Mammalian, including human, spermatozoa undergo morphological and physiological changes during sperm maturation. There were, these changes may affect the fertilization and embryonic development. In this study, we examined the pronucleus formation, pronucleus disappearance and embryonic development in the human oocytes fertilized by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). The injected spermatozoa were grouped into ejaculated, epididymal and testicular by the collecting region. Among 363 metaphase II injected oocytes, 287(79.1%) oocytes were normally fertilized and displayed two pronuclei. There were no difference in the fertilization rates and in the pronucleus formation and pronucleus disappearance at 16, 20 and 24 hr after ICSI, among the each spermatozoa group. Also, at 64 hr, the appearance of embryonic development was similar. From these results it can be concluded that there was no difference of maturity among the sperm collected from ejaculated, epididymis and testis in the pronucleus formation and embryonic development. Therefore, testicular spermatozoa are successfully used with ICSI in IVF-ET program.
Objective: The purpose of this study was to evaluate the effect of polycystic ovarian follicular fluid on sperm motility in human in vitro fertilization (IVF). Methods: From May, 1998 to July, 1999, 55 patients who complained of infertility were involved in this study. We obtained ovarian follicular fluids from the patients by ultrasono-guided aspiration. Subjects were divided into two groups. 20 patients who had polycystic ovarian disease were belong to study group, and 25 patients who had normal ovarian follicular fluid were belong to control group. The follicular fluid dilution was done with Ham's fluid as 10%, 20%, 50%, 100%. The sperm motility was analyzed by CASA at 6hr and 12hr after incubation in follicular fluids. Results: The levels of average path velocity (VAP) in all concentration fluid didn't show significant difference between study and control group. The other parameters including curvilinear velocity (VCL), amplitude of lateral head displacement (ALH), and linerity (LIN) were didn't show any significant difference between both groups. Conclusion: PCOD fluid had seemed to have an adverse effect on the sperm biological function. But, this study showed that PCOD fluid had no different effect on sperm motility with normal follicular fluid.
본 연구는 서계 박세당의 "사변록"에 나타난 "중용"을 이해하고 그의 학문 평가에 대해 새로운 해석을 해보려는 시도이다. 기존의 학계에서는 서계의 학문 성격을 반주자학, 탈정주학, 탈성리학, 실학 등으로 구명하였다. 서계의 "중용" 이해는 분명히 주자의 "중용장구"에 대해 상당히 비판적이다. 하지만 그것은 반주자학, 탈정주학, 탈성리학, 실학이라기보다는 경(經)을 이해하고 독해하는 서계의 학문적 독특성 때문이다. 특히, 육경(六經)을 중심으로 실천적 학문을 펼치려는 철학적 방법의 창의적 돌출로 볼 수 있다. 서계는 중용이 지닌 뜻의 일관성 유지를 위해, 정자와 주자가 중용의 해석하면서 드러내는 사유의 불일치를 지적하며, 나름대로 유학의 본래 사유에 부합하는 근원적 의미를 찾으려고 노력하였다. 그것은 사물과 행위에서 그명칭과 본분, 역할과 기능을 일치하려는 노력으로 드러났다. 아울러 서계에게서 중용은 본성을 따르는데 힘쓰는 것으로 인식되고, 내 마음의 밝은 것을 따라 실천하는 사람의 길로 정돈된다. 이는 객관적으로 사람과 사물의 원리를 설명하는 주자의 사유와는 다른 측면으로, 인간 주체로서의 삶에 역동성을 부여하면서 실천의 기초로서 강력한 실제성과 현실성을 지닌다. 따라서 중용의 실천양식은 실제적인 효를 무게중심에 두고 전개되고, 사람이 그것을 어떻게 실천하느냐에 따라 천도(天道)에도 이룰 수 있다는 인간 주체의 발현으로 나타난다. 요약하면 서계는 중용을 관념적이고 이론적이며 형이상학적 차원으로 인식하기보다는 실제적이고 실천적이며 형이하학적 차원에서 규명하였다. 이는 인간을 중심으로 세계를 이해하고 사람의 길을 고심한 사유의 실천으로 유학의 본질을 탐구한 학문 정신의 전개이다.
Two-pore domain 칼륨($K_{2P}$) 통로는 흥분세포 및 비흥분세포의 안정막 전압을 일정하게 유지하는데 관여한다. 그러나 생식세포 및 생식기관에서 발현되는 $K_{2P}$ 통로의 분포영역 및 그 기능에 대해서는 연구자들에 의해 아직 정리되지 못하였다. 본 종설에서는 $K_{2P}$ 통로의 생식세포 및 생식기관에서 발현, 분포 및 생리학적 의의를 논하였다. $K_{2P}$ 통로는 인간 영양막세포, 자궁근층, 태반혈관계, 자궁평활근조직, 태반융모조직 및 임신자궁조직에서 발현되어 임신에 있어서 관련성을 제시되었다. 또한, $K_{2P}$ 통로는 마우스 전핵배, 원숭이 정자 및 한우의 난소, 정소, 난자, 정자 및 수정란에서 발현 변화를 보였다. 특히, $K_{2P}$ 통로는 체외배양 시 변화되는 온도, 산소분압과 같은 배양조건에 의해 조절되는 특징을 보임으로써 수정 및 배 발달에 영향을 줄 수 있는 인자로 제시되었다. 그리고 $K_{2P}$ 통로는 과산화수소에 의해 유도된 마우스 전핵배의 세포 사멸에 있어서 칼륨 이온의 유출에 관여함이 확인되었다. $K_{2P}$ 통로의 생식세포 및 생식기관 내 발현 형태와 생리학적 특징은 생식생리학에 있어서 이온 통로 관련 기능들을 이해하는데 도움이 될 것이다.
Procedures to separate motile. normal & motile and acrosome-reacted sperm with high efficiency have clinical application in Assisted Reproductive Technology in terms of increasing the probability of fertilization by a normal sperm and subsequent normal embryonic development. This study evaluated the effects of 10 sperm preparation techniques [Swim-up from a washed pellet (SU). Swim-up from semen (SO). Continuous Percoll Gradients I (PIC). Discontinuous Percoll Gradients I (PID). Continuous Percoll Gradients II(P II C). Discontinuous Percoll Gradients II(P II D), SpermPrep (SFC). Wang's tube (WT). Albumin Gradients (AG), Low temperature capacitation (LTC)] on motility (%), normal morphology (%), motile sperm recovery rate(%). morphologically normal & motile sperm recovery rate (%), true acrosome reaction (%) and fertilizing ability. A P II D proved to be an effective means of separating morphologically normal & motile sperm. Our results indicated the P II D has advantages as compared with other methods in terms of recovery rate. enhancement of motility and normal morphology. And a LTC seems to be an effective means of enhancing the true acrosome reaction and fertilizing ability. These results suggest that the combined method of LTC and P II D for separation of morphologically normal & motile sperm and acrosome reacted sperm may be a useful procedure for intrauterine insemination and in vitro fertilization in the management of male factor infertility as well as for isolation of subpopulation of sperm for basic research.
46,XX 남성은 여성의 핵형을 가지나, 남성의 표현형을 나타내는 경우를 말한다. SRY 유전자는 Y 염색체(Yp 11.31)의 단완에 위치하며 인간에서 성을 결정하는 중요한 요인이다. 본 증례는 무정자증의 임상증상이 보이는 46,XX 남성의 정확한 원인분석을 위해 말초혈액분석에서 세포유전학적인 방법과 분자유전학적인 방법을 함께 병행한 보고이다. 남성 표현형과 비교하여 성에 불일치 소견이 보여, 그 원인을 찾기 위해 QF-PCR, FISH와 Multiplex PCR 분석 등의 분자유전학적 방법을 적용하였다. 그 결과, 여성의 성 염색체 XX를 가지되 SRY 유전자가 존재하여 남성 표현형을 보이면서 무정자증이 된 경우이다. 따라서, 일반적인 세포유전학 방법을 기초로 QF-PCR, FISH와 Multiplex PCR 분석 등과 같은 분자유전학적 방법을 병행하면 환자의 정보를 빠르고 정확하게 제공하는데 효과적이고 유용하다.
The present study was undertaken to clarify the role of TEST-Yolk Buffer(TYB) as a factor for the improvement of human sperm fertility potential. We examined the effects of low temperature capacitation using TYB on sperm motility (%), motility pattern, normal morphology, true acrosome reaction, sperm penetration assay and human in vitro fertilization. Comparing the TYB method and swim-up method, the sperm motility(%) of selected sperm was not significantly different, but statistically significant differences were found in curvilinear velocity, linearity, lateral head displacement, normal morphology(%) and true acrosome reaction(%)(p<0.05). Results obtained from the sperm penetration assay demonstrated that the penetration index and penetration rate were increased significantly(p<0.05) when the spermatozoa were incubated in TYB, as compared with swim-up method. And fertilization of intact human oocytes was more succesful when spermatozoa were pretreated with TYB at $4^{\circ}C$ for 48 hours as compared with swim-up method. Our results show that TYB method have advantages in terms of enhancement of sperm hyperactivation, increased true acrosome reaction, increased ability to penetrate zona-free hamster ova and augmented fertilization of human oocytes, suggesting that TYB is superior in its ability to preserve sperm motility and fertilizing ability.
멸종위기 담수어류인 얼룩새코미꾸리 Koreocobitis naktongensis의 난 발생 과정 및 자치어 형태 발달을 조사하였다. 인간 융모성 성선자극호르몬(HCG)을 10 IU/g의 농도로 암컷의 복강에 주사하여 성숙란을 얻었으며, 건식법으로 정자와 수정시켰다. 수정란의 난경은 1.0~1.2 mm로 유구는 존재하지 않았다. 배체는 수온 $20{\pm}1^{\circ}C$에서 수정 38시간 후부터 부화하기 시작하였다. 부화 직후 자어의 전장은 2.5~2.8 mm로 입과 항문은 아직 열리지 않았다. 부화 후 7일째 자어는 전장 4.5~5.2 mm로 난황은 완전히 흡수되었다. 부화 후 50일째 모든 지느러미가 완성되는 치어기로 이행하였고, 이때의 전장은 21~27 mm였다.
The aim of this study was to evaluate the improvement of testicular sperm motility following different culture conditions such as human follicular fluid (hFF) and temperature. Testicular tissues obtained from azoospermia (n=21) were minced into small pieces by blade and recovered sperm suspension were cultured in Ham's F10 with or without 40% hFF at different temperatures (Group I: 37$^{\circ}C$/with hFF, Group II: 32$^{\circ}C$/withGroup III: 37$^{\circ}C$/without, Group IV:32$^{\circ}C$ /without The motility and viability of sperm were monitored during culture for 48 hours. Initial motility of testicular sperm was 10.9$\pm$1.9%. After 24 hours culture, sperm motility was 23.5$\pm$2.1% (Group I), 8.1$\pm$1.1% (Group II), 10.4$\pm$ 1.4% (Group III) and 4.0$\pm$0.8% (Group IV), respectively. After 48 hours, the motility had been changed as 32$\pm$2.3% (Group I), 14.3$\pm$1.7% (Group II), 5.3 $\pm$1.4% (Group III) and 4.3$\pm$0.9% (Group IV). In hFF group (I and II), sperm motility of group I cultured at 37$^{\circ}C$ was higher than those of group II at 32$^{\circ}C$. But, sperm viability of group I cultured at 37$^{\circ}C$ was lower than those of group II at 32$^{\circ}C$ (54.4$\pm$4.1% vs. 59.4$\pm$3.7%) after cultured for 48 hours. We acquired the best motility of testicular sperm when performed in vitro culture for 48 hours in hFF supplemented medium at 37$^{\circ}C$. Increase of sperm motility by in vitro culture could be useful tool fur human TESE-ICSI program.
The effect of antisperm antibodies (ASA) on the human in vitro fertilization (lVF) process was evaluated by analyzing the IVF data between October and December 1988 at Seoul National University Hospital prospectively. The immunobead test (IBT) was used to identify Ig G, Ig A, and Ig M in the serum, semen, and follicular fluid from 93 couples undergoing in vitro fertilization-embryo transfer (lVF-ET ) . The fertilization rate in couples with ASA to sperm head of at least one isotype in female serum (n= 10) was significantly less than that in couples without ASA to sperm head (n=83; 28.5% versus 45.3% , p=0.028). The presence of ASA to sperm head in follicular fluid (n=8) also reduced fertilization rate from 45.3% to 24.4% (p=O.0l3). However, ASA binding to sperm head in male serum and semen did not predict fertilization. Similarly, ASA binding to sperm tail and tail-tip did not reduced the oocyte fertilization rate significantly in any of the fluids tested. The zygote cleavage rate was not reduced in the presence of ASA. These results suggest that the presence of ASA to sperm head in female serum and follicular fluid is associated with reduced fertilization in IVF-ET. Another observation is that the oocyte that do fertilize in the presence of antisperm antibodies can subsequently proceed with normal cleavage. The results of this investigation therefore suggest that the IBT is a useful test forscreening of women participat.ing IVF-ET program.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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