• 제목/요약/키워드: 크로마토그라피

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미더덕의 스테롤 조성 (The Sterol Composition of Styela clava)

  • 조용계
    • 한국수산과학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.97-101
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    • 1978
  • 미더덕의 스테롤 조성을 가스크로마토그라피로 분석한 결과 22-트란스-24-놀 코레스타-22-디엔-$3\beta$-올이 $1.3\%$, 22-데하이드로콜레스테롤이 $5.1\%$ 콜레스테롤이 $33.1\%$, 브라시카스테롤이 $26.2\%$, 24-메칠렌콜레스테롤 $13.1\%$, 스티그마스테이 $7.1\%$, $\beta$-시토스테롤이 $10.9\%$, 푸코스테롤이 $3.1\%$였다.

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면역친화 크로마토그라피에 의한 Tricholderma viride의 Cellobiohydrolase 분리 (Purification of Trichoderma viride Cellobiohydrolase by Immunoaffinity Chromatography)

  • 오태광
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.390-393
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    • 1990
  • Trichoderma viride의 cellobiohydrolase을 immunoaffinity chromatography를 제조하여 조효소로부터 일단계로 용이하게 분리할 수 있었다. 분리된 cellobiohydrolase는 전기영동과 isoelectrofocusing 상에서 단일단백질로 확인되었고, 분자량이 70,000,pI치는 3.8.인 산성단백질이었다. 면역친화 정제된 cellobiohydrolase는 무정형 섬유소보다는 고결정성 섬유소에 특성이 높았다.

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연어알에서 분리 정제한 carotenoprotein 지질 성분에 관한 연구 (Analytical Studies on the Lipids in Carotenoprotein purified form Saimo Salar Eggs)

  • 김재웅;이정복
    • 한국식품영양학회지
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    • 제1권2호
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    • pp.18-24
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    • 1988
  • 이온교환 크로마토그라피와 젤 여과법으로 연어알에서 carotenoprotein을 충분히 정제하였다. CHCls/MeOH (211)용매로 지질 성분을 추출한 후, Sephadex G-25로 정제하고 silicic acid 컬럼으로 분획하여 중성지질, 당지질, 인지질 그리고 콜레스테롤의 량을 각각 정량하였다. T.L.C.와 HPLC로 개별 성분을 분리, 정량한 결과 중성지질은 tripalmitate와 cholesteryl oleate로 구성되었고, 당지질은 esterified steryglycoside와 소량의 cerebroside, 인지질은 p.c, co, lp.c 및 p.e로 구성 되었음을 밝혔다. 결합당 성분으로서는 galactose만이 검출되었다. 지방산은 palmitate와 oleate가 대부분이었으며, 6종류의 sterol성분을 분리 확인하였다. 지질과 결합된 단백질의 아미노산도 분석하여 이들로부터 carotenoprotein의 본성을 추론하였다.

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코일형 샘플러와 이온크로마토그라피를 이용한 클린룸의 암모니아 측정 (Measurement of NH$_3$ in Cleanroom Using a Coil Type Sampler Coupled with Ion Chromatography)

  • 이응선;최성진;김혜영;김광영;유승교
    • 한국대기환경학회:학술대회논문집
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    • 한국대기환경학회 2002년도 추계학술대회 논문집
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    • pp.70-71
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    • 2002
  • 암모니아 가스는 일반환경에서 뿐만 아니라 첨단 산업인 반도체 제조공정에서도 가장 주목하여 관리하여야 할 대상이다. 반도체 공정에서 암모니아 가스는 T-Topping, 광학 현미경의 헤이즈 현상 등을 일으키는 원인으로써 꾸준한 농도 관리가 요구되고 있다. 또한 관리 기준 농도가 점점 강화되면서 일부 공정에서는 sub ppbv까지 신뢰성 있는 측정치 요구되고 있다. 현재 클린룸에서의 암모니아 농도 관리는 일부 자동화 기기를 사용하고 있으나, 대부분의 경우 임핀저 샘플링을 이용한 불연속적인 농도 관리가 이루어지고 있다. (중략)

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인간조직인자 세포외 부분의 효과적인 제조 방법 (An Efficient Method for Production of Extracellular Human Tissue Factor in Escherichia coli)

  • 유환구;박양진;이우일
    • 생명과학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.561-565
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    • 2009
  • 인간조직인자는 혈액응고인자 factor VII 과 복합체를 형성하며 연속적인 혈액응고 연쇄반응을 촉매하는 효소 활성체이다. 복합체 형성에 필수적인 이 조직인자의 세포 외 부분이, 기존의 융합 단백질 및 히스티딘 말단이 없는 새로운 발현 벡터에 의해 대장균 내에서 과량 발현 되었다. 봉입체 형태로 발현된 재조합 인간조직인자는 DEAE-Sephacel 크로마토그라피 기술을 적용하여 분리, 정제 및 구조적 복원이 동시에 시도 되었다. 정제된 재조합 단백질은 SDS-PAGE 분석에서 순수한 형태로 나타났으며, 생물학적 활성도 또한 기존의 조직인자와 거의 동등함을 보였다. 본 연구의 발현 및 정제 시스템은 이전의 보고에서 보여진 방법들에 비해 단백질 분해효소를 사용하지 않아 추가적인 크로마토그라피 과정이 필요 없어 좀 더 효율적이기 때문에 기존의 발현 시스템에 대해 대체할 수 있는 매우 유용한 방법으로 제공된다.

Detection and Characterization of Two Novel Forms of A Cytosolic Phospholipase $A_2$-Activating Factor in Bovine Brain

  • Park, Jae-Sin;Jung, Kwang-Mook;Jung, Sung-Yun;Na, Doe-Sun;Kim, Dae-Kyong
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1996년도 춘계학술대회
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    • pp.187-187
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    • 1996
  • 세포질에 존재하는 100 kDa Phospholipase $A_2$(cPLA$_2$)는 인지질의 sn-2 위치의 에스테르결합을 가수분해함으로서 Prostaglandin과 Leukotriene등 Eicosanoids 생합성의 전구체인 아라키돈산과 Platelet activating factor(PAF)를 생합성하는 전구체를 동시에 생성시키는 효소로 염증과 세포손상등에 중요한 역할이 기대된다. 본 효소의 활성화 기전을 규명하고자 하는 최근의 활발한 연구에도 불구하고 불명확한 점이 많은 것이 현실이다. 특히 세포를 자극하였을 때 유리되는 아라키돈산의 증가율과 세포를 파괴한 후 조제한 가용성분획에서 측정한 활성의 증가율과는 많은 차이를 나타냈다. 이러한 결과부터 cPLA$_2$ 효소 자체를 활성화시키는 어떤 인자를 가정하였다. 최근, PLA$_2$의 또다른 형태인 14 kDa의 분비성 PLA$_2$의 in vitro 활성을 증가시키는 인자가 동정되어 그 생화학적 특성이 규명되고 있으나 이 인자는 cPLA$_2$의 활성에는 아무런 증가효과를 나타내지 않았다. 본 연구자들은 소의 뇌조직에서 cPLA$_2$의 활성을 증가시키는 인자를 발견하고 그의 생화학적인 특성을 규명하였다. 돼지 비장에서 정제한 cPLA$_2$를 사용하였으며 소의 뇌 조직의 가용성 분획으로부터 본 활성화 인자를 동정하였으며 그 활성분획을 양이온 크로마토그라피로서 Mono S EPLC와 Superose 12 Sepharose gel filtration 크로마토그라피를 이용하여 더욱 분리한 결과 약 70 kDa과 25 kDa에서 각각 용출되었다. 이렇게 부분정제한 활성은 췌장에서 분리한 group I과 흰주의 group I과 흰주의 혈소판에서 분리한 group II PLA$_2$에 대해서는 아무런 증가효과를 나타내지 않는 반면, cPLA$_2$의 활성만을 약 5배 증가시켰다. 본 활성은 cPLA$_2$ 효소량의 증가에 따라 활성의 증가효과가 정차 감소하므로 화학량적인 반응(Stoichiometric reaction)일 것으로 예상되었다.

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콩 단백질의 대장균 발현과 정제 (Expression and Purification of Soybean Protein from Escherichia coli)

  • 오문헌;정재홍;노영희;이희봉
    • 한국식품영양학회지
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    • 제9권4호
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    • pp.404-408
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    • 1996
  • 콩 단백질은 글리시닌과 $\beta$-콘글리시닌을 주요 성분으로 한다. 영양성 및 가공 특성을 개선하기 위하여 유전자공학적인 방법을 시도하였다. 즉 $\beta$-콘글리시닌의 $\beta$-서브유니트를 유전자 클로닝하고 대장균에서 발현시켰다. 발현벡타는 pET 21d이며 플라스미드를 구축하여 E. coli BL21(DE3)에 형질전환 시켰다. 발현된 단백질은 균체 전체 단백질의 20%이며 가용화 상태로 축적되었다. 축적 발현단백질은 천연의 $\beta$-콘글리시닌과 동일항 트리머로 확인되었다. 정제는 황산암모늄 20~40% 분별침전, Q-Sepharose 이온교환크로마토그라피, Butyltoyopearl 소수성 컬럼크로마토그라피로 하였다. 이것은 콩 단백질의 특성을 규명하는데 필요한 대장균 대량 발현계를 확립하고 발현 단백질의 정제방법을 확립한 결과이다.

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고속액체크로마토그라피에 의한 계란중의 합성항균제 잔류량 (Residue of Synthetic Antimicrobial Agent in Eggs by High Performance Liquid Chromatography)

  • 김종배;이성국;김두희
    • 농촌의학ㆍ지역보건
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    • 제18권1호
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    • pp.55-63
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    • 1993
  • 고속액체크로마토그라피를 이용하여 계란 중의 합성항균제 설파메라진, 설파메타진, 설파디메톡신, 후라졸리돈, 죠렌 등의 잔류량에 관한 신속하고 간편한 동시분서법을 검토하였는데, 각 합성항균제 표준용액을 첨가하여 나타난 회수율은 설파메라진 81.2%, 설파메타진 87.6%, 설파디메톡신 92.5%, 후라졸리돈 86.1%, 죠렌 73.9%로 나타났으며, 검출한계는 설파메라진, 설파메타진, 설파디메톡신이 0.2ppb 수준으로 나타났고, 후라졸리돈과 죠렌 0.5ppb 수준으로 나타났다. 본 분석방법으로 대구지역 시판계란 84개에 대한 잔류량을 조사한 결과, 설파메타진 3개 계란, 설파디메톡신이 4개 계란에서 각각 0.005-0.008ppm과 0.012-0.019ppm 정도 검출되었으며, 설파메라진, 후라졸리돈, 죠렌은 모든 시료에서 검출되지 않았다. 이상의 결과로 추정해 볼 때 설파메라진, 설파메타진, 설파디메톡신, 후라졸리돈, 죠렌의 계란내 잔류정도는 비교적 안전한 수준으로 나타났다.

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Staphylococcus epidermidis urease의 정제 및 생화학적 특성에 관한 연구 (Purification and Characterization of the Staphylococcus epidermidis Urease)

  • 민선희;이만형
    • 생명과학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.581-586
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    • 2007
  • 본 연구에서는 피부상재균이며 기회병원균이기도 한 Staphylococcus epidermidis ATCC12228로부터 urease효소를 4단계 크로마토그라피 방법을 사용하여 1,127배 정제하고 그 생화학적인 특성을 규명하였다. 정제된 urease 효소는 SDS-PACE 전기영동분석 및 gel-filtration 크로마토그라피를 이용한 천연분자량 분석결과, 67, 16.1 및 12.7 kDa의 3개 subunit가 3량체로 회합되어 존재하는 것으로 나타났으며 catalytic unit 당 2.2개의 니켈 원소를 함유하는 것으로 측정되었다. 정제된 효소의 비활성은 993.8 U/mg, $K_m$값은 8.5mM로 각각 산출되었다.