• Title/Summary/Keyword: 임의 돌연변이

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Rifampicin에 내성인 Bifidobacterium bifidum 균주 개발

  • 최웅칠;고성열;김병각
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1993.04a
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    • pp.143-143
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    • 1993
  • 현재 시판되고 있는 정장용 생균 제제에 함유되어있는 정장 균주의 하나인 Bifidobacterium bifidum은 항결핵제 중 rifampicin에 감수성으로 rifampicin과 병용 투여시 본래의 정장 효과를 기대할 수없다. 따라서, rifampicin에 내성인 돌연변이 균주를 얻기 위해 B. bifidum을 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG)로 처리하여 rifampicin에 내성인 30 종의 균주를 선별하였고, rifampicin에 대한 Minimal Inhibitory Concentration (MIC)를 측정해 본 결과 내성이 1,000 배 이상 상승하였다. 균주 동정을 위하여 fructose-6-phosphate phosphoketolase test를 실시해 본 결과 Bifidobacterium임이 확인되었다. 이들 내성 균주들의 유기산 생산량을 측정하여 그 생산량이 모균주와 가장 유사한 3 종의 균주를 선발하였다. 이들에 대하여 Escherichia coli 생육 억제능을 시험해 본 결과 E. coil 생육 억제능이 모균주와 유사하였다. 또, rifampicin을 함유한 배지에서 돌연변이 균주를 배양시킨 경우 rifampicin이 안정한 상태로 잔존한 것을 알 수 있었다. 이것으로 보아 돌연변이 균주들은 rifampicin을 분해 또는 변형시키는 효소를 생산하지 않는다고 볼 수 있다. 이상의 결과로 본 연구에서 개발한 돌연변이 균주들, 즉 B. bifidum RFRll, RFR21 그리고 RFR61은 rifampicin에 내성이면서 모균주와 동일한 생화학적 특성을 갖는 정장 균주로 여겨진다.

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Rifampicin과 Ofloxacin에 내성인 정장용 세균의 개발

  • 최응칠;정영자;김숙경;김병각
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1994.04a
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    • pp.252-252
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    • 1994
  • 현재 시판되고 있는 정장용 생균 제제에 함유되어있는 정장균주의 하나인 Bifidohacterium bifidum은 항결핵제 중 rifampicin에 감수성으로 rifimpicin과 병용 투여시 본래의 정장 효과를 기대할 수 없다. 따라서, rifampicin에 내성인 돌연변이 균주를 얻기 위해 B. bifidum을 N-methyl-N'-nitro-N-nitroso- -guanidine(MNNG)로 처리하여 rifampicin에 내성인 30종의 균주를 선별 하였고, rifampicin에 대한 Minimal Inhibitory Concentration(MIC)를 측정해 본 결과 내성이 1,000배 이상 상승하였다. 또한 rifampicin에 내성인 균주 RFR61을 자연 돌연변이시켜 ofloxacin에도 내성인 돌연변이 균주 20종을 선별 하였고, MIC를 측정한 결과 내성이 4배 이상 증가하였다. 또, fructose-6-phosphate phosphoketolase test를 실시해 본 결과, 모두 Bifidobacterium임이 확인되었다. 유기산 생성량을 측정하여 모균주의 유기산 생성량과 가장 유사한 3균주, B. bifidum RFRll, RFR21, RFR61 그리고 OFR9을 선별하였다. 이 네 균주의 E. coli 생육 억제능을 측정한 결과 모두 모균주와 유사한 E. coli 생육 억제능을 가지고 있었다. Rifampicin 내성균주들에 대하여 내성 유지 시험을 한 결과 복귀 돌연변이에 의해 내성이 소실될 가능성은 없는 것으로 여겨진다. 마지막으로, 내성 균주에 의한 rifampicin 불활성화 여부를 알아 본 결과 rifampicin이 불활성 화되지 않음을 알 수 있었다. 이상의 결과를 통해 본 연구실에서 개발한 B. bifidum RFR11, RFR21 그리고 RFR61 균주들은 rifampicin에 내성이며, B.bifidum OFR9은 rifampicin과 ofloxacin에 이중 내성을 갖는 균주로서 모균주와 유사한 생화학적 특성을 갖는 우수한 정장 세균으로 여겨진다.

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Morphological Characteristics of the Rice (Oryza sativa L.) with Red Pigmentation (적색종피 돌연변이 벼의 형질특성조사)

  • Matin, Mohammad Nurul;Kang, Sang-Gu
    • Journal of Life Science
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    • v.20 no.1
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    • pp.22-26
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    • 2010
  • Seven rice germplasms with red pigmentation within the pericarp were isolated from a large mutant collection. These red pericarp phenotypes resulted from the functions of the Rc, Rd and RdRc genes. Among them, two brown pericarp of the Rc type, four red pericarp of the RdRc type, and one white pericarp of the Rd type were identified. Morphological and agronomic characteristics of those rice germplasms were studied. The Rc type germplasms have the faint red or brown color pericarp and the Rd types produce the white pericarp, whereas the RdRc type germplasms have the dark red pericarp. Most of the important agronomic characteristics including plant stature, tillering ability, spikelet fertility, and total grain yield were lower in the colored rice than those of the wild-type control. All of the studied colored rice germplasms had a tendency of easy seed-shattering in comparison to the control. These characteristics of newly identified germplasms will be useful for identifying the genes responsible for pericarp color phenotype determination.

Inhibitory Effect of Methanol Extracts and Solvent Fractions from Doenjang on Mutagenicity Using in vitro SOS Chromotest and in vivo Drosophila Mutagenic System (된장 메탄올 추출물 및 분획물에 의한 in vitro SOS Chromotest 실험계와 in vivo 초파리 돌연변이 검출계에서의 항돌연변이 효과)

  • Lim, Sun-Young;Lee, Sook-Hee;Park, Keun-Young;Yun, Hee-Sun;Lee, Won-Ho
    • Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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    • v.33 no.9
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    • pp.1432-1438
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    • 2004
  • This study investigated the inhibitory effect of methanol extracts and several solvent fractions from doen-jang on mutagenicity using in vitro SOS chromotest and in vivo Drosophila mutagenic system. In order to determine an antimutagenic effect of doenjang methanol extracts, other soybean fermented foods and original materials were compared. The treatment of doenjang methanol extracts (100 ${\mu}$/assay) to SOS chromotest system inhibited N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) induced mutagenicity by 87~97% and showed higher antimutagenic effect than other fermented foods. Among solvent fractions from doenjang methanol extracts, the ethylacetate and dichloromethane fractions showed the stronger antimutagenic effect (91% and 95%, respectively) in SOS chromotest. In Drosophila mutagenic system, the treatment of ethylacetate fraction (5%/bottle) significantly inhibited aflatoxin $B_1$ induced mutagenicity by 97%. These results demonstrated that doenjang had an inhibitory effect to mutagenic agents in both in vitro and in vivo mutagenic systems, suggesting that its antimutagenic effect may be due to active compounds in the ethylacetate fraction from doenjang methanol extracts.

Inhibitory Effects of Solvent Extracts from Seven Brown Algae on Mutagenicity and Growth of Human Cancer Cells (7종 갈조류의 항돌연변이 및 인체 암세포 증식 억제 효과)

  • Choi, Hyung-Ju;Kil, Jeung-Ha;Bak, Soon-Sun;Kong, Chang-Suk;Park, Kun-Young;Seo, Young-Wan;Lim, Sun-Young
    • Journal of Life Science
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    • v.16 no.7 s.80
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    • pp.1080-1086
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    • 2006
  • 본 연구에서는 해조류의 항돌연변이 및 항암 생리활성물질을 검색하여 발암물질 생성 방지 및 생체 방어 물질로서의 이용 가능성을 검토하고자 Ames test를 이용하여 직접돌연변이원인 MNNG와 간접돌연변이원인 $AFB_1$에 대한 항돌연변이 효과 및 암세포 증식 억제 효과를 알아보고자 하였다. $AFB_1$에 대해서 괭생이모자반(S. horneri)이 실험에 사용된 다른 해조류들 중에서 가장 높은 돌연변이 억제 효과를 보였다. 첨가농도 1.25mg/plate일 때, 괭생이모자반의 acetone+methylene chloride 추출물과 methanol 추출물은 각각 96%, 91%로 실험에 사용된 다른 해조류들의 추출물들 중에서 가장 높았으며 양성 대조군인 다시마의 용매 추출물보다도 높은 돌연변이 억제 효과를 보였다. $AFB_1$과 같은 농도인 0.6mg/plate의 농도의 MNNG를 사용하여 S. typhimurium TA100 균주에 대한 해조류의 항돌연변이성 실험을 한 결과, 간접 돌연변이원인 $AFB_1$에 비해 직접 돌연변이원인 MNNG에 대해서는 다소 항돌연변이 효과가 떨어지지만, 여기서도 실험에 사용된 해조류들의 돌연변이 억제 효과를 살펴볼 수 있었으며 acetone+methylene chloride 추출물의 경우가 methanol 추출물보다 다소 높은 활성을 나타내었다. 항돌연변이 실험에서 효과가 뛰어난 괭생이모자반과 짝잎모자반을 중심으로 인체 암세포(위암세포, AGS 및 결장암 세포, HT-29) 증식억제효과를 살펴본 결과, 용매 추출물을 0.5%, 1% 및 2%의 농도별로 암세포에 처리했을 때 acetone+methylene chloride 추출물과 methanol 추출물은 둘 다 가장 낮은 농도인 0.5%에서부터 농도 의존적으로 암세포 증식 억제 효과가 증가하였다. 이상의 7종의 갈조류 추출물들은 Ames test에서 높은 항돌연변이 효과를 나타냈을 뿐만 아니라 괭생이모자반 및 짝잎모자반은 인체 암세포에 대해서도 높은 증식 억제 효과를 나타냄을 살펴 볼 수가 있었다.

신규 항암제 DA-125의 급성 및 특수독성 연구

  • 하광원;김부영;박정식;안병옥
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1993.04a
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    • pp.37-37
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    • 1993
  • 1) 급성독성시험: 랫드와 마우스 공히 투여후 5~6일에 농도의존적의 강한 독성이 발현 되었으며 표적장기로는 소화기계, 임파계, 조혈기계 등으로 나타났다. 랫드에서의 반수 치사량은 암수 각각 771.9(505.6~1178.4)mg/kg과 479.8(302.7~760.4)mg/kg이었으며 마우스에서는 암수 각각 527.4(393.7~701.1)mg/kg과 463.0(308.8~694.2)mg/kg 이었다. 2) 유전독성: S. typhimurium을 이용한 복귀돌연변이시험, CHL세포를 이용한 염색체이상 시험, 마우스에서의 소핵시험결과 DA-125는 돌연변이 유발능을 갖는 것으로 나타났다. 3) 국소자극성: 혈관주위주사에 의한 피부자극성 시험결과 DA-125는 adriamycin의 3배 용량에서 궤양, 괴사등 유사한 병변이 유발되었으나, 병변회복은 adriamycin에 비해 빠른 것으로 나타났다. 또한 토끼에서의 안점막자극시험 결과에서 DA-125는 실제적으로 자극이 없는 것으로 나타났다.

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Inhibitory Effect of Linum usitatissimum and Perilla frutescens as Sources of Omega-3 Fatty Acids on Mutagenicity and Growth of Human Cancer Cell Lines (식물성 오메가-3계 지방산 급원인 아마씨 및 들깨의 항돌연변이 및 암세포 증식 억제 효과)

  • Lim, Sun-Young
    • Journal of Life Science
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    • v.19 no.12
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    • pp.1737-1742
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    • 2009
  • It has been known that Linum usitatissimum and Perilla frutescens are dietary sources of possible chemopreventive compounds such as lignans and $\alpha$-linolenic acid. Here, we investigated and compared the inhibitory effects of methanol extracts from Linum usitatissimum and Perilla frutescens on mutagenicity using the Ames test, and growth of human cancer cells (AGS human gastric adenocarcinoma, HT-29 human colon cancer, Hep 3B hepatocellular carcinoma cells). In the Ames test system using Salmonella typhimurium TA100, aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$)-induced mutagenicity was significantly inhibited by treatment with the methanol extract from either Linum usitatissimum or Perilla frutescens (p<0.05) in a dose dependent manner. As for N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguamidine (MNNG)-induced mutagenicity, the methanol extracts (5 mg/assay) from Linum usitatissimum and Perilla frutescens showed 63% and 78% inhibitory rates, respectively, indicating that Perilla frutescens possessed stronger antimutagenic activity than did Linum usitatissimum. Inhibitory effects of methanol extracts from Linum usitatissimum and Perilla frutescens on the growth of human cancer cells (AGS, HT-29 and Hep 3B) appeared to increase dose dependently, and the inhibition was more effective against AGS and HT-29 compared to Hep 3B cells. Our results suggested that the methanol extract from Perilla frutescens showed stronger antimutagenic activity than that from Linum usitatissimumas assayed by the Ames mutagenic test, whereas the methanol extract from Linum usitatissimum was more effective than its counterpart for growth inhibition of human cancer cells. It is concluded that intake of Linum usitatissimum and Perilla frutescens as sources of omega-3 fatty acids will be beneficial for preventing cancer.

Effect of Substituted Residue 139 and 258 on Structural Changes of Mutant Tryptophan Synthase Pro96→Leu α-Subunit (트립토판 중합효소 α 소단위 잔기 치환체 Pro96→Leu의 구조 변화에 영향을 미치는 139 및 258 잔기의 치환 효과)

  • Lee, Joo-Youn;Jeong, Jae-Kap;Shin, Hae-Ja;Lim, Woon-Ki
    • Journal of Life Science
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    • v.12 no.4
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    • pp.464-468
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    • 2002
  • Enzymatic activities and fluorescence spectroscopic properties of the double mutant proteins P96L/F139W, P96L/F258W and a triple mutant protein P96L/F139W/F258W of tryptophan synthase $\alpha$ subunit from Escherichia coli was examined to study tertiary and local structure changes around the tryptophan residues. The enzymatic activities of P96l./F139W and P96L/F258W were similar, but P96L/F139W/F258W had lower activity, as compared to wild type. The fluorescence intensities of double mutant, P96L/F139W and P96L/F258W, were decreased but that of a triple mutant, P96L/F139W/F258W, was increased when compared to wild type. The sum of the maximum fluorescence intensity (fluorescence intensity at the λ$_{max}$) for the double mutant proteins was not equal to the intensity seen in the triple mutant protein. The enzymatic activity and fluorescence data indicate that the replacement of Pro$^{96}$ longrightarrowLeu might affect on the stability of helix 8 and the loop located between strand 4 and helix4. The result suggests that the tertiary structure of triple mutant (P96L/F139W/F258W), being different from wild type, might have more compact residual structure at the vicinity of 139 and 258.8.

Studies on the Relationship between Radiosensitivity and Mutation Induction in Soybean (대두의 방사선감수성과 돌연변이 출현양상에 관한 연구)

  • Kwon, S.H.;Won, J.L.
    • KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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    • v.26 no.4
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    • pp.318-323
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    • 1981
  • This study was conducted to establish an effective radiation treatment and selection method for induced mutants in M_1 population of soybean treated with gamma-ray. About 64% of total M_1 plants was reduced in plant height up to 50 - 60% and among which 60 - 70% of the plants were contained mutations in M_2 generation. About 60% of the MI plants have born 6 - 15 seeds per plant and 50 - 60% of their progenies produced mutants in M_2 generation. Positive correlation between plant height and number of seeds per plant in M_1 population was found. Higher visible macro-mutation rate in M_2 was observed in the groups of reduced plant height and seed number in the M_1 generation, whereas the frequency of chlorophyll mutation was increased in the group of less damaged plants. The size of mutation sector was increased with reduction in number of seeds per M_1 plant and the mutants were occurred at random in all the parts of M_1 plants. For the effective selection of mutants in soybean mutation breeding, the M_1 seeds should be harvested from the radiation damaged M_1 plants with the application of higher doses of mutagens, and handling M_2 generation by bulk population method is recommendable.

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Inhibitory Effects of Methanol Extracts from Korean Orysa sartiva and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen on Mutagenicity and Growth of Human Cancer Cells (한국산 현미 및 율무 추출물에 의한 돌연변이 및 인체 암세포주 증식 억제 효과)

  • Lim, Sun-Young
    • Journal of Life Science
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    • v.18 no.10
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    • pp.1415-1419
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    • 2008
  • This study was carried out to determine the inhibitory effects of methanol extracts from Korean Orysa sartiva and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen on mutagenicity using Ames test and growth of AGS human gastric adenocarcinoma and HT-29 human colon cancer cells. Both treatments of methanol extracts (5 mg/assay) from Orysa sartiva and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen to Ames test system inhibited aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$) induced mutagenicity by 76%. In case of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguamidine (MNNG) induced mutagenicity, the methanol extracts (5 mg/assay) from Orysa sartiva and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen showed 79% and 69% inhibitory rate, respectively and the inhibitory effect was a little stronger in Orysa sartiva Inhibitory effects of methanol extracts from Orysa sartiva. and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen on the growth of AGS and HT-29 human cancer cells were increased as dose dependent patterns and the inhibitory effects on AGS and HT-29 cells were similar. The above results indicate that the consumption of these cereals, which contain many nutrients with good quality, may be recommended as potent functional foods for improving health.