan, proline cystine, methionine and phenylalanine were not detected in the extracts of red ginseng and of Korean white ginseng. Arginine was highest in these extracts and all free amino acids were higher in the white ginseng extract.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.1
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pp.50-56
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2002
The $\beta$-galactosidase was purified from the internal organs of edible snail by fractionation with ammonium sulfate, ion exchange chromatography on DEAE-Sephadex, Mono Q HR 5/5 and gel filtration on Sephacryl S-200. Superose 12 HR 10/30 chromatography. The specific activity of the purified $\beta$-galactosidase was 18.8 units/mg protein with 31.3 purification fold from crude extract. The $\beta$-galactosidase had native molecular weight of 144,000 dalton and was composed of two subunits of 72,000 dalton. The isoelectric point of the enzyme was determined 4.1. This enzyme was the most active at pH 3.0 and 6$0^{\circ}C$, and was stable in the pH range 2.0~8.0 and below 5$0^{\circ}C$. The enzyme was inhibited by metal ions and sugars such as fructose, glucose, galactose, maltose and xylose.
Supercritical Fluid Chromatography(SFC) has become a technique for solving problems that are difficult to be monitored by other chromatographic methods. However, the most widely used fluid, is no more polar than hexane. Polar samples which are difficult to be analyzed with pure supercritical $CO_2$ because of their high polarity can be separated by adding polar modifiers to supercritical $CO_2$. In this paper, a new method for monitoring the mobile phase composition in modified supercritical fluid chromatography was developed. The amount of water dissolved in supercritical $CO_2$ was measured by amperometric microsensor which is made of thin film of perfluorosulfonate ionomer(PFSI). The amount of water dissolved in supercritical $CO_2$ stayed constant for a much longer time than with a saturator column. With this new mixing device, we could get good resolutions for vitamins which are difficult to separate with pure $CO_2$.
l o identil) ;~nclc li~iracterize; In iiscorhate oxiililinp enzyme in ('/rItrn~i~rlon~ir~c~t~itr~~lr.o\ r(1rii. we studicil ;is li)llows. Ascorh;ric oxiiliring cn/;jme activit) f ~ o ~thne crude extract 01' ( ' / ~ l o n ~ ~ . c l o t ~1~~oit~rl~1oin~/.t\ii W;I\ dctccietl by 5pecific active 5ta1ning through nati\e gel cletrophorcsi\ and ~iltra\~iolestp eciroscopy. Ascorb~ttco xidizing c n ~ y m ew i15 partilly 1~1rilieJ by \;~riousp roccclurcs inclucli~lga rnmoniu~ns uIl';~tcp recipit;iion. aJ\orption ~111-om;~togrophy on Iiy~lroxyapaiitca nd Scphailcx <;-I50 gel lillration chrornatogral>liy. Plie ~nolecularw eight 01' the nativc cnrytiic was ahour 88.000 tlalton hy nativc gel elcciroplloresis anci subunit niolecul;ir ~rciglit 55,000 ol' this cnrymc w;~c determined hy SIIS-P.ASI!. The optimum tcmper~tture ii)r the cnrymc nos ahout 5j$^{\circ}$C and pH 4.6 was the optimum. Moreover. ascorhaie oxi~losc in C: reinhardtii was confirmet1 by Ll1e\tcrn blotting technique.
Saponins of ginseng root, leaf and stem were identified by TLC. Eleven unknown spots were detected in ginseng leaf and ten unknown spots in ginseng stem on TLC besides seven ginsenosides such as $ginsenoside-Rg_1,\;-Rf,\;-Re,\;-Rd,\;-Rc,\;-Rb_2,\;and\;-Rb_1$ which are contained in ginseng root. $Ginsenoside-Rg_3\;and\;-Rg_2$ were identified on TLC from mild hydrolysates with 50% acetic acid of total saponins from ginseng root, leaf and stem. Meanwhile, panaxadiol, panaxatriol and oleanolic acid were identified from hydrolysates with 7% ethanolic sulfuric acid of total saponin of ginseng root, while panaxadiol and panaxatriol from those of total saponins of ginseng leaf and stem.
A study has been done on the separation of iodide from spent pressurized water reactor (PWR) fuels and its quantitative determination using ion chromatography. Spent PWR fuels were dissolved with mixed acid of nitric and hydrochloric acids (80 : 20 molL%) which can oxidize iodide to iodate to prevent it from be vaporized. After reducing ${IO_3}^-$ to $I_2$ in 2.5 M $HNO_3$ with $NH_2OH{\cdot}HCl$, Iodine was selectively separated from actinides and all other fission products with carbontetrachloride and back-extracted with 0.1 M $NaHSO_3$. Recovered iodide was determined using the ion chromatograph of which the column was installed in a glove box for the analysis of radioactive materials. In practice, spent PWR fuel with 42,000~44,000 MWd/MtU was analyzed and its quantity was compared to that calculated by burnup code, ORIGEN2. The agreement was achieved with a deviation of -8.3~-0.5% from the ORIGEN 2 data, $324.5{\sim}343.6{\mu}g/g$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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