Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2012.05a
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pp.133-134
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2012
후성유전은 DNA 염기서열이 변화하지 않고 DNA의 메틸화(methylation)및 히스톤 단백질의 변형(modification)등의 후천적 과정에 의해 유전자 발현이 조절되는 현상이다. 특히 DNA 메틸화 정도에 대한 분석은 후성유전을 이해하는 중요한 접근방법 중 하나이다. DNA 메틸화 패턴 분석을 위하여 노화관련 109개 유전자들의 단백질 상호작용 네트워크를 구축하였으며 -3000bp ~ +200bp 사이에 있는 DNA 염기서열 정보를 추출하여 기존에 알려진 메틸화 저항성 (Methylation resistant) 모티프를 네트워크로 구축하였다. 메틸화 모티프기반 단백질 네트워크에서는 기존 단백질 네트워크보다 더 복잡한 구조를 이루고 있었다. 이러한 구조는 동일한 메틸화 모티프들이 여러 유전자들의 활성을 조절할 것으로 추측되며 복잡한 모티프들을 분석하기 위한 방법으로 이용될 수 있을 것이다.
본 장의 주제인 재조합 유전자의 발현 증대를 위하여는 우리가 알고 있는 대부분의 생명현상에 대한 지식들이 응용될수 있을 것으로 일단 믿어진다. 그러나 그 지식들은 하나의 장으로 모아지기에는 너무나 방대하며 또한 그 각각의 지식들을 어떻게 서로 조화시켜 유전자 발현증대를 꾀할 것이냐 하는 것은 상당한 노력이 더 필요할 것이다. 여기에서는 이미 그 응용이 가능하였던 내용들을 기초로하여 유전자 발현조절에 대하여 알고 있는 지식들을 어떻게 재조합 유전자 실험에 응용하여 그 발현증대를 시도할 수 있겠는가에 대하여 기술해 보고자 한다.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.65-65
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2003
Serotonin(5-hydroxytriptamine, 5-HT)은 biogenic amlne류 신경전달물질로써, 다양한 생리조절활성을 갖고있다. 생식과 관련된 5-HT 기능으로 최근 사정 기능의 조절 가능성이 제시되었는데, 항우울제로 흔히 사용되는 selective serotonin reuptake inhibitor(SSRI) 계 약물을 장기 투여할 때 Premature ejaculation이 개선된다는 임상적인 증거들이 보고되었다. 본 연구는 수컷 흰쥐를 사용하여 생식기관, 특히 사정과 관계되는 기관들에서의 5-HT 수용체 아형들의 유전자 발현 여부와 그 조절 기작을 조사하였다. 흰쥐 수컷의 생식장기들인 고환, 부정소, 정관, 정낭에서 사정현상에 관여하리라 추정되는 세로토닌 수용체 아형들(type 1A, 1B, 2C)의 유전자 발현을 RT-PCR과 Southern blot으로 확인하였다. SSRI(sertraline)을 흰쥐에 매일 투여하는 모델(25mg/개체, 2주간)에서 1A 아형의 발현의 경우 정낭에서는 감소하였으나 정관에서는 증가하였고, 1B 아형의 발현은 두 장기에서 공히 증가하였다. 고환 제거후 testosterone(T) 보충 실험 모델을 사용한 실험에서, 정낭에서의 1A와 1B 발현은 T 보충에 의해 감소하였고, 정관에서는 큰 변화가 없었다. 한편 고환, 정낭과 정관에서의 세로토닌 수용체 아형 1A와 1B의 발현은 사춘기의 개시와 함께 증가하였다가 이후 점차 감소하는 경향을 보였다. 본 연구 결과는 사정 현상에 있어서 말초성 세로토닌 시스템이 중요한 역할을 담당할 가능성을 시사하는 것으로써, (i) 고등 포유동물에서의 사정 기작의 조절에 대한 과학적인 이해를 증진시키고, (ⅱ) 세로토닌 수용체 아형간의 특이한 발현과 작용에 대한 이해를 통해 보다 효과적인 사정 부전 치료법 개발을 시도할 수있고, (ⅲ) ontogeny와 sex steroid 의존성에 관련된 연구 시도는 노화와 관련된 사정능력의 변화와 같은 남성과학 분야로의 접목을 기할 수 있다고 사료된다.
The present study was aimed at investigating the metabolic regulation of insulin-like growth factor-I(IGF-I) expression in fasting animals. The expression of IGF-I gene was determined by a solution hybridization/RNase protection assay using total RNA from control, 4d-fasting, and 2d-fasting-refed rats. The levels of IGF-I transcripts were reduced in 4d-fasting than in control by decreasing its transcriptional rate, which was measured through nuclear nun-on assay. DNase I footprinting, which was performed using nuclear extracts from fasting rat, demonstrated protein binding to a sequence that extended from +179 to +210 (termed region B). These data suggest that the expression of IGF-I is transcriptionally regulated through DNA-liver enriched protein binding in a sequence which is located downstream from major transcription initiation site of IGF-I gene.
Cellular FOS(c-fos) protein is a transcription factor that forms heterodimers mostly with c-jun family and stimulates the transcription of genes containing AP-1 regulatory elements. This c-fos expression can control growth and differentiation of various precursor cells including myoblasts. The controls by c-fos gene have been identified for affecting skeletal muscle fiber traits which are the key determinants of meat quality in pigs. As a first step for identifying the relationship between c-fos gene and meat quality traits in cattle, we fully sequenced 1,443 bp of Hanwoo c-fos mRNA and analyzed expression patterns from various organs and muscle tissues. The sequence identities of Hanwoo c-fos with that of human, pig and mouse showed 89.8%, 93.3% and 87%, respectively. Analyses of the northern blot showed high c-fos expressions were obtained in spleen and rib muscle from 7 organs and 9 different parts of muscles investigated. These results presented here can be used as a valuable marker for meat quality related traits in cattle with further verification.
The retinoic acid (RA) plays an important role in the growth and development of many cells, and bioactive RA concentration is regulated by several enzymes, including CYP26A1. The expression of the CYP26A1 gene is regulated by RA, and the CYP26A1 gene is one of the candidates for RA-responsive genes. Although CYP26A1 genes are cloned from several animals, cloning of the CYP26A1 gene from cows has not been reported yet. The promoter region of CYP26A1 from cows was cloned by PCR and analyzed by sequence alignment with human and mouse CYP26A1. The RA-responsive element (RARE), DR-5 (ttggg), was located in this region and was perfectly conserved. The promoter region of bovine CYP26A1, which contains DR-5, was ligated to the luciferase reporter gene on transient transfection assays. The expression of CYP26A1-Luc promoter was activated by ATRA treatment in lung-derived mtCC cells. Co-transfection with RAR-α or -β with ATRA significantly activates the expression of CYP26A1-Luc promoter; however, it was less effective with either RAR-γ or RXR-γ. In addition, the endogenous gene expressions measured by Q-RT-PCR in mtCC cells were not significantly affected by ATRA treatment for 2 days; however, the expression of the endogenous CYP26A1 gene was diminished sharply at day 3 with ATRA treatment. In conclusion, the promoter region of bovine CYP26A1 contains conserved DR-5 RARE, which functions as a binding site for RAR-α or -β, and it is involved in the regulation of CYP26A1 gene expression and the control of RA signaling in mtCC cells.
Ndimukaga, Marc;Won, Kyunghye;Truong, Anh Duc;Song, Ki-Duk
Korean Journal of Poultry Science
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v.47
no.1
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pp.9-19
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2020
Avian influenza (AI) viruses are highly contagious viruses that infect many bird species and are zoonotic. Ducks are resistant to the deadly and highly pathogenic avian influenza virus (HPAIV) and remain asymptomatic to the low pathogenic avian influenza virus (LPAIV). In this study, we identified common differentially expressed genes (DEGs) after a reanalysis of previous transcriptomic data for the HPAIV and LPAIV infected duck lung cells. Microarray datasets from a previous study were reanalyzed to identify common target genes from DEGs and their biological functions. A total of 731 and 439 DEGs were identified in HPAIV- and LPAIV-infected duck lung cells, respectively. Of these, 227 genes were common to cells infected with both viruses, in which 193 genes were upregulated and 34 genes were downregulated. Functional annotation of common DEGs revealed that translation related gene ontology (GO) terms were enriched, including ribosome, protein metabolism, and gene expression. REACTOME analyses also identified pathways for protein and RNA metabolism as well as for tissue repair, including collagen biosynthesis and modification, suggesting that AIVs may evade the host defense system by suppressing host translation machinery or may be suppressed before being exported to the cytosol for translation. AIV infection also increased collagen synthesis, showing that tissue lesions by virus infection may be mediated by this pathway. Further studies should focus on these genes to clarify their roles in AIV pathogenesis and their possible use in AIV therapeutics.
Kim, Tae-Min;Yeo, Ji-Young;Park, Chan-Sun;Rhee, Moon-Soo;Jung, Myeong-Ho
Journal of Life Science
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v.19
no.8
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pp.1159-1163
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2009
It has been postulated that endoplasmic (ER) stress is involved in the development of several diseases. However, the detailed molecular mechanisms have not been fully understood. Therefore, we characterized a genetic network of genes induced by ER stress using cDNA microarray and gene set expression coherence analysis (GSECA), and identified gene function as well as several transcription regulators associated with ER stress. We analyzed time-dependent gene expression profiles in thapsigargin-treated Sk-Hep1 using an oligonucleotide expression chip, and then selected functional gene sets with significantly high expression coherence which was processed into functional clusters according to the expression similarities. The functions related to sugar binding, lysosome, ribosomal protein, ER lumen, and ER to golgi transport increased, whereas the functions with mRNA processing, DNA replication, DNA repair, cell cycle, electron transport chain and helicase activity decreased. Furthermore, functional clusters were investigated for the enrichment of regulatory motifs using GSECA, and several transcriptional regulators associated with regulation of ER-induced gene expression were found.
Treatment with anticancer drugs changes the expression of multiple genes related to cell proliferation, migration, and drug resistance. These changes in gene expression may be connected to regulatory networks for each other. This study showed that doxorubicin treatment induces the expression of oncogenic FosB and decreases the expression of oncogenic SETDB1 in A549 and H1299 human lung cancer cells, which are different in tumor suppressor p53 status. However, a small difference was detected in the quantitative expression of those proteins in the two kinds of cells. To examine the potential regulation of SETDB1 and FosB by p53, we predicted putative p53 binding sites on the genomic DNA of SETDB1 and FosB using a TF motif binding search program. These putative p53 binding sites were identified as 18 sites in the promoter regions of SETDB1 and 21 sites in the genomic DNA of FosB. A luciferase assay confirmed that p53 negatively regulated the promoter activities of SETDB1 and FosB. Furthermore, the results of RT-PCR, western blot, qPCR, and immunostaining experiments indicated that the transfection of exogenous p53 decreases the expression of SETDB1 and FosB in H1299 cells. This indicates that p53 negatively regulates the expression of SETDB1 and FosB at the transcriptional level. Collectively, the downregulation of SETDB1 and FosB by p53 may provide functional networks for apoptosis and for the survival of cancer cells during anticancer drug treatment.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.33-33
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2003
Lipoprotein lipase (LPL)은 지방축적과 대사에 있어 중요한 효소로서 지방조직과 근육 내로의 지방산 유입을 조절하며, 여러 조직에서 합성되고, 조직 특이적인 방법으로 동물의 생리상태, 영양상태 및 발달단계에 따라 유전자 발현이 조절되는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 어류의 체지방 축적과 대사과정을 이해하고 성장 및 경제형질 관련 DNA marker를 확보하기 위한 1차적인 연구로서, 한국산 선발계통 및 일본산 양식계통과 이들 두 계통간 잡종 참돔 집단을 이용하여 LPL 유전자 내의 다형성을 탐색하고 분석하였다. PCR-RFLP 분석을 실시하여 참돔 LPL 유전자 exon 2번을 포함하는 영역에서 3개의 (Msp I, Alu I 및 Hsp92II) 다형성을 확인하였고, 각 집단간 대립유전자의 빈도를 분석하였다. Exon 2번에서 관찰된 Msp I 다형성은 염기치환 (C$\longrightarrow$G)이 일어난 형태로서 아미노산 서열에는 변화가 없는 silent mutation 이었으며, 대립유전자의 빈도를 분석한 결과, 각 집단간 뚜렷한 차이는 없었다. Alu I 및 Hsp92II 다형성은 intron 영역에서 발견되었으며, Alu I 다형성으로 인한 4개의 대립유전자형 중 D 대립유전자는 한국산 선발 계통과 한국산 선발계통을 포함하는 교배집단에서만 검출되었다. 이 후의 연구에서는 참돔 LPL 유전자의 exon 영역에 존재하는 다형성을 탐색하고, 형질과의 연관성 및 지방축적 기능과의 관련성 등을 분석하고자 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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