• Title/Summary/Keyword: 조직염색법

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마이크로파에 의한 생체물질 고정효과

  • 손태호
    • The Proceeding of the Korean Institute of Electromagnetic Engineering and Science
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    • v.5 no.3
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    • pp.78-87
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    • 1994
  • 생물학 및 의학등의 생명과학에서는 현미경을 이용하여 생체물질 즉, 생체조직을 관찰하고 이에 대한 조직의 검사 결과를 판정하고 발표한다. 이때 필히 고정과정(fixation process)을 거쳐야 한 다. 즉, 생체조직중 조직의 구조, 특정 세포나 바이러스 및 효소등을 관찰할 때 고정과정을 거쳐 조직을 절편하고 이를 염색하여 현미경으로 검사하게 된다. 고정과정이란 생체물질을 안정화시키고 자기분해 혹은 부패를 방지하여 보존이 가능하도록 변화시키 는 과정으로, 조직내의 용해성 물질을 불용성 물질로 변형시키는 과정이다. 고정과정을 거친 생체조직 은 구조를 보존하고 있기 때문에 조직의 훼손이 없는 상태에서 절편이 가능하고 또한 염색상태를 좋게 하며 관찰시 contrast를 증진시킨다. 만약 고정과정을 거치지 않으면 물질의 세포막이 파괴되고 단백질 등의 물질이 용해되어 조직의 변형을 일으켜 제대로 조직을 관찰할 수 없게 된다. 고정과정에는 크게 화학적 고정법과 물리적 고정법이 있다. 화학적 고정법은 생체조직을 화학용액에 처리하는 방법이며, 물리적 고정법은 직접적인 열 혹은 초음파등으로 물질을 고정시키는 방법이다. 표 면과 내부의 열전도가 달라져 고정이 균일하게 되지 않는 단점을 가지고 있기 때문에 보통 2~6일의 고 정시간을 요하는 화학적 고정법을 사용하고 있다. 따라서 조직에 대한 총 검사시간이 최소 6일에서 최 대 12일이 요구된다. 병원등에서 조직검사의 결과가 늦게 발표되는 사유는 바로 화학적 고정법을 사용 하여 생체조직을 관찰하고 그 결과를 판정하기 때문이다. 본 고에서는 마이크로파를 이용하여 약 3시간만에 조직의 상태를 관찰할 수 있는 고정법을 소개한다. 마이크로파를 이용하여 조직을 고정하는 고정방법을 기존의 고정법과 비교하여 이들의 장단점을 나타 낸다. 본 연구자에 의해 개발된 마이크로파 고정기를 소개하고, 이를 이용하여 생체물질을 고정한뒤 절 편, 염색하여 현미경 관찰결과를 발표하여 본 연구의 방법이 기존 방법보다 우수함을 나타낸다.

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Expression of Sodium-Iodide Symporter (NIS) in Thyroid Nodules: Comparison of RT-PCR and Immunohistochemical Staining Methods (갑상선 결절에서 Sodium Iodide Symporter (NIS)의 발현: RT-PCR방법과 면역조직화학염색법의 비교)

  • Bae, Sang-Kyun;Lee, Kang-Dae;Chang, Hee-Kyung
    • The Korean Journal of Nuclear Medicine
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    • v.38 no.6
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    • pp.511-515
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    • 2004
  • Purpose: The sodium-iodide symporter (NIS) expression is an important factor in determining the sensitivity of radioiodine therapy in well-differentiated thyroid cancers. Several previous studies for the expression of NIS in thyroid tissues show diverse results. To investigate whether there is difference between methods in determining the expression of NIS in thyroid tissues of patients with thyroid nodules, we measured the expression ot NIS using two different methods (RT-PCR and immunoshistochemical staining) and compared the results. Materials & Methods: We measured the expression of NIS by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and also by immunohistochemical staining using anti-NIS antibody in thyroid cancers and other benign thyroid diseases. We compared the results of each method. We included 19 papillary carcinomas, 1 follicular carcinoma, 7 medullary carcinoma, 4 adenomas and 7 nodular hyperplasias. Results: By RT-PCR analysis, 10 of 19 papillary carcinomas expressed NIS, but 1 follicular cancer didn't express NIS. By immunohistochemical staining, 15 of 19 papaillary carcinomas express NIS, but 1 follicular lancer didn't express NIS. There was a significant correlation between the semiquautitative results of RT-PCR and immunohistochemical staining of NIS expression. (p<0.01) Conclusion: Our data demonstrated that the expression of NIS in thyroid cancers and other benign diseases investigated by RT-PCR and immunohistochemical staining correlated well each other. However, by immunohistochemical staining, more NIS expression was found.

Detection of Mycobacterium tuberculosis by PCR from Trace Clinical Specimens and Paraffin-embedded Tissues (임상가검물과 파라핀 포매 조직에서 PCR법을 이용한 결핵균의 검출)

  • 김은중;최우순;황석연
    • Biomedical Science Letters
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    • v.6 no.1
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    • pp.55-63
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    • 2000
  • This study has been carried out to investigate the sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) method over conventional acid-fast bacilli (AFB) staining and/culture methods for the detection of Mycobacterium tuberculosis from trace body fluid and paraffin-embedded tissues (PET) specimens. A total of 65 cases were employed for the AFB staining and culture test, and a total of 50 cases were subjected to PCR and histopathological analysis. Among the specimen showing negative reaction to AFB staining, 12.1% were positive to PCR and 3.7% of the specimen representing negative result to culture test showed positive reaction to PCR. In addition, 20.0% of the specimen with AFB negative showed positive reaction to PCR. From these results, it could be concluded that PCR method overwhelms AFB staining and culture tests in sensitivity and specificity to M tuberculosis detection.

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Study on the Change of Catecholamine, Arginine Vasopressin and V1 Vasopressin Receptor Release in the Stressed Rat Brain

  • Kim, Tae-Gyun;Kim, Jee-Hee;Kim, Seung-Hee;Kang, Seog-Youn;Ki, Kyung-Chung;Huh, Young-Buhm;Lee, Song-Deuk
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1997.04a
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    • pp.85-85
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    • 1997
  • 스트레스가 유발된 랫드의 대뇌에서 Vasopressin-catecholamine pathway의 활성도를 알아보기 위해 면역화학염색법으로 vasopressin 호르몬의 분비와 catecholamine의 생성변화를 tyrosine hydroxylase (TH) 효소의 발현변화로 규명하고, arginine vasopressin (AVP)과 V1 vasopressin receptor의 유전자 발현변화를 in situ hybridization 방법을 이용하여 살펴보았다. 수컷 SD rat를 7시간동안 stress cage에 넣어 16$\pm$1$^{\circ}C$의 물에 수침구속 스트레스를 준 후 대조군과 함께 관류고정하여 brain을 적출하였다. Brain의 hypothalamus 부위를 중심으로하여 동결절편하여 면역조직화학 염색과 in situ hybridization을 시행하였다. TH 면역조직화학 염색에서 대뇌의 줄무늬체 부위의 꼬리조가비핵에서와 시상하부 부위의 내측등쪽시상하부와 흑색질부위에서 스트레스군이 대조군에 비해 TH 면역염색성이 증가되어 관찰되었으나 시상하부 부위의 시삭위핵, 뇌실주위핵, 뇌실옆핵에서는 두 군간의 큰 면역염색성의 차이는 보이지 않았다. AVP 면역조직화학 염색에서는 시삭위핵에 많은 수의 AVP 양성 신경세포체들이 밀집되어 있으며 뇌실옆핵에서는 스트레스군에서 AVP 면역염색성이 약간 증가되어 관찰되었으나 신경섬유의 분포양상은 비슷하였다. 중간융기에서는 모두 강한 염색성의 신경섬유들이 관찰되어 두 군간에 큰 차이는 없었다. AVP 유전자에 대한 in situ hybridization 결과 시삭위핵의 신경세포에서 AVP mRNA 양성반응을 관찰할 수 있었으나 다른 시상하부핵에서는 관찰할 수 없었으며, V1 vasopressin receptor에 대한 in situ hybridization 결과는 두 군의 대뇌에서 모두 양성반응을 관찰할 수 없었으며 V1 vasopressin receptor 유전자의 조직별 발현정도와 스트레스에 의한 발현량 조절을 관찰할 필요가 있다고 사료된다.

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Fluorescence Microscopic Diagnosis of Mycoplasma Infections in Jujube, Mulberry and Periwinckle Plants (형광현미경적 기법에 의한 대추나무, 뽕나무 및 일일초의 마이코플라스마 감염진단)

  • Bak Won Chull;La Yong Joon
    • Korean Journal Plant Pathology
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    • v.1 no.1
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    • pp.12-16
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    • 1985
  • Attempts were made to evaluate the efficacy of three fluorochromes, i.e., DAPI (4'-6-diamidino-2-phenylin-dole-2HCl), aniline blue and quinacrine(quinacrine mustard dihydrochloride) for the detection of mycoplasma infections in jujube (Zizyphus jujuba), mulberry (Mows alba) trees and periwinckle (Catharanthus roseus) plant by fluorescence microscopy. Stem sections from these plants infected with mycoplasma-like organisms (MLO) produced distinct fluorescence in the phloem when stained with DAPI, aniline blue or quinacrine, while fluorescence was absent in the healthy plants. The use of these fluorochromes provided simple and efficient techniques for the diagnosis of MLO infections. IOf the three fluorochromes tested, DAPI was found to be most efficient.

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Fixation and Histochemistry of Biological Tissues Using the Microwave Fixator Equipped with Infrared-Temperature Sensor (적외선 온도감응기를 장착한 마이크로파 고정기에 의한 생체조직 고정효과와 조직화학적 특성)

  • 신길상;민소연;김완종;손태호
    • The Korean Journal of Zoology
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    • v.38 no.3
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    • pp.417-425
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    • 1995
  • The present study was carried out to investigate the effect of microwave fixation in comparison with that of chemical fixation in preparing the microscopic samples. The microwave fixator was equipped with infrared-temperature sensor, and that was designed to compensate air temperature in the microwave fixator. In the microwave fixation, rat tongue was well preserved in terms of muscular fasciculus and pancreas stained by Feulgen reagents showed clear reaction products in the nucleus. Reaction products by PAS method in duodenal villi appeared specifically at the goblet cells. In electron microscopy, pancreatic cellular components such as secretory granules and collagen bundles were well preserved in both fixations. In aspect of histochemical reaction and electron microscopy, high quality was due to the protein content of microwave fixed specimen. The microwave fixation method saved total duration engaging microscopic preparation.

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Age Identification by Restoration of Red Ginseng (원형복원에 의한 홍삼의 연근 판별)

  • Jang, Se-Young;Shin, Ju-Sik;Seok, Young-Seon;Han, Yun-Kyung;Chung, Chan-Moon
    • Journal of Ginseng Research
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    • v.30 no.3
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    • pp.153-157
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    • 2006
  • This study was carried out to identify the age of red ginseng using the stem vestige counting methods and annual ring staining method. The samples were soaked, humidified, and restored before identifying the age. Root tissue was removed from rhizome after soaking treatment in $50^{\circ}C$ water for three days. It was found to be useful for precise identification of age. Safranine staining for counting the annual ring in sliced ginseng was not useful due to the poor staining. However, annual ring was clearly revealed whenr humidified sliced ginseng or soaked sliced ginseng were dried mechanically. These two method was useful to identify the age of red ginseng.

Effect of Fixing agents for Mud Dyeing (머드염색에서 고착제의 효과)

  • Kim, Tae-Kyung;Kim, Jin-Soo
    • Proceedings of the Korean Society of Dyers and Finishers Conference
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    • 2011.11a
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    • pp.64-64
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    • 2011
  • 머드는 알루미늄, 철, 마그네슘 등의 미네랄이 풍부하여 원적외선 방사율이 높고, 미량 포함된 단백질과 비타민은 피부의 세포조직을 강화하고 탄력성을 주며, 항균, 소취 등의 기능을 보유하고 있다. 이러한 유익한 기능을 가진 머드를 매일 사용하는 면타올에 적용하려 하나 무기 염재인 머드는 섬유와 친화성이 없어 일반 염료처럼 고농도로 섬유에 염색되지 못하고 있다. 본 연구에서는 섬유의 촉감에 영향을 미치지 않으면서 머드의 염색농도를 높이기 위해, 4종의 고착제를 이용한 염색법을 검토하였다. 먼저 식물성 단백질액으로 면타올을 전처리하고 나노입자의 머드액를 사용하여 염착시킨 경우가 가장 진하게 염색되며, 염색견뢰도 측정 결과 세탁과 땀에 모두 우수한 것으로 나타났다.

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마우스 및 랫트의 정상조직과 종양성 병변에서의 Nucleolar Organizer Regions (NORs)

  • 김성호;김태환;장자준
    • Environmental Mutagens and Carcinogens
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    • v.10 no.2
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    • pp.135-145
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    • 1990
  • Silver-binding nucleolar organizer regions (Ag-NORs)염색법을 이용하여 in vivo 및 in vitro에서 발암과정과 관련된 세포증식능을 검토하였다. A/J마우스에 benzo (a) pyrene을 투여하여 유발된 폐선종, 폐선암 및 Sprague-Dawley랫트에 dimethylbenz (a) anthracene투여에 의해 발생된 유선의 선암세포에서 Ag-NORs의 염색상태를 정상 조직과 비교하여 또한 정상마우스 섬유모세포인 NIH3T3에서의 Ag-NORs의 수 및 DNA 증식 억제물질인 caffeine에 의한 변화를 관찰하였다. 은친화성 NOR과련 단백질은 핵내 흑색의 반점으로 나타났으며 정상 폐조직의 세포당 Ag-NORs 수치는 0.87+0.01였으며 양성종양인 폐선종세포 및 악성종양인 폐선암세포에서는 각각 2.33+0.02, 2.56+0.45 정상 유선조직의 세포당 Ag-NORs수치는 1.21+0.16였으며 악성종양인 선암세포는 3.91+0.11로써 종양성 병변에서 유의한 증가를 보였다 (P<0.005).

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Expression of Epidermal Growth Factor Receptor in the Inflamed Gingival Epithelium and the Dental Follicle (염증성 치은 상피와 치낭의 표피성장인자 수용체의 발현 및 실험적 치아이동에 미치는 영향에 관한 연구)

  • Kim, Young Ho;Bae, Chang
    • The korean journal of orthodontics
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    • v.27 no.2
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    • pp.349-357
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    • 1997
  • Epidermal growth factor(EGF), a single chain polypeptide of 53 amino acids with a molecular weight of 6,045 Da, was first isolated from the male mouse submandibular glands. EGF stimulates cellular proliferation and differentiation in several tissues and accelerates the rate of wound healing. EGF is bound to the specific receptor(EGFR) on the cell membrane of its target cell. EGFR is a transmembrane glycoprotein with a molecular weight of 170,000 Da and is detectable on a large variety of cell types and tissues. The authors investigated the expression of EGFR in the normal and inflamed human gingival epithelium to study the role of EGFR in the inflammation of the gingival epithelium, and the expression of EGFR in the dental follicle by using in situ mRNA hybridization and immunohistochenistry. The results weree as follows : 1. The expression of EGFR mRNA in the normal gingival epithelium on in situ mRNA hybridization was mainly localized on the basal cell layer, and the spinous layer was weakly positive The granular and cornified layers were negative 2. The expression of EGFR protein in the normal gingival epithelium on inmunohistochemistry was localized on the cornified and granular layers, and the spinous layer was weakly positive. The basal cell layer was completely negative 3. The expression of EGFR mRNA in the inflamed gingival epithelium on in situ mRNA hybridization was evenly and homogeneously distributed in the whole layers of the gingival epithelium except the cornified layer. The staining intensity appeared to increase progressively from the basal cell layer to the cornified layer. 4. The expression of EGFR protein in the inflamed gingival epithelium on immunohistochemistry was evenly and homogeneously distributed in the whole layers of the gingival epithelium. The staining intensity appeared to increase progressively from the cornified layer to the basal cell layer. 5. Strong positive reaction was seen in the epithelial cell rests of Malassez, whereas only background staining was seen in other cells of the dental follicle. In conclusion, the up-regulation of EGFR in the inflamed gingival epithelium and the high amounts of EGFR in the epthelial cell rests of Malassez in the dental follicle can be regarded as responses to the possible damages to the oral environment to maintain the homeostatic conditions.

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