Kim, Hyun-Jung;Kim, Chung-Hyon;Lee, Joong-Yeup;Kwon, Jae-Hee;Hwang, Do-Yeong;Kim, Ki-Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.37
no.1
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pp.57-64
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2010
Objectives: Likewise fresh cycle, it is also important to select right blastocysts for transfer in purpose of improving the pregnancy and implantation rates in frozen-thawed embryo transfer (ET) cycles. To investigate the relationship between the developmental velocity at the time of cryopreservation and pregnancy rates, we compared pregnancy rates between the day 5 cryopreservation group and the day 6 cryopreservation group. Methods: Transfers of frozen-thawed blastocysts which had been cryopreserved by vitrification on day 5 or day 6 were performed between January 2006 and June 2007. Ethylene glycol, DMSO, and pull and cut straws were used for vitrification and artificial shrinkage was done in expanded blastocysts. Thawing was performed on the day before transfer and thawed blastocysts were cultured in for 15~18 hrs in Quinn's blastocyct media. Blastocyst survival was assessed before transfer and post-thaw survival was defined as >50% of cells remaining intact and blastocoele re-expansion by the time of transfer. Results: Transfers of thawed blastocyst had been cryopreserved on day 5 were 52 cycles and 41 transfer cycles were cryopreserved on day 6. Patient characteristics, the number of transferred embryos and the survival rate of thawed blastocysts were not different in each cryopreservation day. But the biochemical pregnancy, clinical pregnancy, ongoing pregnancy, and implantation rate were significantly high in transfer of frozen-thawed blastocyst which were cryopreserved on day 5. Conclusions: The clinical pregnancy and implantation rate of day-5 blastocyst showed significantly higher than those of day-6 blastocyst in frozen-ET cycles. This result indicated that developmental rate of blastocyst at cryopreservation time in frozen-thawed cycle is discriminative marker of pregnancy outcome as like in fresh cycle.
The purpose of this study was to evaluate the effects of Cytochalasin B treatment on the survivability The different concentration and exposed times of CB of porcine embryos frozen by vitrification were observed. The results were summarized as follows ; 1. The survivability rates of the porcine embryos treated CB(60.5%) were significantly higher than non-treated(32.8%)(p<0.1). However the recovered with normal morphology rates(84.2%) were no significantly different than non-treated(81.9%). 2. We observed by different concentration of CB treatment, the group of CB treated with 7.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ were significantly showed a higher of normal morphology(44/45; 98%) and viability rate(33/45;73%) than other groups(morphology: 65∼70%, viability: 15∼74%)(p<0.05). While the control was lower as 70% of morphology and 38% of viability. 3. We examined exposed time of in-vitro CB treated embryos, the group of more than 20 minutes exposed were significantly were observed a higher rates of normal morphology and viability(p<0.05). And the group of 13 minutes, 14,000 rpm centrifuged(64%) were significantly higher than non-centrifuged(36%). Survivability of porcine embryos were improved in CB treated group. It suggested that 7.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ concentration of CB treatment, 20 minutes exposed times and 13 minutes, 14000 rpm centrifuged prior to vitrification improve normal morphology and survivability rates.
This study was conducted to investigate effects of cryopreservation by vitrification on the seed germination rate and growth and physiological properties of seedlings of Maackia amurensis. Cryopreservation significantly decreased the germination rate of seeds of M. amurensis, but the reduction of germination rate was mitigated by the treatment of cryoprotectant (plant vitrification solution, PVS2) before plugging into liquid nitrogen and fast thawing rate after cryopreservation. Long-term PVS2 exposure decreased seed germination rate, whereas cryopreservation time didn't have influence on seed germination rate. In addition, growth and physiological properties of seedlings were not affected by PVS2 exposing time and cryopreservation time. Therefore cryopreservation could be widely used as a technique of long-term ex situ conservation without any damage and deterioration of cells or tissues of the forest seeds. However, in order to increase the effect of cryopreservation, we have to develope the lower toxic cryoprotectant and suitable techniques to the structural or chemical properties of a variety of seeds.
This study was performed to analysis of chemical constituent in Polygonum multiflorum root (PMR) by different dry methods (hot-air dry, shade dry, and freeze dry). The results are summarized as followings; major free sugar were detected fructose, glucose, and sucrose in dried PMR based on various dry methods. The highest content of free sugars was found in freeze dried PMR. The four organic acids were detected in dried PMR by HPLC analysis. The content of oxalic acid in shade dried PMR was higher than the dried PMR by different dry methods. The content of total amino acid and essential amino acids were high in the orders of freeze drying > shade drying > hot-air drying. The potassium and magnesium levels of freeze dried PMR was significantly higher than the other drying method of PMR. Whereas the calcium and sodium levels were higher in hot-air dried PMR. The major fatty acids were determined the linoleic acid in PMR by different dry methods.
Kim, I.-D.;Ahn, M.-H.;Hur, T.-Y.;Hong, M.-P.;Seok, H.-B.
Journal of Embryo Transfer
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v.19
no.2
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pp.155-163
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2004
The aims of this study are 1) to test oocytes and embryos collected from in-vitro to achieving the valuable protocol by culturing, vitrifying and thawing of oocytes/embryos, and 2) to transfer them to recipient, and finally have resulted in pregnancies from recipient females after surgical or nonsurgical transfer. In vitro maturation and fertilization were performed according to Funahashi et al (1994). Glucose-free NCSU 23 supplemented with 5 mM sodium pyruvate, 0.5 mM sodium lactate and 4 mg/ml bovine serum albumin for 2 days at $39^{\circ}C$, and 10% fetal bovine serum albumin was added to the culture medium thereafter. Embryos were treated with 7.5 ${\mu}g/ml$ cytochalasin-B for 30 min, centrifuged at 13,000 rpm for 13 min and then exposed sequentially to an ethylene glycol(EG) vitrification solution, aspirated into OPS, and plunged/thawed into/from liquid nitrogen. In vivo embryos were surgically collected from three dornors after AI for control group. Forty-nine embryos were washed 3 times in mPBS + 10% FBS, followed treatments : cultured, centrifuged, vitrified, recovered and transferred to recipients as in vitro prepared embryos. Three recipients were transferred individually with 100, 100 frozen embryos derived from abattoir and 34 fresh embryos by surgically, and another three recipients were transferred individually with 150, 150 frozen embryos and 100 fresh embryos by nonsurgically, respectively. all recipient sows exhibited delayed returns to estrus. To our knowledge, theses results suggest that required an improved techniques, more vigorous embryos preparation and substitute to gilt with cleaner uterous condition.
Effects of cooking and drying methods on the taste component and microstructure of shrimp, Metapenaeus joyneri, were investigated. The nucleotides and their related compounds of fresh shirmp such as ATP, ADP, AMP, IMP, inosine and hypoxanthine were detected. AMP was detected as a trace amount in fresh shrimp, however, it increased up to $23.5{\sim}45.7{\mu}$ moles with cooking and drying due to the decomposition of ATP and ADP to AMP during cooking and drying. The major component of the free amino acids of fresh shrimp was arginine followed by glycine, lysine, proline and alanine. These free amino acids contents were 70% of the total free amino acids. One hundred grams of fresh shrimp contained 1,198mg (dry basis) of the total free amino acids. However, for hot air and freeze dried cooked shrimps it was decreased down to 342mg (dry basis) and 503mg (dry basis), respectively. It might be due to the dissolution of soluble amino acids during cooking. Hot air-and freeze-dried fresh shrimps was higher in hardness and brittleness but lower in cohesiveness and gumminess than hot air-and freeze-dried ones with boiling and microwave heating. Freeze dried shrimp had softer myofibril texture than hot air dried one. At the same time, more dense and multiporous structure in the tissue could be obtained from the hot air and freeze drying, respectively, after microwave heating of shrimps.
In present paper, we investigated the quality stability of sardine burgers during storage at $-20{\pm}2^{\circ}C$. During frozen storage of sardine burger, the PH were decreased, while volatile basic nitrogen contents were increased. The results of changes in peroxide values, thiobarbituric acid values, fatty acid compositions and color values during frozen storage showed that lipid oxidation and discolorization of antioxidant treated sardine burger and vacuum packed sardine burger could be effectively retarded. The changes in the taste compounds such as free amino acid, nucleotide and their related compounds, total creatinine, betaine and trimethylamine oxide, total amino acids and texture profile analysis of vacuum packed sardine burger were negligible during frozen storage. From the results of sensory evaluation and chemical experiments, the vacuum packed sardine burger could be preserved in good quality during frozen storage of 90 days.
The post-thaw survival of mouse embryos of the various developmental stages was determined after cryopreservation by vitrification in a solution containing ethylene glycol, Ficoll and sucrose (EFS). All the embryos were equilibrated for 2 minutes just prior to freezing. The number of blastomeres during in vitro development was counted by nuclei higher rates of post-thaw survival were obtained from the embryos of 2-cell(92.2%), 8-cell(77.2%) or morula stage(90.0%) than those of blastocyst stage(62.7%). The number of blastomeres per embryo following in vitro culture for 24 hours was significantly(P<0.05) smaller as 66.0f22.3 in vitrified and thawed morulae than fresh morulae(91.7$\pm$12.2).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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