• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.26 no.2
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• pp.105-110
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• 2002

The objective of this study was to determine the developmental competence of in vitro matured oocytes after intracytoplasmic sperm injection(ICSI) with epididymal spermatozoa. The ovaries were obtained from slaughtered small species dogs. Oocytes matured in vitro for 24 hrs were fertilized by ICSI with epididymal spermatozoa. After ICSI, one group of oocytes was activated with 2.0 mM dimethylaminopurine or 7% ethanol for 5 min. and second group was not activated. The follicular oocytes were cultured in synthetic oviductal fluid(SOF) and TCM-199 medium containing hormones and 10% FCS for 24~48 hrs in a incubator with 5% $CO_2$ in air at 38.5$^{\circ}C$. 1. Results of IVM showed that the percentage of oocytes reaching MII after 24 h and 48 hrs of incubation were significantly higher(p<0.05) after culture with 48 hrs(9/30, 30.0%) than that after culture with 24hrs(a/30, 26.7%). 2. Results of IVM showed that the percentage of oocytes reaching MII after 48 hrs of incubation were significantly higher(p<0.05) after culture with SOF media(10/30, 30.3%) than TCM-199 media (7/30, 23.3%). 3. The rate of cleavaged embryos to blastocyst obtained by ICSI treated activation oocytes was significantly higher(p<0.05) than that of nonactivation oocytes(5/16, 25.0% vs 1/13, 5.0%). 4. The rates of development of cleavaged embryos to blastocyst obtained by ICSI treated sperm of fresh, epididymal and frozen-thawed epididymal were 8/18(44.43%), 5/16(31.3%), 2/14(14.3%), respectively. and these values of frozen-thawed epididymal sperm injection were lower than fresh sperm injection.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2005.10a
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• pp.124-124
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• 2005

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2002.02a
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• pp.47-47
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• 2002

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2004.06a
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• pp.268-268
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• 2004

재래산양은 우리나라 고유의 유전자원으로서 첨단생명공학 연구에 매우 적합한 동물이다. 본 연구는 동물복제 및 형질전환동물 생산 등의 연구에 기초자료를 제공하고자 재래산양의 체내 및 체외유래 난자에 단위발생을 유도하여 회수난자의 조건, 활성화방법, 배양조건 등이 단위발생란의 체외발달율에 미치는 영향을 조사하여 최적의 배양조건을 확립하고자 실시하였다. 난자의 회수는 체중 15∼25 ㎏ 전ㆍ후의 성숙한 미경산 재래산양에 FSH와 PMSG를 사용하여 과배란을 유기하였다. (중략)

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2005.10a
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• pp.116-116
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• 2005

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2006.10a
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• pp.65-66
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• 2006

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.22 no.2
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• pp.105-108
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• 1995

본 연구는 혈청 무첨가 단순배양액인 CR1이 체외에서 생산된 소 수정란의 체외 배발생에 미치는 영향을 검토하고자 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 요약해보면, 1) 총 1250개의 체외성숙 난자로 부터 체외 수정결과 본 실험의 목적상 이용될 수 있는 1,025개 (82.0%)의 분할란 (>1세포기)을 얻을 수 있었으며, 체외배양 결과 배반포기와 부화율은 각각 27.1%와 20.2%였다. 2) CR1 배양액은 소난포란 (>1세포기)의 체외발생시 난관상피세포, 난구세포, 영양배엽세포 등의 체세포와 공동배양을 유도하지 않고서도 높은 배발생율을 얻을 수 있었으며, 이러한 결과로 미루어 볼때 CR1은 난자의 체외배양시 난자성장촉진 인자를 연구하는데 효과적으로 사용될 수 있다는 것을 시사한다.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.18 no.4
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• pp.257-263
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• 1995

소 체외수정란의 체외배양 체계는 현재 완전히 확립되지는 않은 상태로서 8∼16 세포기 발육억제현상, 수정란의 파편하 현상, 성장지연 등 여러 가지 문제점들이 현 배양체계에서 나타난다. 그러나 hepler cell들과의 공배양에 의해 이러한 문제점들은 상당히 극복되며 또한 체외발생의 촉진 및 공배양된 수정란의 이식에 의해 임신율도 향상된다. 현재 소 체외수정란의 공배양에는 난관상피세포가 가장 널리 이용되나 이러한 시스템은 몇가지 문제점이 있다. 즉, primary culture를 확보하기 위하여 신선한 조직을 주기적으로 채취해야 하며 따라서 난관채취에 시간이 소요되고, 불편하며 또한 공배양에 이용되는 세포들이 균일하지 않은바 난관상피세포에 따라 배 발생 촉진작용에 변이를 나타내기도 한다. 그러나 확립된 cell line을 이용할 수 있다면 이러한 난관상피세포의 이용에서 나타나는 문제점들이 해결될 수 있다. Buffalo Rat Liver cell은 이러한 목적에 이용될 수 있는 cell line 중의 하나로서 이들은 여러 가지 성장인자(growth factor)를 분비하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본고에서는 소 체외수정란의 공배양을 위한 BRL(Buffalo Rat Liver)cell의 이용성, 이용방법 및 이용에 있어서 고려하여야 할 요인들에 대하여 살펴보고자 한다.

• Journal of Embryo Transfer
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• v.18 no.2
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• pp.157-161
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• 2003

The study was carried out to investigate the effects of morphology, reproductive cycle, incubation time and activation of oocytes in vitro maturation of cats oocytes and development of IVM/IVF embryos. The results were summarized as follows : 1. The fertilization and developmental rate of fresh and salts-stored oocytes with and whithout cumulus cells were 65.7%, 17.1% and 28.6%, 8.6% and 57.1%, 13.3%, 23.3%, 3.3%, respectively. The rate of oocytes with cumulus cells(13.3%∼65.7%) was higher than that of denuded oocytes(3.3%∼28.6%). 2. The fertilization and developmental rate of oocytes recovered from ovaries collected at different stages of the reproductive cycle were 68.9%, 44.4%, 48.9% and 17.8%, 8.9%, 12.8%, respectively. 3. The fertilization and developmental rate of oocytes in vitro cultured at different time of incubation(24, 36 and 48 h) were 66.7%, 46.7%, 48.9% and 17.8%, 11.1%, 8.5%, respectively. respectively. The rate of oocytes incubated 24 h(66.7%) was higher than that oocytes incubated 36 and 48 h(46.7%∼48.9%). 4. The fertilization and developmental rate of oocytes treated activation and non-activation oocytes were 57.4%, 31.4% and 22.9%, 11.4%, respectively. The rate of oocytes treated activation was higher than that oocyte treat non-activation.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.16 no.3
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• pp.193-198
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• 1992

본 실험은 ICR계통 생쥐의 8세포배 및 상실배를 Vitrification(VS3) 동결보존액을 이용하여 초급속동결-융해를 실시하여 배반포배까지의 체외발생한 배반포배를 이식하였을 때 수태율에 미치는 영향을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 8세포배의 평형시간(3분 및 6분)에 따른 초급속 동결-융해후 배반포배까지의 체외발생율은 57.6% 및 59.5%여TEk. 2. 상실배의 평형시간(3분 및 6분)에 따른 초급속 동결-융해후 배반포배까지의 체외발생율은 64.4% 및 68.2%였다. 3. 8세포배와 상실배를 초급속 동결-융해를 실시하여 배반포배까지 체외발생한 배를 위임신되어진 수란쥐에 19개 및 20개를 이식하여 7필(36.8%)과 10필(50.0%)의 산자를 얻었다.