농산물에 잔류되어 있는 16종의 유기염소제 농약들을 기체-액체 크로마토그래피(GLC)로 동시에 정량하기 위하여 필요한 전처리 과정인 용매추출과 불순물 제거(Cleanup) 처리에 대하여 조사 검토 하였다. 농산물로 부터 농약들을 $H_3PO_4$와 물을 가한 강산성(pH 1.5이하)의 actone용액으로 녹여낸 다음, petroleum ether를 분배 용매로 사용하여 농약을 추출시켰다. 추출물에서 용매를 증발시켜 날려보내고 ethylether-petroleum ether (6 : 94) 용리액으로 녹여서 650$^{\circ}$C에서 활성화 시킨 Florisil관을 통과시켜 불순물을 제거 하였다. Petroleum ether에 의한 추출효과는 94%이상으로 AOAC법 보다는 우수 하였고, Florisil관 크로마토그래피법에 의해 불순물이 제거되었다.
본 연구에서는 토양중에 존재하는 폴리브롬화 디페닐에테르 (polybrominated diphenyl ethers, PBDEs)를 동위원소희석법을 이용한 기체크로마토그래피/질량분석기-선택이온검색법에 의해 검출하는 분석방법을 소개하였다. 토양 중 PBDEs는 속실렛 장치로 추출하고 실리카와 플로리실 흡착제를 이용한 고체상 추출법을 비교하였다. 정제 후 추출물은 기체크로마토그래피/질량분석기-선택이온검색방법으로 분석하였으며, 동위원소로 치환된 4종의 PBDEs를 내부표준물질로 이용한 동위원소 희석법으로 8종의 PBDEs를 정량하였다. 속실렛추출 후 플로리실과 실리카 카트리지를 통한 회수율은 각각 30.8~110.8%, 44.4~110.7%이었다. 이 분석법의 검출한계는 0.04~0.3 ng/g로 나타났다.
본 실험에서는 에탄올로 추출한 Psidium guajava 잎과 컬럼크로마토그래피를 이용한 메탄올 분획물의 항산화 능력을 측정하기 위해 DPPH, ABTS 라디컬소거능법, 총 페놀, 플라보노이드법, SOD assay법을 활용하였다. 항산화 활성 결과에서 40, 60% 메탄올 분획물이 의미있는 측정값을 나타냈고, 두 분획물을 선정하여 HPLC와 핵자기공명(NMR)을 활용한 화학적 분석을 통해 주요 성분의 분리 및 물질탐색을 진행하였다. HPLC 정제를 통해 quercitrin (1)와 isoquercetin (2) 두 종류의 quercetin 유도체를 분리 및 구조 동정하였다. SOD assay 결과에서 컬럼크로마토그래피법을 활용하여 얻은 몇몇의 분획물과 단일물질로 분리한 화합물들은 추출물보다 향상된 항산화 활성을 보였다.
화재원인물질을 규명하기 위해 화재현장에서 수거된 물을 포함한 증거물로부터 석유류를 용매추출하여 기체크로마토그래피법으로 분석하였다. 다량의 수분을 포함한 증거물에서 석유류를 추출하기 위해, HPLC 용 n-hexane을 10.0 mL를 가하여 30분간 흔들어준 다음 일정시간 방치한 후 n-hexane 층을 분리하고 기체크로마토그래피에 주입하여 크로마토그램을 얻었다. 얻어진 시료의 크로마토그램과 시너, 휘발유, 난방용 등유, 보일러 등유 및 경유를 n-hexane에 첨가하여 만든 인공시료의 크로마토그램과 비교하였다. 시료의 크로마토그램은 비교적 끓는점이 낮은 시너와 휘발유의 크로마토그램과 확연히 차이가 났으며, 난방용 등유와 보일러용 등유는 머무름 시간에 따라 다른 피크 패턴을 보였다. 이에 비해 경유의 크로마토그램과는 유사한 피크패턴을 보였고, 시료에 일정량의 경유를 첨가한 후 측정한 시료의 크로마토그램에서는 특징적인 피크의 면적이 증가하는 현상을 관찰할 수 있어 시료에 포함된 석유류가 경유라고 예측할 수 있었다.
본 실험은 H-Y 항원 유전자 크로닝을 위한 기초연구로서 H-Y 항원의 특성을 규명하기 위하여 친화성 크로마토그래피에 의하여 H-Y 항원을 분리·정제하였다. 정소 추출액을 항체가 결합된 column에 결합시킨 뒤 10% acetic acid로 용출시켰다. 용출된 분획을 모아 농축한 후 HPLC와 SDS-PAGE를 실시하여 H-Y 항원의 분자량은 약 6,7000달톤 임을 알 수 있었으며 isoelectric focusing에 의하여 등전점(pI)은 5.0인 것으로 측정되었다. H-Y 항원에 대한 단일클론항체와 표지항원으로는 H-Y 항원-ABEI(aminobutylethyl isoluminol)를 사용하여 H-Y 항원 정량을 위한 화학발광면역분석법을 개발하였다. 항원항체 반응후 빛의 측정은 NaOH 존재하에서 microperoxidase/H2O2를 이용한 산화반응으로 실시하여 10초간 측정한 빛의 양을 적분하였다. H-Y 항원의 농도와 빛의 양과는 역비례하였으며 감도는 11.8ng/tube 정도이었다.
생강나무의 수피를 아세톤-물 (7:3)의 혼합용액으로 추출하여 에틸아세테이트용성과 수용성 화합물로 분리하였고 이중에서 에틸아세테이트용성 부분을 Sephadex LH-20과 TSK 40F로 충진한 칼럼크로마토그래피를 사용하여 5개의 화합물, 즉 (+)-catechin, (-)-epicatechin, quercetin 그리고 epicatechin-($4{\beta}{\rightarrow}6$-catechin 이량체와 epicatechin-($2{\beta}{\rightarrow}7$, $4{\beta}{\rightarrow}8$)-epicatechin 이량체를 단리 하였다. 단일물의 확인을 위하여 박층크로마토그래피를 실시하였으며, 화합물의 정확한 구조는 $^1H$-NMR과 $^{13}C$-NMR 스펙트럼을 이용하여 규명하였다.
나뭇잎으로부터 발생되는 저분자량 유기산을 이온크로마토그래피를 이용하여 분석하였다. 이 방법은 자연상태의 나뭇잎 (needle litter)을 유기용매의 추출 없이 그대로 이용할 수 있어서 사용하기에 편리하다. 본 논문에서는 이온 크로마토그래피의 사용방법과 침엽수잎(Pacific Silver Fir)의 부후정도에 따른 유기산의 종류와 농도의 변이를 간략하게 소개한다. 초기의 침엽수잎 여과액으로부터는 $C_2$에서 $C_4$까지의 아세트산(acetic acid), 프로피온산(propionic acid), 옥살산(oxalic acid) 그리고 포름산(formic acid) 등이 주종을 이루지만 부후정도가 커짐에 따라 방향핵을 가진 방향핵 유기산(aromatic organic acid)이 발생한다.
오배자는 한방에서 지사제 또는 지혈제로 이용되는 약재로 화학요법제와 유사한 효능을 갖는다. 또한 한의학에서는 항암제로서의 가능성에 대한 연구, 의학 분야에서 항산화 성분, 항혈전 효과에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 어류 질병 분야에서도 이런 특성을 적용하여 치료가 어려운 세균성 질병이나 바이러스성 질병을 예방하고 치료하기 위한 기초 연구로 추출 농도별, 추출 용매별 및 칼럼크로마토그래피법에 의해 얻어낸 분획물의 항균력을 시험하여 다음의 결과를 얻었다. 어병 원인 세균에 대한 오배자 열수 추출액의 농도별 항균력은 1,250 ${\mu}g$/disc가 8균주, 2,500 ${\mu}g$/disc가 9균주, 5,000 ${\mu}g$/disc가 9균주, 10,000 ${\mu}g$/disc가 12균주에 항균력을 나타내어 농도 의존적으로 나타났다.오배자 추출 용매별로는 에탄올 추출물이 15균주, 에틸아세테이트 추출물이 16균주, 부탄올 추출물이 12균주, 그리고 헥산 추출물이 7균주에 항균력을 나타내어 에틸아세테이트로 추출하였을 때 가장 항균력이 좋은 것으로 나타났다.에틸아세테이트 추출물의 실리카겔 칼럼 크로마토그래피법을 실시하여 얻어낸 8개의 분획물로 Streptococcus iniae KCTC3657에 대한 항균력을 시험한 결과, 분획물 4와 5가 가장 우수한 활성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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