• 제목/요약/키워드: 인산분해효소

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법랑기질유도체가 인간 치주인대세포의 증식 및 성장인자 발현에 미치는 영향 (Effects of enamel matrix derivatives on the proliferation and the release of growth factors of human periodontal ligament cells)

  • 정겨운;방은경
    • 대한치과보철학회지
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    • 제54권3호
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    • pp.203-209
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    • 2016
  • 목적: 치주조직재생을 위해서는 치주인대세포의 증식 및 이주를 촉진시키는 것이 필수적이나 현재까지 이것을 만족시키는 재생술식은 없다. 최근 법랑기질유도체(enamel matrix derivatives)가 치주조직 재생 술식에 적용되고 있으나 그 기전에 대해서는 완전히 알려지지 않았다. 따라서 본 연구의 목적은 법랑기질유도체가 치주인대세포의 증식과 성장인자 발현에 미치는 영향에 대하여 알아보고자 함이다. 재료 및 방법: 건강한 성인의 제 3 대구치로부터 치주인대세포를 추출한 후, 법랑기질유도체(Emdogain (Biora, Malmo, Sweden))의 농도가 각각 0, 12.5, 25, 50, 100, and $200{\mu}g/mL$인 배지에서 배양시켰다. 치주인대 세포증식과 알칼리성 인산분해효소(alkaline phosphatase) 활성도를 측정하고, 발현되는 성장인자를 평가하였다. 결과: 치주인대세포의 세포증식은 $25{\mu}g/mL$이상의 농도의 법랑기질유도체를 첨가한 군에서, 알칼리성 인산분해효소 활성도는 $50{\mu}g/mL$의 법랑기질유도체를 첨가한 군에서 각각 유의하게 증가하였고, $50{\mu}g/mL$의 법랑기질유도체를 첨가한 군에서 치주인대세포의 VEGF (vascular endothelial growth factor)와 TGF(transforming growth factor)-${\beta}$의 발현이 유의하게 증가하였다. 결론: 법랑기질 유도체는 인간 치주인대세포의 세포증식과 알칼리성 인산분해효소 활성을 증진시키고, VEGF와 TGF-${\beta}$등 성장인자의 발현을 촉진함으로써 치주조직 재생에 기여할 수 있을 것이다.

달걀 단백질의 Allergenicity에 관한 연구 (A Study on the Allergenicity of Egg Protein)

  • 정은자
    • 한국식품영양학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.228-236
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    • 1998
  • 달걀의 Allergenicity를 감소시킬 수 있는 방안을 강구하고자 물리적 처리, 축합 인산염 처리 및 효소처리를 하여 Guinea pig를 이용한 Passive Cutaneous Anaphylaxis(PCA) inhibition 실험과 Non Proteic Nitrogen(NPN)정량을 통한 가수분해율의 측정결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 달걀의 allergenicity는 가열에 의해 감소하였으며 가열시간이 길수록 단백질 가수분해율 및 PCA inhibition을 증가 시켰다. Ultraviolet 조사와 Microwave 조사는 단백 가수분해율과 PCA inhibition을 증가 시켜서 allergenicity를 저하시켰으며 ultraviolet이 저해효과가 더 컸으며 부화 달걀은 allergenicity를 감소시키지 않은 것으로 나타났다. 효소처리는 단백질의 가수분해율 및 PCA inhibition을 증가 시키며 allergenicity를 현저히 감소시켰으며 alcalase의 재해효과가 더 컸다. Polyphosphate의 참가는 단백질의 가수분해는 유도하지 않았으나 PCA inhibition을 증가 시키며 allergenicity를 감소시켰다. Allergenicity를 감소시키기 위한 처리를 한 달걀 gel의 주사전자현미경 사진은 효소처리 시 표면이 밝게 나타나서 단백질이 분해되었음을 알 수 있었고 neutrase가 alcalase보다 밝게 나타났으나 반응시간의 증가에 따라 모든 효소 표면이 밝게 나타났다. Instron에서 달걀 gel의 경도를 측정한 결과 효소와의 반응시간이 길수록 경도가 감소하는 경향을 보였다.

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수종 점막 추출액중 메치오닌엔케팔린 및 유사체의 분해 억제

  • 전인구;이치호;신영희
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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    • pp.178-178
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    • 1993
  • 생리활성 펩타이드류의 경점막 수송을 검토하기 위하여 토끼의 비강, 직장, 질 또는 눈 점막 구출액에서의 메치오닌엔케팔린 (Met-Enk) 및 그 합성 유사체인 [D-알라$^2$]-메치오닌엔케팔린아미드 (YAGFM)의 효소적 분해를 억제하고자 수종 효소억제제를 검토하였다. 방법: 토끼의 질, 직장 및 비강 점막을 차례로 적출하여 신속히 Valia-Chien투과셀에 마운팅하고, 눈의 각막은 절취하여 따로 각막 투과셀에 마운팅한 다음 등장 인산염 완충액 3.5ml씩으로 8시간씩 3회 추출하여 점막측 및 장막측 추출액을 제조하였다. 추출 완료 직후 이들 추출액에 Met-Enk 또는 YAGFM 50$\mu\textrm{g}$/ml의 농도로 첨가하고 여러 효소억제제를 단독 또는 혼합하여 첨가한 조건에서 37$^{\circ}C$에서 60 rpm으로 24시간 동안 흔들면서 경시적으로 시료를 취하여 잔존 펩타이드의 양을 HPLC법으로 정량하여 속도론적으로 비교 검토하였다. 이 연구에 사용한 효소억제제로는 아미노펩티다제의 억제제인 amastatin (AM), bestatin (BS). 엔케팔리나제 A의 억제제로 알려진 thiophan (TP), 엔케팔리나제 B의 억제작용이 있는 것으로 밝혀진 thimerosal (TM), metalloenzyme의 억제제인 에데트산나트륨 (EDTA) 등을 검토하였고 또 $\beta$-시클로덱스트린 유도체인 디메칠-$\beta$-시클로덱스트린과 2-히드록시프로필-$\beta$-시클로덱스트린이 펩타이드의 분해억제효과도 함께 검토하였다.

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춘계 남해 전선역에서 알칼리 인산분해 효소를 통한 제한 영양염의 평가 (Limiting Nutrient Based on Alkaline Phosphatase Activity in the Frontal Area of the Southern Sea, Korea)

  • 오석진;장민익;남기택;김석윤
    • 해양환경안전학회지
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    • 제23권7호
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    • pp.885-892
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    • 2017
  • 2017년 추계에 남해 전선역을 파악하고, 알칼리 인산분해 효소(Alkaline Phosphatase; APase) 활성을 이용하여 제한 영양염과 제한 영양염의 시간적인 변화를 평가하였다. 전선역이 형성된 인근해역의 경우, 용존무기인(dissolved inorganic phosphorus; DIP)의 농도와 용존무기질소(dissolved inorganic nitrogen; DIN): DIP 비가 각각 $0.2{\mu}M$ 이하와 최대 23.2로, DIP가 제한된 환경임에도 불구하고 Chlorophyll a(Chl.-a)가 $0.2{\mu}g/L$로 높은 생물생산력을 보였다. APase와 DIP는 중요한 역의 상관관계(r = -0.81; P<0.001)를 보여, DIP가 제한되어진 해역임을 알 수 있었으며, APase와 Chl-a 관계는 APase의 60 %가 식물플랑크톤, 40 %가 박테리아 기원인 것으로 평가되었다. 용존태 APase와 입자태 APase의 분포로부터 전선역은 장기간 DIP가 제한된 해역이며, 그 외의 해역은 최근에 DIP 제한이 해소된 것으로 판단되었다. 따라서 전선역에서 APase와 같이 가수분해효소의 측정은 제한 영양염의 시공간적인 변화 특성을 평가할 수 있으며, 전선역에서 생지화학 순환의 이해를 높일 수 있을 것으로 생각된다.

Biphasic Calcium Phosphate가 태아골모세포의 골 형성에 미치는 영향 (Effects of biphasic calcium phosphate on bone formation in human fetal osteoblasts)

  • 신계철;장길용;이명구;윤호상;송제봉;김현아;피성희;신형식;유형근
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제35권1호
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    • pp.77-85
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    • 2005
  • 목적 : 이 연구의 목적은 치과 영역에서 골 재생을 촉진하기 위해, 현재 많이 사용하고 있는 BDX(bovinederived xenograft)와 비교하여 BCP(biphasic calcium phosphate)의 효과를 알아보기 위함이다. 실험 재료 및 방법: 본 연구는 태아골모세포주(hFOB 1.19)를 사용하였으며, 사용된 골 이식재에 따라 2개의 실험군으로 구분하였고, 각 실험에 적절한 농도의 BDX와 BCP를 첨가하였다. 그리고, 세포 증식도 검사, 교원질 합성량 분석, 염기성 인산분해효소 활성도 측정, Western blot 분석을 통한 OC과 BSP의 발현 정도등의 실험을 진행하였다. 결과 : BDX와 BCP는 대조군과 비교하여 세포 증식에서 유의한 차이가 없었지만, 교원질 합성량, 염기성 인산분해효소의 활성, 그리고 OC과 BSP의 발현에 있어 대조군과 비교하여 유의하게 증가를 보였다. 그러나, 두 이식재간의 유의한 차이는 보이지 않았다. 결론 : 본 실험실적 연구에서 BCP는 골모세포분화에 긍정적인 영향을 미침으로써 효과적인 이식재로 사용할 수 있음을 가늠할수 있었다.

T-세포 항원 수용체 매개 신호전달 조절자로서 돼지 CD45RO 구조특성 (Key Structural Features of PigCD45RO as an Essential Regulator of T-cell Antigen Receptor Signaling)

  • 채한화;임다정
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제20권9호
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    • pp.211-226
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    • 2019
  • 백혈구 공통 항원인 돼지 CD45는 PTPRC 유전자에 암호화 되어 있으며, CD45엑손의 선택적 스플라이싱에 따라 다른 T-세포에서 발현되는 티로신 인산분해효소이다. CD45는 기질인 TCR의 $CD3{\zeta}$ 사슬, Lck, Fyn, Zap-70 kinase의 인산화된 티로신에서 인산을 분해하여 T-세포 항원 수용체(TCR) 매개 신호전달을 조절한다. CD45의 조절이상은 많은 면역 질환과 관련이 있어서, CD45는 면역약물 개발에 표적이 되어왔다. TCR 신호전달의 조절효과를 가진 주요 구조적 특징을 특성화하기 위해, 사람의 알려진 CD45 구조를 템플릿으로 적용하여 돼지 CD45RO(가장 작은 CD45 isoform)의 단백질 구조와 예측된 돼지 CD45RO 모델구조에 $CD3{\zeta}$ 사슬의 ITAM(REEpYDV)를 도킹하여 CD45RO/ITAM 펩타이드 결합구조를 예측하였다. 돼지 CD45RO의 구조적 특징은 세포외영역의 구조견고성과 세포질 내 티로신 인산분해효소 도메인의 KNRY와 PTP signature 기능모티프(두 기능 모티프는 ITAM 펩타이드 결합부위의 좁은 입구로 역할)에 있었다. 주요 구조특성은 돼지 CD45RO-ITAM 펩타이드 결합구조 안정성과 결합친화력을 조절하면서 기질 선택성에 영향을 준다. 돼지 CD45RO의 구조적 특성은 T-세포에 특이적인 면역 조절제를 탐색하는 데에 적용될 것이다.

니코틴이MG63 조골세포주의 오스테오칼신과오스테오프로 테제린의 생성 및 mRNA 발현에 미치는 영향 (Effects of nicotine on the formation of osteocalcin and osteoprotegerin and synthesis of its mRNA in MG63 osteoblast-like cell)

  • 양준호;박수병
    • 대한치과교정학회지
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    • 제34권6호
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    • pp.514-525
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    • 2004
  • 흡연이 골형성 세포의 기능을 억제한다는 것은 이미 잘 알려져 있으나 대다수의 연구가 주로 역학조사에 기초하여 이루어져 왔다. 본 연구의 목적은 흠연과 골형성 세포의 상관관계를 실험적으로 평가하기 위한 것이다. 본 연구를 위해 인간 골육종 세포인 MG63 조골제포주를 이용하였으며, 니코틴이 조골세포의 증식, 염기성 인산분해효소의 활성, 오스테오칼신곽 오스테오프로테제린의 생성 그리고 mRNA발현에 미치는 영향을 관찰하였다 MG63조골세포를 니코틴 농도가 각각 $1.0{\mu}M$,\;1.0mM, 2.5mM, 5.0mM, 7.5mM, 그리고 10.0mM,이 함유된 배지에서 1일, 2일, 3일 그리고 6일 동안 배양 실험을 하여 다음과 같은 결과를 얻었다. MG63 조골세포의 증식이 저농도의 니코틴에서는 일시적으로 활성화되었지만 5.0mM 이상의 고농도에서는 억제되었다. 염기성 인산분해효소의 활성은 니코틴 농도가 증가함에 따라 감소하였다. 오스테오칼신 생성양은, 배양 1일 후, 5.0mM 이하의 농도에서 증가하였으나 7.5mM 이상의 고농도에서는 감소하였다. MG63 조골세포를 3일 배양한 경우, 오스테오칼신 생성양은 1.0mM의 저농도에서도 감소하였다 니코틴이 오스테오칼신 단백질 생성과 오스테오칼신 mRNA생성에 미치는 영향은 1일과 3일에서 다소 차이가 있었다. 오스테오프로테제린의 생성양은 모든 실험군에서 니코틴을 함유하지 않은 대조군보다 감소하였다. 하지만 mRNA 수치는 단백질 생성과 상반되게 7.5mM (3일), 5.0mM (6일) 이상의 고농도에서 증가하였다.

Substrate-immobilized bone morphogenic protein-7 peptides on titanium surface support the expression of extracellular matrix proteins

  • 김영준;정찬길;최득철
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제36권3호
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    • pp.627-637
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    • 2006
  • 이 연구는 rh BMP-7-immobilized substrates에 대한 백서 태자 두개관 세포의 반응을 석회화 결절 측정, 알카리 효소 분석, 역전사 중합반응 및 단백질 분석등으로 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 배양 14일 째, 석회화 결절 형성율을 측정한 결과, rh BMP-7-immobilized substrates에서 대조군과 비교하여 더 많은 석회화 결절을 형성하였다. 2. 배양 7일에 염기성 인산 분해효소 활성도는 rh BMP-7-immobilized substrates에서 대조군에 비해 효소 활성도가 유의하게 높았다. 3. 역전사 중합반응의 결과에서 BSP 와 OCN 유전자 발현은 대조군보다 더 현저하였다. 4. 단백질 분석에서 rh BMP-7-immobilized substrates와 대조군 모두 Smad 1,5,8 단백질의 인산화를 활성화시키지 못했다. 이상의 결과 rh BMP-7-immobilized substrates는 백서 태자 두개관세포가 조골세포로의 분화와 석회화를 유도하며 따라서 rh BMP-7-immobilized substrates는 임프란트 주변의 골 형성에 유용하리라 사료된다.

산화질소가 인간 치주인대세포의 증식과 분화에 미치는 영향 (Effects of nitric oxide on the proliferation and differentiation of human periodontal ligament cells)

  • 최선영;조진형;강경화
    • 대한치과교정학회지
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    • 제36권6호
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    • pp.465-473
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    • 2006
  • 교정적 치아이동과 밀접한 관련이 있는 치주인대세포에서, 산화질소가 세포의 증식과 분화에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 인간 치주인대세포를 분주한 후에 산화질소의 donor인 SNP의 농도에 따라 실험군을 구분하고, 세포 활성 염기성 인산분해효소 활성, Western blot 분석을 통한 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현 정도를 측정하였다. 0.2 mM 이하의 저농도 SNP를 처리한 실험군에서 대조군과 비교하여 세포 활성, 염기성 인산분해 효소의 활성, 그리고 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현이 유의하게 증가하였다. 그러나 1 mM 이상의 고농도 SNP를 처리한 실험군에서는 오히려 감소하였다. 산화질소는 인간 치주인대세포에서 저농도는 세포의 증식과 분화에 촉진 효과를, 고농도는 억제 효과를 보이는 biphasic effect를 갖는다.

히스티딘 에시드 포스파테이즈(Histidine Acid Phosphatase) 계열 인간 파이테이즈(Phytase)의 일반적 특성규명 (General Enzymatic Properties of Human Histidine Acid Phosphatase-Phytase)

  • 조재순
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제51권2호
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    • pp.177-182
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    • 2009
  • 산업용 균주인 Pichia pastoris에서 재조합 발현된 당화된 인간유래 MINPP (multiple inositol polyphosphate phosphatase) 효소는 기질 피틴태인(InsP6)에 대한 파이테이즈 효소활성을 나타내었고 탈당화시 그 효소활성이 30% 감소되었다. 그 효소의 기질 $InsP_6$에 대한 최적 pH 활성은 중성범위인 pH 7.4였다. 기질특이성 측면에서 인간 MINPP 효소는 para-nitrophenylphosphate (pNPP), ATP, ribose-1-phosphate (R-1-P)와 같은 유기인산화합물(organic phosphate conjugates)의 분해활성은 매우 낮은 대신, 기질 $InsP_6$를 효과적으로 분해하였고 특히 화학적 자극제인(chemical stimulator)인 1 mM 2-phosphoglycolate (2-PG)의 첨가에 따른 기질 2,3-bisphosphoglycerate (2,3-BPG)에 대한 효소활성이 2-PG를 첨가하지 않을때 보다 1.2배 증가되었지만 기질 $InsP_6$에 대한 효소활성에는 영향을 주지 않았다. 또한 2 mM $Mg^{2+}$ 이온과 100 mM $Cl^-$ 이온의 첨가는 MINPP 효소의 기질 2,3-BPG에 대한 효소활성에 역시 영향을 주지 않았다.