The lectins were separated from Korean and Chinese mung bean seeds finally via chromatography using Sephadex G-100 and their biochemical features were studied and compared. They showed no hemagglutination with human red blood cells regardless of trypsin treatment and showed hemagglutination with only trypsin treated rabbit red blood cells. The molecular weights of two lectins were identified as 54 kDa and 28 kDa by SDS-PAGE. It was found that while the optimal reaction temperature of the lectin from Korean mung bean was $60^{\circ}C$, that of the lectin from Chinese mung bean seeds was $50^{\circ}C$. It was found also that the most thermal stable temperature of the seed lectin from Korean mung bean seeds was $50^{\circ}C$ and the lectin from Chinese mung bean was $40-50^{\circ}C$. The lectin from Korean mung bean seeds showed the highest activity at pH 3.2 and the lectin from Chinese mung bean showed the highest activity at pH 6.2. It was identified that when treating a denaturant, thiourea and guanidine-HCl resulted in no hemagglutination, so they induced denaturalization. It was identified also that there was no hemagglutination with urea, so it did not induced denaturalization. They showed no septicity to 6 types of carbohydrates including D-glucose. In addition, the lectins from the two mung bean seed had specificity to metal ions.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1995.04a
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pp.125-125
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1995
Quinolone계 항균제인 rufloxacin의 전임상시험의 일환으로 항원성 유발여부를 평가하기 여부를 평가하기 위하여 아나필락시스 쇼크 반응시험, 수동 피부 아나필락시스 반응시험 및 간접 적혈구 응집 반응시험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 기니픽을 이용한 아나필락시스 쇼크 반응시험에서 rufloxacin의 저용량투여군(1mg/body, 추정임상용량), 고용량투여군(5mg/body), 고용량혼합투여군(5mg/body mixed with Freunds' complete or incomplete adjuvant) 및 단백결합혼합투여군(rufloxacin-BSA, 1mg/body)에 있어서 아나필락시스 쇼크 반응이 관찰되지 않았다. 2. 마우스-랫드를 이용한 수동 피부 아나필락시스 반응시험에서 저용량투여군, 고용량투여군, 오용량혼합투여군 및 bovine serum albumin(BSA)과 결합시킨 단백결합혼합투여군 모두에서 음성의 반응을 나타내었다. 3. 간접 적혈구 응집 반응시험 결과 저용량투여군, 고용량투여군, 고용량혼합투여군 및 단백결합혼합투여군에서는 각군당 1-4마리에서 16-32배에서 양성반응을 나타내었다. 그러나 음성대조군에서도 10마리 중 4마리에서 16-32배에서 양성반응을 나타낸 것으로 미루어 약물투여군에서의 미약란 양성반응이 약물특이적 반응은 아닌 것으로 사료된다. 이상의 실험결과로 미루어 rufloxacin은 항체 생성능은 가지지 않는 것으로 사료된다. 이상의 실험결과를 종합하여 볼 때 ndloxacin은 전반적인 항원성 potential은 없는 것으로 사료되며 또한 생체내에서 체내 단백과 결합하여 hapten으로 작용할 가능성은 없는 것으로 사료된다.
We have studied biochemical characterization of lectin purified from kidney bean seedling through PBS extraction, $(NH_4)_2SO_4$ precipitation, and Sephadex G-100 affinity chromatography. The lectin was agglutinated by rabbit erythrocytes. This lectin analyzed by SDS-PAGE is a tetramer composed of two subunits with molecular weights of 46 and 44 kDa. The optimal temperature and thermal stability of the lectin was 30$^{\circ}C$ and 40-80$^{\circ}C$, respectively. The maximal pH of this lectin was pH 8.2.
Lectin was finally isolated on Sephadex G-100 from Korean soybean cultivars developed for soy source and investigated its some biochemical properties. Native PAGE pattern of this lectin revealed a molecular weight of 108 kDa as tetramer. The molecular weight of this lectin isolated as double protein band by SDS-PAGE was calculated to be 32 and 22 kDa from the relative mobilities compared with those of the standard proteins. Among the tested red blood cell, the isolated lectin agglutinated rabbit red blood cell treated with trypsin, but did not agglutinated human red blood cells (A, B, AB, O), rat, and untreated rabbit red blood cell. The optimal temperature and thermal stability of isolated lectin was at 20-$50^{\circ}C$ and 10-$60^{\circ}C$, respectively. This lectin was stable at 7.2, and showed complete loss in its activity below pH 6.2 and above pH 8.0.
The mature fruit of Sorbus commixta is known as magaja in Korea and is consumed in the form of tea and wine. In addition, it has been used to treat hypertension and articular neuralgia in folk medicine. In this study, the ethanol extract of magaja and its subsequent organic solvent fractions were prepared, and their in vitro anti-coagulation, and platelet aggregation inhibitory activities were evaluated. Among the fractions, the ethylacetate fraction demonstrated significant inhibition against thrombin, prothrombin, blood coagulation factors and platelet aggregation, without hemolysis activity up to 0.5 mg/ml. Our results suggest that the ethylacetate fraction of magaja has the potential to be used as a new anti-coagulation agent.
Recently, thrombotic diseases have become rapidly more prevalent due to Westernized lifestyles and high-fat diets. In this study, the anti-thrombosis activities of the aerial parts of Sageretia thea were evaluated using ethanol extracts of the leaf (ST-L), branch (ST-B), and fruit (ST-F), and their anti-coagulation, platelet aggregation inhibition, and hemolytic toxicity were assessed. In comparison to the ST-F extract, the ST-B exhibited 6.7 times more polyphenol content, and the ST-L had 2.7 times more total flavonoid content. The ST-L and ST-B extracts showed stronger inhibitions of thrombin, prothrombin, and blood coagulation factors than aspirin, berry extracts, or commercial oriental herbs. Furthermore, ST-L and ST-B showed superior platelet aggregation-inhibitory activities than aspirin. The ST-F extract demonstrated only minor anti-thrombosis effects, and none of the extracts showed hemolysis against red blood cells up to 1 mg/ml. Phenolic acid and flavonoid analysis of the ST-L and ST-B extracts showed abundant rutin, isoquercitrin, and astragalin as the major active compounds. Further research on the anti-thrombotic activity of isoquercitrin, a rare flavonoid from quercetin, is necessary. This is the first report of isoquercitrin in Sageretia thea, and our results suggest that ST-L and ST-B extracts could therefore developed as anti-thrombosis agents.
To investigate anti-thrombosis and anti-oxidation activities of the root of Arctium lappa L (RALL), which has been used as foodstuff and oriental medicine in Korea, the ethanol extract and its subsequent organic solvent fractions of the RALL were prepared. The yield of ethanol extraction was 10.94%, and the content of total polyphenol and total sugar of ethanol extract were 5.01 and 694.53 mg/g, respectively. The fraction yields of n-hexane, ethylacetate (EA), butanol and water residue were 1.62, 0.42, 5.98 and 85.38%, respectively. In anticoagulation activity assay, the ethanol extract of RALL did not show significant changes in thrombin time (TT), prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (aPTT), whereas the EA fractions showed 13 folds extended TT, PT, and aPTT respectively. Interestingly, the water residue showed strong activation effect against blood clotting factors with shortened aPTT, which might provide the evidence of coagulation agent of RALL in folk remedy. In anti-platelet aggregation assay, the activity of the ethanol extract and its fractions were comparable to that of aspirin. Especially the EA fraction showed 2-folds higher inhibitory activity than aspirin. In anti-oxidation activity assay, the EA fraction also showed strong in DPPH, ABTS and nitrite scavenging activity, and reducing power activity. The extract and fractions of RALL have ignorable hemolytic activity against human RBC up to 0.5 mg/mL concentration. Our results suggest that the EA fraction of RALL have potentials as safe and novel anti-thrombosis agent.
Kim, Mi-Sun;Lee, Ye-Seul;Kim, Jong Sik;Shin, Woo-Chang;Sohn, Ho-Yong
Journal of Life Science
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v.25
no.4
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pp.425-432
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2015
This study was performed to develop high-value-added biomaterials for health and beauty products. Extracts of ethanol and hot water and their subsequent organic solvent fractions were prepared from Lees of Wookukseng (LW), a commercialized Korean traditional rice wine. We investigated their activities on blood coagulation, platelet aggregation, hemolysis against human red blood cells (hRBCs), and anti-oxidation. The water content, pH and brix of the LW were 80.3%, 3.94 and 13.0°, respectively. The yield of ethanol extraction (6.62%) was 3.15 times higher than that of hot-water extraction (2.1%), and the ethyacetate fraction (EAF) of ethanol extract showed the highest content of total polyphenol (128 mg/g) among the various fractions. In anticoagulation activity assay, the EAF of ethanol extract showed a 15-fold extension in TT, PT, and aPTT, indicating that the EAFs contain various inhibitory substances against thrombin, prothrombin and coagulation factors. In anti-platelet aggregation activity assay, the butanol fraction and water residue of ethanol extract showed significant inhibition activity. The activities were comparable to aspirin, a commercial anti-thrombosis agent. The above extracts and fractions did not show hemolysis activity against hRBC up to 5 mg/ml, and had radical scavenging activity against DPPH anion, ABTS cation and nitrite. Our results suggest that the active fractions prepared from LW, which has no specific usage until now, have a high potential as novel resources for anti-thrombosis agents.
The immunochemical property of lectin in soybean and the presence of lectin in seeds of six soybean cultivars were investigated by immunochemical methods. All seeds of six soybean cultivars formed one precipitin line against the soybean lectin antibody and showed immunochemically homologous precipitin pattern among the cultivars in immunodouble diffusion test. Four antigenic components in soybean lectin were detected by the crossed imuno-electrophoresis of a soybean seed antigen against the soybean lectin antibody. Cultivar, Jangyeop-kong contained the highest amount of lectin and the next were Kwangkyo, Hwangkeumkong, Baegunkong, and Jangbaegkong or Paldal-kong in order of lectin content. The lectin purified from the seeds of six soybean cultivars agglutinated rabbit erythrocytes, but did not agglutinate the fungal spores which were Fusarium sp., Alternaria sp., Cuvalaria sp., and Colletotrichum sp. isolated from the infected seeds or leaves of soybean.
Park, Myung-Su;Ku, Yun-Hee;Shin, Se-Hyun;Suh, Jang-Su
Proceedings of the KSME Conference
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2004.04a
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pp.1678-1681
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2004
The light-transmission technique has been applied to a slit rheometer for measuring red blood cell aggregation as well as blood viscosity over a range of shear rates. For measurement of blood viscosity and aggregation, instantaneous pressure and transmit-light intensity are measured with time. Using a precision pressure measurement, one can determine the shear stress and shear rate. In addition, a transmitted light through a blood sample indicates degree of RBC aggregation. With abruptly flowing with high shear rate, RBCs rapidly disaggregate and the intensity of the transmitted light becomes low. When continuously flowing with decreasing shear rate, RBCs tend to re-aggregate and the corresponding transmit-intensity gradually increases with time. The light intensity as a degree of RBC aggregation is plotted against shear rate and compared with blood viscosity. The advantages of this design are dual measurement at a time, simplicity, i.e., ease of operation and no moving parts, low cost, short operating time, and the disposable kit which is contacted with blood sample.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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