• 제목/요약/키워드: 크로마토그래피

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초임계유체 크로마토그래피를 이용한 지방산의 확산특성 해석 (Diffusion Characteristics of Fatty Acid using Supercritical Fluid Chromatographic Method)

  • 이승범;성대형;김형수;홍인권
    • 공업화학
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    • 제7권6호
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    • pp.1043-1052
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    • 1996
  • 지방산의 분리방법중 증류나 추출 등의 전통적인 방법을 대체할 수 있는 공정으로 초임계유체 크로마토그래피 분리법을 추천할 수 있다. 그러나 지방산을 구성하는 탄소수나 불포화도는 초임계유체내에서 확산특성을 달리 하지만 이들의 정랑적인 데이터가 부족하여 초임계유체 크로마토그래피법을 공정화하는데 큰 어려움이 있다. 본 연구에서는 불포화도를 달리하는 지방산들의 초임계 이산화탄소내 확산계수를 CPB법(capillary peak-broadening method)을 기초로 온도 (308.15~328.15K)와 압력(13~17MPa)을 변수로 하여 실험적으로 측정하였다. 이성분계 확산계수는 일정한 온도에서 압력이 증가함에 따라 감소하며 일정한 압력에서 온도가 증가함에 따라 증가하였다. 일정한 밀도에서 온도에 따른 확산계수의 영향은 크지 않으며, 밀도와 점도가 증가함에 따라 확산계수는 감소하였다. 또한 Wilke-Chang식과 Funazukuri의 실험식, Matthews-Akgerman식을 초임계 이산화탄소에서의 이성분계 확산계수에 대한 상관식으로의 이용가능성을 확인한 결과 다른 상관관계식에 비해 RHS(rough hard sphere)에 기초한 자유부피모델인 Matthews-Akgerman식이 잘 일치하는 상관식인 것으로 확인되었다.

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DEAE-Trisacryl 크로마토그래피법에 의한 IgG1 Type 쥐 단일클론 항체의 분리정제 (Purification of IgG1 Type Mouse Monoclonal Antibodies with DEAE-Trisacryl Chromatography)

  • 최태부;정용근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제16권5호
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    • pp.335-342
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    • 1988
  • 하이브리도마를 쥐의 복강이나 in-vitro에서 배양한 뒤 생산된 IgG1 type의 쥐 단일클론 항체를 정제하기 위하여 음이온 교환 크로마토그래피를 이용하였다. 배양이 끝난 배지를 원심분리하여 세포를 제거하고 50-60% ammonium sulfate로 침전물을 만든 다음 0.025M Tris-HCI(pH8.2)용액으로 투석하여 salt가 제거된 sample을 DEAE-Trisacryl M에 부하하였다. Column에 결합된 항체는 30-40mM NaCl 을 포함하는 0.025M Tris-HCI(pH8.2)용액으로 용출하였다. 혈청농도가 높은 배지 (10% FBS)에서는 50% ammonium sulfate 처리로 90% 이상의 항체가 회수되었으나 저혈청 배지 (2% FBS)에서는 60% ammonium sulfate 처리에도 회수율이 84%에 그쳤다. 후자의 경우 한외여과법 (ultrafiltration)을 이용하여 항체 회수율을 91%까지 증가시킬 수 있으나 농축된 항체를 크로마토그래피로 정제하였을 때 그순도가 ammonium sulfate 침전법에 비해 낮아졌다. 하이브리도마 Alps 25-3, HCGK, A4W, KW를 여러가지 배양조건에서 배양한 뒤 생산된 항체를 DEAE-Trisacryl M chromatography를 이용하여 정제해 본 결과 대체로 순도 70-80%의 항체를 얻을 수 있었고 이때 항체 회수율은 65% 선이었다. 항체의 순도를 높이기 위해서는 affinity chromatography 혹은 gel filtration과 같은 2차적인 방법이 필요 할 것으로 보이며 한 예로 affinity chromatography를 이용하여 순도 95%의 항체를 얻었다.

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추출 크로마토그래피를 이용한 고순도 테르븀의 분리 (Separation of High Purity Terbium Using Extraction Chromatography)

  • 이광필;박명진;박긍식;이흥락;박철수
    • 분석과학
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    • 제12권5호
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    • pp.370-374
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    • 1999
  • 추출 크로마토그래피를 이용하여 고순도 테르븀의 선택적 분리를 시도하였다. 고정상으로 2-ethylhexyl-2-ethylhexyl phosphonic acid(HEH[EHP]) 추출수지(-100~+150 mesh), 컬럼은 ${\Phi}20{\times}530mm$를 사용하고 온도는 $50^{\circ}C$로 유지하고, 흡착 유속은 $0.2mL/cm^2{\cdot}min$, 용출유속은 $1.0mL/cm^2{\cdot}min$, 컬럼의 높이와 직경의 비는 1:15로 하였다. 용리액의 산도, 시료의 부하량 및 시료의 조성을 변화시켜 테르븀의 분리의 최적조건을 설정하였다. 그 결과, 산도는 0.6 N HCl, 부하량은 약 5%, 시료의 조성은 $Gd_2O_3(20%)+Tb_4O_7(60%)+Dy_2O_3(20%)$이었다. 그리고, ICP-AES로 테르븀의 분리수율을 구한 결과 99.99% 이었고 순도는 99.98%이었다.

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Imidazoline계 양이온 계면활성제 분석 (Analysis of Imidazoline Type Cationic Surfactants)

  • 박홍순;최규열;이재덕;김여경;안호정
    • 공업화학
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    • 제9권3호
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    • pp.404-406
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    • 1998
  • 가스 크로마토그래피(GC)와 가스 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 imidazoline계 양이온 계면활성제 분석을 수행하였다. 염기 가수분해와 산 가수분해 후 GC로 imidazoline ring의 original fatty acid의 alkyl chain 분포를 조사하였다. 역상 C18 분리관을 사용하고 0.1M $NaClO_4$가 함유된 methanol과 acetonitrile의 50:50(v/v)액을 용리액으로 할 때 imidazoline의 homologous한 total alkyl chain 분포가 HPLC에서 훌륭하게 분리되었으며, GC 결과와 좋은 일치를 보여주었다. 본 연구의 분석법으로, imidazoline계 양이온 계면활성제의 소수성 alkyl chain 분석 및 평균 분자량 결정이 가능하였으며, 전처리 필요없이 HPLC법을 이용한 imidazoline 의 검출한계는 10ng이었다.

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고속액체(高速液體)크로마토그래피에 의한 각종(各種) 인삼제품(人蔘製品)중의 유리아미노산 조성의 분석(分析) (High Performance Liquid Chromatographic Analysis of Free Amino Acids in Various Ginseng Products)

  • 이성우;흑기민청;우상규;윤태헌
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제11권3호
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    • pp.37-40
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    • 1982
  • 한국산(韓國産) 홍삼(紅蔘), 한국(韓國), 미국(美國) 및 카나다산(産) 피부백삼(皮部白蔘)으로부터 tryptophan, proline, cystine을 제외한 15 종의 유리 아미노산을 고속액체(高速液體) 크로마토그래피로 검출해 낼 수 있었다. 이들 아미노산 중에서 arginine이 홍삼(紅蔘)에서는 총 유리 아미노산의 72.6%를, 피부백삼류(皮部白蔘類)에서는 $48.2{\sim}68.7%$나 차지하고 있었다. 한국산(韓國産) 홍삼(紅蔘)의 각 유리 아미노산 함량은 한국산(韓國産) 피부백삼(皮部白蔘)에 비하여 많이 감소되어 있는 경향이었고, 미국산(美國産) 및 카나다산(産) 피부백삼(皮部白蔘)의 경우 한국산(韓國産) 그것에 비하여 대체로 각 유리 아미노산 함량이 낮은 경향을 보여 주었다. 한국산(韓國産) 홍삼(紅蔘) 추출물(抽出物)에서는 tryptophan, proline, cystine 이외에도 methionine, phenylalanine등이 검출되지 않았다. 이들 추출물(抽出物)에서도 역시 arginine이 가장 많이 함유되어 있었고 각 유리 아미노산 함량은 백삼추출물(白蔘抽出物)에서 더 많았다.

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식용달팽이 β-Galactosidase의 정제와 생화학적 특성 (Purification and Characterization of the β-Galactosidase from Edible Snail)

  • 윤경영;김광수
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.50-56
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    • 2002
  • 달팽이 내장을 마쇄, 추출, 염석 및 투석 후 얻은 조효소액을 두 번의 이온교환 크로마토그래피 및 두 번의 겔여과 크로마토그래피를 거쳐 최종적으로 얻은 $\beta$-galactosidase의 비활성도는 18.8 units/mg protein이었고, 정제도는 31.3%배, 수율은 20.8%이었다. $\beta$-Gallactosidase의 분자량을 측정하기 위해 겔 여과와 전기영동을 실시한 결과, native molecular weight가 약 144,000으로, SDS-PAGE 결과, 약 72,000으로 나타나 이 효소는 동일한 polypeptide로 구성된 dime로 추측되었으며, 등전점은 pI 4.1이었다. $\beta$-Galactosidase의 최적 pH와 온도는 각각 pH 3.0과 6$0^{\circ}C$로 측정되었으며, pH 2.0~8.0에서 80%이상의 효소 활성을 나타내었고, 온도 30~5$0^{\circ}C$에서 안정되었다. 모든 금속이온과 fructose, glucose, galactose, maltose 및 xylose는 $\beta$-galactosidase의 저해제로 작용하였다.

초임계 유체를 이용한 비타민류의 새로운 분석법 개발 (Development of New Analytical Method of Vitamins Using Supercritical Fluid)

  • 표동진;박동진;김호현;이학주;이태준
    • 분석과학
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    • 제10권2호
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    • pp.131-138
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    • 1997
  • 초임계 유체 크로마토그래피(Supercritical Fluid Chromatography, SFC)는 종래의 크로마토그래피 방법으로 분석하기 어려운 물질을 분석해 내는 기술로서 발전이 되어 왔다. 그러나 SFC에서 이동상으로 많이 사용되고 있는 초임계 유치 $CO_2$는 용매로서 특성이 n-hexane과 매우 비슷하여 극성이 큰 시료들을 용출(elution)시키기가 어렵다. 이러한 점을 해결하기 위하여 초임계 $CO_2$에 극성을 지닌 물질, 즉 변형제(modifier)를 섞어서 이동상으로 사용할 수 있다. 본 연구에서는 초임계 $CO_2$에 첨가된 수분($H_2O$)의 양을 perfluorosulfonate ionomer(PFSI) film을 이용하여 만든 amperometric microsensor로서 측정하였다. 이와 같은 방법을 사용함으로써 포화 column보다 상당히 긴 시간 동안 일정하게 수분을 첨가할 수 있었고, 실제로 이 방법을 사용하여 순수한 $CO_2$ 이동상만으로는 분리하기 어려운 비타민류의 분석에 적용한 결과 좋은 크로마토그램을 얻었다.

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Chlamydomonas reinhardtii 에서 정제한 Ascorbate Oxidase 의 특성 (Properites of Purified Ascorbate Oxidase in Chlamydomonas reinhardtii)

  • 인용호;이정헌;채영규;최영길;강사욱;정가진;하영칠
    • 미생물학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.225-231
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    • 1992
  • 생물체내의 ascorbic acid :dehydroascorbic acid system 을 조절하는데 관여하는 것으로 알려진 ascorbate 산화효소의 활성을 단세포 녹조류인 Chlamydomonas reinhardtii 에서 확인함으로써 이 효소의 존재와 특성을 고찰하였다. 조효소는 native gel 전기 영동에 의한 활성 염색과 분광광도계에 의한 ascorbic acid .의 흡광도 감소 측정에서 뚜렷한 활성을 나타내었다. 황산암모늄 침전, hydroxyapatite 흡착 크로마토그래피, 그리고 Sephadex G-150 gel 여과 크로마토그래피 분리한 결과 26.1 units/mg /의 specific activity 를 나타내었다. 분리된 ascorbate 산화효소는 $55^{\circ}C$, pH 4.6 에서 가장 활성도가 높았다. Native gel 전기 영동에서 88,000 dalton 갸량의 분자량을 가지고 있었고 소단위체의 분자량을 55,000 이었다. 또한 Western bloting technique 을 이용하여 C. reinhardtii 의 ascorbate oxidase를 확인하였다.

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얇은막 크로마토그래피에 의한 인삼(人蔘)의 근(根) 엽(葉) 및 경(莖)의 saponin 및 sapogenin화합물(化合物) 동정(同定) (Identification of Saponin and Sapogenin in Root, Leaf and Stem of Ginseng by Thin Layer Chromatography)

  • 최강주;김석창;김만욱;남기열
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제30권4호
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    • pp.340-344
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    • 1987
  • 인삼(人蔘)의 근(根) 및 지상부(地上部) 사포닌을 얇은 막 크로마토그래피로 동정(同定)한 결과(結果) 인삼근(人蔘根)에 함유된 사포닌 중 $ginsenoside-Re,\;-Rg_1,\;-Rc,\;-Rf,\;-Rb_2$$-Rb_1$ 은 각각 엽(葉)과 경(莖)에서도 동정(同定)되었으며 이외에도 엽(葉)에서 10개과 경(莖)에서 9개의 unknown spot를 동정(同定)할 수 있었다. 또한 부위별(部位別) 총(總)사포닌을 50% 초산으로 온화한 조건에서 산(酸) 가수분해(加水分解)하여 생성(生成)된 prosapogenin의 조사결과(調査結果), panaxadiol계 사포닌 및 ginsenoside-Re의 산(酸) 가수분해물(加水分解物)인 $ginsenoside-Rg_3$$ginsenoside-Rg_2$가 각각 동정(同定)되었다. 한편 근(根), 엽(葉) 및 경(莖)의 총사포닌을 황산 가수분해(加水分解)하여 sapogenin 조사결과, 근(根)에서는 panaxadiol, panax atriol 및 oleanolic acid가 검출되었고, 엽(葉)과 경(莖)에서는 panaxatriol 및 panaxadiol만이 동정(同定)되었다.

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경수로 사용 후 핵연료 내 요오드 정량 (Determination of Iodide in spent PWR fuels)

  • 최계천;이창헌;김원호
    • 분석과학
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    • 제16권2호
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    • pp.110-116
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    • 2003
  • 사용 후 핵연료의 화학특성 연구를 위하여 요오드의 분리와 정량에 관한 연구를 수행하였다. 사용 후 핵연료를 용해시키는 과정에서 핵연료 중에 CsI로 존재하는 요오드가 $I_2$로 산화되어 휘발되지 않도록 질산과 염산의 혼합산 (80:20 mol%)을 이용하여 비휘발성 ${IO_3}^-$­로 안정화시켰다. 2.5 M $HNO_3$ 매질에서 $NH_2OH{\cdot}HCl$을 이용하여 $I_2$로 환원시킨 후 사염화탄소로 추출하여 우라늄과 핵분열생성물로부터 분리, 회수하였다. 0.1 M $NaHSO_3$을 사용하여 요오드를 역추출하였으며 수용액층으로 회수된 요오드를 이온 크로마토그래피로 정량하였다. 방사성 물질 분석에 적합한 이온 크로마토그래피/차폐 시스템을 구성하였으며 42,000~44,000 MWd/MtU 의 연소도를 갖는 사용후핵연료를 대상으로 요오드를 분석한 결과 Origin 2 연소도 전산코드에 의한 계산결과인 $324.5{\sim}343.6{\mu}g/g$와는 -8.3~-0.5%의 편차를 나타내었다.