줄기세포는 난치병에 걸렸을 때 장기의 기능을 담당할 수 있는 세포를 재생해 낼 수 있게 한다. 줄기세포는 근래에 "21세기판 불로초"로 불리며, 무한히 증식 될 수 있는 자기 재생능, 정상염색체 유지 및 다양한 세포로의 분화 등 놀라운 특성으로 난치병, 노인성 질환 치료를 위한 치료제로 활용 중이다.
Lee, Na Nyum;Kim, Ji-Ah;Kim, Yong-Wook;Choi, Yong Eui;Moon, Heung Kyu
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.228-234
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2015
Using either the apical or axillary bud of the endangered species Abeliophyllum distichum Nakai, we tested the effect of bud position and culture method on shoot proliferation and rooting. In shoot proliferation, the axillary bud explant was more effective than the apical bud and the effect was fostered by BA treatment, whereas no differences were observed in shoot elongation by the explant position. Spontaneous rooting was observed in the MS basal medium and resulted in conspicuous differences in the explant position : more than 80% in apical bud explant and 28% in axillary bud explant was achieved, respectively. The positional effects were also observed in BA pre-treatments: generally vertical culture method appeared to be better in shoot proliferation, growth, and rooting than that of the horizontal culture method regardless of the BA pre-treatment duration. The highest shoot multiplication was achieved through the vertical culture method with axillary bud explant, whereas the best shoot elongation and rooting was obtained using the vertical culture method with the apical bud explant. Apical bud explant was superior to axillary bud explant in ex vitro micro-cuttings and revealed a significant difference in shoot growth and root development. The above results suggest that explant position and culture method influence the efficiency of micropropagation for a rare and endangered plant Abeliophyllum distichum.
In order to develop an efficient micropropagation technique effect of plant growth regulators (PGRs) affecting on shoot proliferation from shoot apex in Pyrus ussuriensis was tested. Generally, there was no conspicuous effect on shoot induction by the treatment of PGRs and one or two shoots/explant were induced when cultured on MS medium supplemented with BA and/or BA plus NAA. Both apical shoot necrosis and hyperhydric shoots were observed frequently in multiplied shoots, and callus was formed at the basal part of shoots. About 20% spontaneous rooting was achieved in growing shoots, however the proliferated shoots exhibited poor rooting rate in gelrite supported media. When we tried to ex vitro rooting of the shoot cutting, the shoot cuttings rooted up to 50% with 100 mg/L IBA application. The rooted plantlets grew normally after acclimatization in the greenhouse.
Multiple shoots were induced from in vitro shoot originated from winter bud of P. yedoensis from Jeju. Most explants grow in similar type among the five different media but affected by supplement of sucrose regardless of media. For mass-propagation various concentrations of BAP or $GA_3$ were treated in the medium respectively. BAP was very effective to produce multiple shoots and 3.5~9.5 shoots were formed on the explant. The shoots induced on the high levels of BAP have short internodes. No shoots were induced on the treatment of $GA_3$ but roots were induced on it. When $GA_3$ was supplemented with the medium containing BAP, multiple shoots were produced from the explants. The medium(WPM) containing with $0.5mg/{\ell}$ BAP and $4.0mg/{\ell}$$GA_3$ was most effective to produce multiple shoots. When the explants were cultured for 8 weeks, 39.5 shoots were developed in average.
The ultrastructural change of sciatic nerve and immunohistochemical changes of NGF, PCNA were studied at the transplanted segment of intravascular cultured neural stem cell in the rat sciatic nerve by 5 months after the sciatic nerve transection. The transplanted intravascular neural stem cells were differentiated into Schwann reals at the 20th day and these cells began to regenerate by the proliferation and hypertrophy. There were many remyelinating Schwann cells in the transplanted nerve in term of stimulation. According to NGF finding, we suggest preexisting Schwann cells may induce the differentiation of neural stem cells into regenerating Schwann cells. Electron microscopic changes were the remyelinating appearance, the increase of intraaxonal microtubules and enlarged mitochondria and contacting tell processes each other.
This study compared cell expansion and colony forming ability in human cord blood stem cells cultured ex vivo with two kinds of cytokine combinations, two kinds of media, presence or absence of fetal bovine serum (FBS) and two or three dimensional (2D or 3D) culture environments. Purified $CD34^+$ cells were cultured in the IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) and SFM (Serum Free Medium) containing a cytokine cocktail-I (coc-I) (EPO, GMCSF, SCF, and IL-3) or a cytokine cocktail-II (coc-II) (TPO, G-CSF, SCF, IL-6, and Flt3/Flk-2 ligand) with or without FBS. Generally, higher cellular and clonogenic expansion were observed in the coc-I cytokine condition, compared to coc-II cytokine condition. 3D (Methocult) and 2D (IMDM + coc-I + FBS) conditions gave the greatest cell ($2,258{\pm}456$ fold) and CFU (BFU-E: $652{\pm}19$, CFU-GM: $520{\pm}58$, CFU-GEMM: $339{\pm}100$ fold) expansions, respectively. In aspect of medium, IMDM was better than SFM, except for coc-II condition without FBS. In conclusion, 'IMDM + coc-I + FBS' and 'IMDM + coc-I' were the best CFU expansions on the occasion of all culture conditions. FBS and 2D conditions had affirmative effect on CFU expansion, generally. These data might provide a variety of notions about ex vivo expansion of hematopoietic stem cells.
Moon, Heung Kyu;Youn, Yang;Son, Sung Ho;Lee, Suk Koo;Yi, Jae Sun
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.82
no.1
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pp.26-33
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1993
In vitro shoot proliferation and rooting were tested for 2-0 seedlings of half-sib families of 4 plus oaks trees. Nodal segments having axillary buds from 37 families(16 of Quercus acutissima, 10 of Q. variabilis, 7 of Q. serrata, and 4 of Q. mongolica) were cultured on WPM(Woody Plant Medium) supplemented with 0.5 mg/l BA (6-benzyladenine) and 0.01 mg/l NAA(${\alpha}$-naphthalene acetic acid) and subcultured at 2-3 weeks of intervals fur 6 months. In vitro rooting was carried out on GD(Gresshoff and Doy) medium supplemented with 0.5mg/l IBA(indole butyric acid). The capacity for shoot proliferation and rooting was highly varied with families. Generally, white oaks(Q. serrata and Q. mongolica) showed poor response than black oaks(Q. acutissima and Q, variabilis) in shoot proliferation and rooting. Among the total of 37 families, 7 of Q. acutissima, each 2 of Q. variabilis, Q. serrata, and Q. mongolica revealed abilities for continuous shoot proliferation, and the others failed to proliferate. Rooting of the selected oak trees also greatly varied among the families. In Q. acutissima, rooting ratio ranged from 10.0%(CB 25. KG 4) to 89.8%(CB 18). Although 26.7% of KG 16 in Q. variabilis, 3.3% of JN 15 in Q. serrata were rooted, Q. mongolica was not rooted at all in this experimental conditions. No relationship between shoot growth and the rooting ability was observed. Present results suggest the possibility of large-scale micropropagation, but further studies on family differences, shoot-tip necrosis, and callusing of rooting junction are still required to develop reliable micropropagation systems.
This study was undertaken to develop an efficient propagation technique for mature Betula davurica. Using aseptic materials taken from in vitro culture, the effects of media and plant growth regulators on shoot proliferation and rooting were investigated. DKW medium turned out to be the best in shoot proliferation among the media tested. Whereas axillary buds were better culture material than apical buds in proliferation of shoots, apical buds were slightly better than axillary buds on shoot elongation. Neither 1 /2 MS nor WPM medium seemed to be suitable for shoot multiplication or elongation. When the explants were cultured on 1/2 MS medium, shoot elongation was retarded by forming big callus at the base. In the case of WPM, shoots could be formed normally, but they exhibited slow growing. NAA was so effective on in vitro rooting that more than 80% rooting could be achieved on half-strength DKW medium supplemented with 1.0 mg/L NAA after 4 weeks in cultures. Ex vitro rooting using elongated shoot was also applicable to rooting and acclimatization. Rooted plantlets were successfully acclimatized in an artificial soil mixture and grew normally. The results demonstrate that efficient mass propagation of mature B. davurica can be done through tissue culture.
Physiologically modified stem nodes derived from ex vitro and in vivo explants of hybrid aspen (Populus alba L.X P.grandidentata Michx. 'Crandon') were tested for their multiple shoot regeneration capacity using a broad spectrum dosage of cytokinins. Ex vitro derived stem nodes with excised axillary buds at the time of culture produced 11 to 13 multiple shoots on 20 to 30 $\mu$M zeatin containing Woody Plant Medium (WPM) after 6 weeks. Excision of axillary bud sprouts after 2 weeks of culture and culture of the remaining stem nodes on WPM with 1.0 to 2.0 $\mu$M BA or 10 to 30 $\mu$M zeatin produced 13 to 15 and 7 to 8 shoots per explant, respectively, Multiple tiny shoots were produced when in vivo derived stem nodes (on which all leaves were removed) were cultured on WPM with 30 to 50 $\mu$M 2iP or 20 to 50 $\mu$M zeatin. The greatest number of multiple tiny shoot proliferation (32 to 50 shoots per explant) were obtained when the explants were cultured on media containing 20 $\mu$M zeatin. Successful transplanting of these multiple shoots into the greenhouse and/or nursery was achieved.
Methods for shoot proliferation via pulse treatment onto the microshoots of Quercus acutissima, and ex vitro root induction using peat plug systems of the microshoots of 4 oak trees were described. Pulsing solution was prepared by the addition of BA and/or BA plus zeatin onto the aqueous WPM and sterilized distilled water. Using the solution, pulsing time was adjusted at different levels(0. 1, 2, 5. 9, and 24 hours). Although the effect of pulsing solution prepared by the addition of cytokinins onto the sterilized distilled water was slightly lower in shoot proliferation rate, a little higher in shoot elongation was observed compared with that of aqueous WPM. One hour of pulse treatment revealed best in shoot proliferation and its elongation, whereas the increment of pulsing time slightly suppressed the response. In addition, prolonged pulse time resulted high frequency of hyperhydric shoot appearance. Single treatment of BA was better in shoot proliferation than that of BA combination with zeatin, whereas the latter treatment usually showed rapid and healthy shoot growth. For ex vitro root induction using peat plug systems, black oaks(Q. acutissima and Q. variabilis) revealed excellent rootability compared with white oaks(Q. serrata and Q. mongolica). Shoot-tip necrosis of white oaks eras one of the big problems for survival. In this study, we discribed the effect of pulse treatment, successful ex vitro rooting system by the incorporation of peat plug, and the possibilities for the overcoming the obstacles on micropropagation of oaks.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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