Cyclosporin-A(CsA)는 장기와 조직 이식에 따른 거부반응을 조절하기 위해 사용되는 면역억제제로, 이식의학의 발달과 더불어 사용량이 증가하고 있다. CsA의 부작용중의 하나인 치은과증식은 30-50%의 빈도로 발발하고 있다. 최근 macrolide 계열의 항생제인 azithromycin을 이용하여 이런 부작용을 억제시킨다는 임상 보고가 있어서, 이를 실험적으로 확인하고자 하였다. 이를 위해 CsA를 투여한 적이 없는 환자에서 정상 치은조직을 채취, 치은섬유아세포를 배양하였다. 우선 CsA에 대한 치은섬유아세포의 반응을 보기 위해 다양한 농도($10^{-8}-10^{-10}$g/ml)로 처치하여, 세포 증식량과 교원질 합성량을 MTT assay와 Sirol Collagen Assay를 이용하여 측정하였다. 이에 반응을 보인 조건과 세포를 대상으로 다양한 농도($10^{-8}-10^{-10}$g/ml)의 azithromycin을 CsA와 동시 처치하여 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. CsA는 일부 치은섬유모세포의 증식을 증가시켰다. 그러나 Collagen 합성능에는 변화를 주지 않았다. 2. Azithromycin은 정상 치은섬유아세포의 증식능에 영향을 미치지 않았다. 3. Azithromycin은 CsA 에 반응을 보인 세포의 증식을 감소시켰으며, 이는 정상 수준과 유사하였다. 이상의 결과에서 azithromycin이 CsA에 의한 치은과증식 치료에 유익하다고 사료된다.
This study was investigated to observe the effect of Treponema denticola(TDC) and Treponema lecithinolyticum(TLC) on cultured human periodontal ligament cells. Several experiments were performed including MTT test for the inhibition effect of cell proliferation, LDH test for the cytotoxicity , gelatin zymography for the gelatinase activation and observation of cell morphology change using the phase-contrast microscopy. The results were as follows. 1. The effect of concentration on cell proliferation with time showed an inhibitory effect at high concentration $(150{\mu}g/well)$ for TLC and at low concentration( $9.4{\mu}gwell$ ) for TDC. 2. The effect of time on cell proliferation with concentration showed an inhibitory effect at $150{\mu}g/well$ on 2-day incubation for TLC and at $9.4{\mu}g/well$ on 2-day incubation for TDC. 3. The effect of heat-treated TDC and TLC on the inhibition of cell proliferation showed the difference in the heat-treated group compared to the non-heat treated group for TDC, whereas no difference was found for TLC. 4. The morphological changes which were observed from the phase-contrast microscopy showed the difference in the test group compared to the control group. The loss of spindle-like appearance, cell-to-cell detachment and inhibition of cell proliferation were observed. 5. There was no difference of the cytotoxicity effect between the test group and the control group in the LDH test. 6. The active form of progelatinase A with molecular weight 72kDa was activated in both TDC and TLC on the gelatin zymography. Regarding to the above results, TDC and TLC have an effect on periodontal ligament cells by playing an inhibitory role in cell proliferation and appears to activate progelatinase A which degrades type IV collagen.
The purpose of this study was to investigate the initial tissue change, to repair on the teeth & surrounding tissue under the intrusive orthodontic forces by use of elastic chain, through the microscopic findings. For this study, three young adult mongrel dogs were used, and were divied into three group : the control group was deliveried only casting crown and the experimental group 1 was equipped with energy chain during 1 week and experimental 2 group was deliveried using energy chain during 1 week and 3 weeks observation. All experimental groups and control groups were sacrificed to make the samples for microscopic findings on premolar teeth. All samples were examed and compared the histologic changes through the microscopic with H-E stain. The obtained results were as follows. 1. In hematoxylin-eosin stain of the control group, the periodontal ligament was constant width from apical third to cervical third of the root, and the periodontal fiber arrangement was horizontal or oblique in cervical third, oblique in middle and apical third of the root. 2. In Masson Trichrome stain of the control group, osteoblast and osteoclast appeared in cervical third of root, and bone resorption and new bone formation was observed in middle and apical third of the root. 3. In experimental 1, osteoclasts were increased highly, and hyperemia of blood vessels and new bone formation and bone resorption by reversal line in apical third of the root were seen. PDL width was increased apprarently from crest to apex of the root and more in apical third. 4. In experimental 2, osteoclasts and hyperemia of blood vessels were more increased than control material in apical third of the root. PDL width was increased more than control group in root apex, and was seen less than experimental 1. PDL arrangement was similar to experimental 1 and was mixed only in root apex. Therefore, in premolar intrusion of the young adult dog, there were increased osteoclast, hyperemia and dilation of blood vessel, resorption of alveolar bone and cementum and different arrangement of PDL in initial tissue change. There was not observed complete repair after remove intrusive force.
본 연구의 목적은 인간의 동맥경화증에서 Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis)와 인체 열충격단백 60의 T-세포 및 교차성 B-세포 epitope를 규명하고 수립된 T-세포주의 T-세포 주요조직적합체 양상을 파악하려는 데 있다. P. gingivalis 열충격단백-반응성 T 세포주와 환자의 혈청을 이용하여 P. gingivalis 열충격단백60 분자를 구성하는 104개의 중복성 합성 펩타이드의 T-세포 epitope과 B-세포 epitope을 규명하였다. 인체 열충격단백60에 대한 B-세포 epitope도 같은 방법으로 파악하였다. P. gingivalis, P. gingivalis 열충격단백60 또는 인체 열충격단백60에 대한 IgG 항체는 모든 동맥경화증 환자에서 상승하였다. P. gingivalis 열충격단백60의 3, 15, 24, 33, 45, 53, 64, 84, 88, 99번 펩타이드가 주요한 T-세포 epitope였고 이것들은 T-세포 및 B-세포 공동 epitope이기도 했다. 또한 인체 열충격단백60 교차반응 B-세포 epitope은 15, 29, 53, 56, 69, 74번 펩타이드로 판명되었다. 대부분 환자의 주요조직적합체는 $HLA-DRB1^{\ast}1504$와 $HLA-DZB1^{\ast}0603$으로 나타났다. 결론적으로 P. gingivalis 열충격단백60은 제 2급 주요조직적합제-제한적으로 분해되고 전달되었으며 이 단백질이 공통적인 T-세포 및 B-세포 epitope를 가지면서 동시에 인체 열충격단백60과 교차성 B-세포 epitope을 가지면서 동맥경화증의 면역조절기능에 관여한다고 볼 수 있다.
The purposes of this study is to evaluate the combination effects of TGF-${\beta}_1$ and PDGF-BB on the periodontal ligament cells to use as a regeneration promoting agent of periodontal tissue. Human periodontal ligament cells were prepared from the first premolar tooth extracted for the orthodontic treatment and were cultured in DMEM/100% FBS at the $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ incubator. Authors measured the DNA synthesis, total protein, collagen and noncollagenous protein synthesis according to the concentration of TGF-${\beta}_1$,(1,5ng/ml) and PDGF-BB (1,10 ng/ml) in combination. To explore further this delayed effect of TGF-${\beta}_1$, we preincubated human periodontal ligament cells with TGF-${\beta}_1$ for 4 or 24 hours before PDGF-BB stimulation. The results were as follows: The DNA synthetic activity was increased dose dependently by TGF-${\beta}_1$, PDGF-BB. The combination of TGF-${\beta}_1$ and PDGF-BB consistently enhanced the DNA synthetic activity to PDGF-BB alone. The ability of TGF-${\beta}_1$ to enhance DNA synthetic activity in PDGF-BB treated periodontal ligament cells was dose dependent. The maximum mitogenic effect was at the 5ng/ml of TGF-${\beta}_1$ and l0ng/ml of PDGF-BB. Preincubation of cell with TGF-${\beta}_1$ resulted in significantly greater response to PDGF-BB at all TGF-${\beta}_1$ concentration studied, and may be useful for clinical application in periodontal regenerative procedures. The total protein, collagen and noncollagen synthesis was increased dose pendently by TGF-${\beta}_1$, PDGF-BB. The % of collagen was slightly decreased according to the concentration of TGF-${\beta}_1$, PDGF-BB. The effect of TGF-${\beta}_1$, PDGF-BB were not specific for collagen synthesis since it also increased noncollagenous protein synthesis. This study demonstrates that PDGF-BB is major mitogens for human periodontal ligament cells in vitro, and supports a role for TGF-${\beta}_1$ as a regulation of the mitogenic and total protein formation to PDGF-BB in these cells.
The early tissue reactions in the periodontal tissues of the tension zones following the application of force (30gm) to the maxillary first molar teeth of the albino rats were studied by the light microscopy and electron microscopy The increase of periodontal fibroblasts was evident, particularly in 1 day survival period. Osteoblast differentiation and new bone formation on the alveolar bone surface were occurred from 1 day survival period. Mononuclear phagocytes occurred consistently and in relatively high number adjacent to and at some distance from blood vessel Extensive breakdown of collagen fibers was observed. The increase of the phagocytosis of collagen by the active fibroblasts was evident Also, collagen fibrils were sparse or lost near the macrophage.
임상적으로 널리 쓰이는 xylazine에 fentanyl과 azaperone이 첨가된 합제가 개발 되어 사슴에서 쓰이기 시작하였다. 개에서 이 마취제와 ketamine을 병용하였을 매의 마취효 과를 검토하였다. XFA와 ketamine의 병용마취하였을 매에는 혈청학적으로는 일시적인 과혈 당중을 보인 외의 유의적인 변화는 없었다. XFA 1.1 (Xylazine: 1.1 mg/kg, Fentanyl: 8 ${\mu}g/kg$, Azaperone: 64 ${\mu}g/kg$, )을 투여하였을 매는 ketamine의 농도가 중가함에 따라 진정시간과 회복시간이 길어지지 않았으며,반사반응이 중가하고 근강직이 나타나며 신음소리와 함께 머 리를 흔드는 ketamine의 부작용이 많이 나타났다. 그러나 XFA 2.2 01ylazine: 2.2 mg/kg, Fentanyl: 16 ${\mu}g/kg$, , Azaperone: 128${\mu}g/kg$, 를 투여하였을 때는 농도가 중가함에 따라 마취 시간이 길어지고 부작용도 적게 나타났다. 이상의 결과로 보아,XFA 2.2로 진정시킨 후,병용 투여하는 ketamine의 양으로 마취시간을 조절하는 것이 부작용을 줄이고 안전한 마취를 할 수 있는 유용한 방법이라고 사료된다.
The each rumen of six goats was incised and sutured with chromic catgut, polyglycolic acid and nylon. Tissue reaction to each suture materials was observed and comared at the 7th, 14th and 21st post-operative days. The predominent inflammatory cells around suture materials are macrophages, fibroblast and neutrophils. A few lymphocytes was infiltrated around suture materials. Infiltration of neutrophils was rapidly diminished but infiltration of macrophages, fibroblasts and lymphocytes were persisted. The overall grade of tissue reaction varid by suture materials. At the 7th post-operative days, tissue reaction to chromic catgut was most prominant and that of polyglycolic acid and nylon was moderate. At the 14th and 21st postoperative days, tissue reaction to each suture materials was not greatly different.
This study was designed to evaluate the expression of heat shock protein in tooth and surrounding tissue during the experimental movement of rat incisors, by LSAB(labelled streptavidine biotin) immunohistochemical staining for heat shock protein. Twenty seven Sprague-Dawley rats were divided into a control group(3 rats), and 6 experimental groups(24 rats), to which 75g of force was applied from helical springs across the maxillary incisors. Rats of experimental groups were sacrificed at 0.5, 1, 4, 7, 14 and 28 days after force application, respectively. And the periodontal tissues of a control group and experimental groups were studied immunohistochemically. The results were as follows : 1. In control group, the expression of HSP47 was rare in gingiva, dentin and cementum, and mild in periodontal ligament and alveolar bone. But it was more evident than that of HSP70. 2. The expression of HSP47 or HSP70 was rare or mild in dentin, cementum and odontoblast of experimental group, regardless of the duration of force application, which was not different from that of control group. 3. In experimental group, the expression of HSP47 got to the highest degree in periodontal ligament and alveolar bone at 4 days after force application, and then decreased. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 4. The expression of HSP70 began to increase at 12 hours after force application and got to the highest degree at 4 days, in the capillary of pulp and periodontal ligament. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 5. The expression of HSP70 in alveolar bone of experimental group was rare, which was similar to that of control group.
The purpose of this study was to investigate the changes about the cellular activity on DNA synthesis in the periodontal ligament of dog, in which experimental tooth movement was performed. A control and 5 experimental dogs, one and half year in age, were studied. Light force (50-75g) was applied by placing open-coil spring between left mandibular premolars ; heavy force (250-300g), between right mandibular premolars. Experimental dogs were sacrificed after infusion of bromodeoxyuridine(BrdU), at 12 hours, 1, 3, 7 and 14 days after force application, respectively. And the histologic and the immunohistochemical evaluation were performed on the obtained periodontal tissue around mandibular premolars, using anti-romodeoxyuridine antibody, which can indicate proliferating cells. The results were as follows: 1. The tearing of periodontal ligament and the vascular dilatation at tension side were observed in 12 hours, increasing until 3 days. After then it decreased; Such a finding was more evident in heavy force group than in light force group. 2. The hyalinization of the periodontal ligament and the activity of osteoclast at pressure side were observed in 12 hours, increasing until 3 days. But from 7 days on, it decreased; Such a finding was more evident in heavy force group than in light force group. 3. The BrdU expression in the control group was positive, mainly in the oral epithelium and the fibroblasts in the periodontal ligament, but negative in bone cells in periodontal ligament. 4. The BrdU expression in the experimental group was more positive in tension side than in pressure side; The expression was a little more positive in the periapical area than in the cervical area of tooth. 5. The BrdU expression in light force group was the highest in 1 day, after which it decreased; In heavy force group, it was the highest in 12 hours, after which it decreased. But in 14 days, there was no difference between the experimental group and control group.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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