우리나라와 같이 B형 간염 바이러스의 유병율이 높은 지역에서는 B형 간염 바이러스뿐만 아니라 HCV에 대한 항 바이러스 효과도 동시에 시행함이 유용할 것으로 사료되었다. 본 연구에서는 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)을 이용하여 B형 간염 바이러스에 대한 항(抗) 바이러스 효과를 PCR을 이용하여 HBV의 DNA를 검색하였다. 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 처리된 처리군의 경우 대조군에 비하여 농도 의존적으로 B형 간염 바이러스의 표면항원 생산을 억제하였고, PCR을 이용하여 증폭한 경우에도 증폭된 DNA의 양은 감소하였다. 또한 C형 간염 바이러스에 대한 항(抗) 바이러스 효과를 검색하기 위하여 복제에 필수적인 단백질인 HCV helicase의 ATPase에 대한 활성 억제 효과를 조사하였다. 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 HCV helicase의 ATPase 활성을 억제하는 효과가 있음을 확인한 후 dose-respond에 따른 실험을 수행하여 HCV helicase의 ATPase 활성을 억제함으로써 탈인산화 되지 않은 ATP의 양을 이용하여 PSL로 분석한 결과 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 HCV helicase의 ATPase 기능에 대한 억제효과가 우수함이 확인되었다. 이상의 결과로 보아 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 B형 및 C형 간염치료에 동시에 응용될 수 있을 것으로 사료된다.
Liver cirrhosis is a liverdisease in which the normal microcirculation, the gross vascular anatomy, and the hepatic architecture have been variably destroyed and altered with fibrous septa surrounding regenerated or regenerating parenchymal nodules. Liver cirrhosis is regarded as a serious health problem with high prevalence in the world as well as in Korea. Liver cirrhosis is an irreversible disease. However, in cases of liver cirrhosis induced by chronic hepatitis B, we should treat the chronic hepatitis B, because it frequently progresses to cirrhosis and hepatoma. We observedimprovements of symptoms and laboratory tests with herb medicine Injinchunggan-tang (茵蔯淸肝湯) in five cases ofliver cirrhosis and chronic hepatitis B. The serum aminotransferase was preserved within normal value levels for a long time, 3 years to 7 years. However, further study is necessary to determine the effect of herb medicine on liver cirrhosis and chronic hepatitis B.
Objectives : This study was performed to investigate the effects of Injinchunggan-tang on cell growth and apoptosis in human hepatic stellate cell line LX2. Materials and Methods : Hepatic stellate cells were treated with various concentrations of Injinchunggan-tang extract for 24, 48 and 72 hours. The extraction was done with distilled water. After the treatment, cell viability, proliferation, apoptosis, caspase activity, caspase inhibitor and the mRNA of the Bcl-2, and Bax with ${\beta}$-actin were measured by using MTT assay, apoptosis assay and RT-PCR. Results : Proliferation, and mRNA expression of the hepatic stellate cells were inhibited by Injinchunggan-tang treatment in a dose-dependent manner. This indicates the prescription has inhibitory effect on fibrogenesis of the liver by regulating the fibrogenesis-associated genes in transcription. Cell viability was inhibited in time- and dose-dependent manners. Conclusions : These results suggest that Injinchunggan-tang would be beneficial in the treatment of cirrhotic patients as well as for the patients with chronic hepatitis.
Objectives: This study was designed to investigate the effects of Injinchunggan-tang(Yinchenqinggan-tang) on expression of angiogenic factors in HepG2 cells. Materials and Methods : The mRNA expression levels and protein secretion levels of angiogenic factors were measured using quantitative RT-PCR, Western blot and ELISA assay respectively in Injinchunggan-tang-treated and untreated HepG2 cells. Results : Injinchunggan-tang(Yinchenqinggan-tang) reduced mRNA expression levels and protein secretion levels of angiogenic factors, especially VEGF, bFGF and $TGF{\beta}1$ in HepG2 cells. Conclusion: Results indicate that Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang) inhibits expression of angiogenic factors in HepG2 cells. Further, results suggest that Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang) inhibits angiogenic effects in HCC.
Objectives : This study was designed to investigate the effects of Injinchunggan-tang(Yinchenqinggan-tang) on the expression of inflammatory cytokine genes and proteins in kupffer cells. Materials and Methods : The mRNA expression level and protein secretion level were measured using quantitative RT-PCR and ELISA assay respectively in Injinchunggan-tang-treated and untreated kupffer cells after exposed to ethanol, acetaldehyde and lipopolysaccharide. Results : Injinchunggan-tang(Yinchenqinggan-tang) reduced mRNA expression level and protein secretion level of $TNF-{\alpha},\;TGF-{\beta}1,\;IL-1{\beta},\;IL-6,\;IL-8$ that are induced by ethanol, acetaldehyde and lipopolysaccharide in kupffer cells and that mediate inflammation and fibrosis of liver. Conclusion : The result indicates that Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang) blocks alcohol-induced liver injury and protects liver by reducing production of inflammatory cytokines.
Objectives : Oxidative stress seems to play a major role in mechanisms by which ethanol causes liver injury. Previous studies have shown that treatment with Yinjinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang, YJCGT) has protective effects on alcoholic liver disease. The aim of this study was to investigate the protective effects of YJCGT on alcohol-induced oxidative stress. Materials and Methods : In vitro, we evaluated the inhibitory activities of YJCHT on DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl), xanthine oxidase, trypsin, and hyaluronidase. In a cell culture model, we measured cell viability and proliferation, and the activities of superoxide dismutase (SOD), and catalase (CAT) after YJCGT treatment in C34 and E47 cell lines, and HepG2 cells transfected with/ without cytochrome P450IIE1 (CYP2E1) gene. In vivo, we estimated serum level of hepatic biochemical markers, and alcohol concentration in the blood. Results : YJCGT showed significant free radical scavenging activity against DPPH and xanthine oxidase and decreased hyaluronidase activity effectively in vitro. YJCGT also increased cell viability, and proliferation in C34 and in E47 cell lines, and increased activities of superoxide dismutase, and catalase in C34 and in E47 cell lines. YJCGT reduced serum AST, LDH, and total cholesterol level in some of the results, and reduced blood alcohol concentration in vivo, as well. Conclusions : This study suggests that YJCGT has protective effects on oxidative stress by inhibiting alcohol-induced suppression of antioxidant enzyme activities.
Objectives : The purpose of our study was to investigate the effects of Injinchunggan-tang (Yinchenchinggan-tang) on DMN liver damage caused by applying proteomics. Materials and Methods: Sprague-Dawley rats were used in this experiment; the rats were divided into the normal group (normal saline), the control group (DMN) and the samplegroup (DMN+IJCGT). The DMN was induced 3 days a week for 3 weeks in the control group. The normal saline without DMN was induced by the same method in the normal group. Injinchunggan-tang extract was orally administered twice a day for 3 weeks after DMN was induced in the sample group. The livers of each group were processed and we investigated histology, OxyBlot, 2-dimensional electrophoresis, and western blot of liver of each group. Results : In the histological findings of the liver, the control group showed portal fibrosis with a few septa or without septa. The sample group showed no fibrosis or portal fibrosis without septa. In the OxyBlot finding, Injinchunggan-tang prevented liver damage by oxidation. In the 2-dimensional electrophoresis finding, formiminotransferase cyclodeaminase (FTCD), FYVE-finger containing protein, aldehyde dehydrogenase (ALDH), and ratio of predicted : hypothetical protein LOC68668 isoform 1 were changed. Conclusions : Injinchunggan-tang exerts an inhibitory effect against the fibrosis and oxidation induced by the DMN in the rat liver cell, and some proteins induced by the DMN were changed by Injinchunggan-tang.
Objective : The aim of this study is to investigate the inhibitory effect of Injinchunggantang on hepatic sclerosis induced by $CCl_4$. Methods : Weight, liver function test and complete blood cell count, gross findings, and findings on liver tissue of the past(Hematoxylin & Eosin stain, Masson-Trichrome stain) were studied. Results : When it comes to the change of rats' body weight, The $CCl_{4^+}$Injinchunggantang group lost far less weight than The $CCl_{4^-}$only group. In the liver function test, which is focused on various areas such as total cholesterol, alkaline phosphotase, albumin, aspartate transaminase, alanine transaminase, The $CCl_{4^+}$Injinchunggantang group was much more closer to normal limit than the $CCl_4$ only group. In the complete blood cell count, including white blood cell, red blood cell, hemoglobin, hematocrite, platelet, The $CCl_{4^+}$Injinchunggantang group significantly closer to normal limit than $CCl_{4^-}$only group. In the gross findings of hepatic fibrosis models, Injinchunggantang showed inhibitory effect on hepatic fibrosis in the order. In the past findings of hepatic fibrosis models in Hematoxylin & Eosin, Masson-Trichrome staining, the liver in $CCl_{4^-}$only group showed atrophy and necrotic change with white nodules, whereas that of $CCl_{4^+}$Injinchunggantang group showed lesser significant change with the well_preserved tone of the tissue. In the extent of the inhibition of the hepatic fibrosis, the Injinchunggantang group showed statistically significant inhibitory effect(p<0.05) in the sclerosis model. Conclusions : These results show that Injinchunggantang have inhibitory effect on hepatic sclerosis induced by $CCl_4$ and further ultimately prevent liver cirrhosis. To obtain more credible results in this experiment, the invention of a new experimental model more similar to human hepatic sclerosis is still needed.
Objectives: Hepatoma is a very serious disease in Korea and worldwide. Hepatitis B virus (HBV) has proved the most significant cause of hepatoma. We carried out this study to investigate the effect of Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan -tang) on inhibiting cell proliferation and DNA synthesis in HepG2.2.15 cell lines and on inhibiting phosphorilation of oncogene (MAP kinase) in NIT /3T3-HEx cells. Methods: First we confinned the Hepatitis B virus producing ability of HepG2.2.15 cells. To investigate the anti-cancer effect of Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang), we did the NTS/PMS assay, [3H]-thymidine incorporation assay and transfection of pcDNA-X. We also measured the gene expression through western blotting. Results: Injinchunggan-tang (Yinchenqing gan tang) showed the suppressing effect of HepG2.2.l5 increase in the MTS/PMS assay and the inhibiting effect of DNA synthesis of HepG2.2.15 in the [3H] thymidine incorporation assay. Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang) also showed the inhibiting phosphorilation effect of MAP kinase in HBV -X genes. Conclusions: From the above Injinchunggan-tang (Yinchenqinggan-tang) is thought to have an anti-cancer effect on the hepatoma from HBV. It is suggested that further studies on this prescription would give us a better medicine with an anti-cancer effect.
Objectives : This study was performed to investigate the anti-fibrogenic effect of Injinchunggan-tang on cultured rat hepatic stellate cells. Materials and Methods : Hepatic stellate cells(HSC-T6) were treated with various concentrations of Injinchunggan-tang extract for 24, 48, and 72 hours. The extraction was done with distilled water. After the treatment, cell viability, proliferation, procollagen levels and the mRNA of the TIMP-1, TIMP-2, and ASMA were measured by using MTT assay. BrdU assay, procollagen type I C-peptide EIA kit and RT-PCR. Results : The proliferation, mRNA expression and synthesis of collagen of the hepatic stellate cells were inhibited by Injinchunggan-tang treatment in a dose-dependent manner. This indicates the prescription has inhibitory effect on fibrogenesis of the liver by regulating the fibrogenesis associated genes in transcription. Cell viability was inhibited in time- and dose-dependent manners. It seemed that the drug should be used with sufficient dose to acquire treatment effect. Conclusion : These results suggest that Injinchunggan-tang is beneficial in the treatment of cirrhotic patients as well as for the patients with chronic hepatitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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