The present study was carried out to investigate the effects of Woowhangcheongshim-won(WCW) on the extracellular concentrations of amino acid neurotransmitters(glutamate, aspartate, GABA, glycine, taurine, alanine, and tyrosine) and organic acid (lactate and pyruvate) in striatum and cerebral infarction volume in rats subjected to permanent focal cerebral ischemia induced by 2 hours of middle cerebral artery occlusion(MCAO), using intracerebral microdialysis as the sampling technique, Microdialysis probes were inserted into the lateral part of the caudate-putamen 2 hours before the experiment and microdialyzates were collected at 20min intervals and analyzed by high performance liquid chromatography, WCW significantly decreased the infarction volume with reducing focal cerebral ischemia-induced increase of extracellular glutamate, asparate, and tyrosine. On the other hand, the increase of GABA and taurine was enhanced after treatment of WCW in the ischemia-induced rats, These results suggest that WCW can produce a neuroprotective effect against cerebral ischemia by regulating extracellular excitatory and inhibitory amino acid levels in relation to the concept of excitotoxicity in brain ischemia.
Woohwangchungsim-Won has been widely used for the treatment of appoplexy, hypertension, arteriosclerosis, insomnia and cerebrovascular accident, etc in oriental hospital and pharmacy. In order to investigate the efficacy of Woohwangchungsim-Won, the water extract of it were bioassayed for isolated ileum, blood vessels, blood pressure, heart and diuresis. The results of this studies were as follows; Spontaneous motilities of isolated ileum of mice were strongly suppressed, and contraction of isolated ileum of mice and guinea-pigs induced by acetylcholine chloride, barium chloride and histamine were inhibited. Vaso-dilating action due to vascular smooth muscle relaxation in frogs and rabbits, and hypotensive action in anesthetized rabbits were noted. Negative inotropic action on the isolated frog heart and diuretic effect in rabbits were shown.
본 연구는 우황청심원을 비롯한 상용되는 20종의 한약제제를 대상으로 9종의 시토크롬 동종효소에 대한 대사능의 저해정도를 고속 스크리닝 기법을 이용하여 탐색함으로써, 한약제제와 약물의 병용으로 인한 약물 상호작용 가능성을 평가하고자 하였다. 인체 간 마이크로좀 시료에 9종의 주요 시토크롬 약물대사효소의 지표약물과NADPH-generating system및 한약제제(500 ${\mu}g/ml$)를 첨가한 후 $37^{\circ}C$에서 15분간 반응시켜 생성된 각각의 대사물을 LC/MS/MS를 이용하여 정량하여 시토크롬 동종효소 활성의 변화를 평가하였다. 그 결과 우황청심원 현탁액 및 황련해독탕 물 추출물이 각각 CYP2B6 및 CYP2D6 효소 활성을 선택적으로 강력하게 저해하였다. 이러한 결과는 약국에서 쉽게 구입할 수 있는 한약제제들 중 일부는 인체 간 시토크롬 활성 저해능을 가지고 있고, 이들 효소에 의해 대사되는 약물과의 병용 복용시 약물상호작용 발생 가능성이 있음을 의미한다. 향후 한약제제에서 저해능을 나타내는 주된 성분을 규명하여 이 성분의 저해능과 저해 기전을 살피는 노력이 필요할 것이다.
Objectives: The purpose of this investigation was to evaluate the effects of Woohwangcheongsim-won and to study the mechanism for neuronal death protection in hypoxia with Embryonic day 20 (E20) cortical cells of a rat (Sprague Dawley). Methods: E20 cortical cells were dissociated in neurobasal media and grown for 14 days in vitro (DIV). On 14 DIV, Woohwangcheongsim-won was added to the culture media for 24 hrs or 72 hrs. On 17 DIV, cells were given a hypoxic shock and further incubated in normoxia for another three days. On 20 DIV, Woohwangcheongsim-won's effects for neuronal death protection were evaluated by LDH assay, propidium iodide stain and phospho-H2AX immunostain and the mechanisms were studied by Bcl-2, Bak, Bax, caspase family, PKCα, ca1pain I. Results & Conclusions : 1. This study indicated that Woohwangcheongsim-won's effects for neuronal death protection in hypoxia were confirmed by LDH assay, propidium iodide stain and phospho-H2AX immunostain in culture method of Embryonic day 20(E20) cortical neuroblasts. 2. Woohwangcheongsim-won's mechanisms for neuronal death protection in hypoxia are to reduce the membrane damage fraction, to restrain DNA truncate, to restrain inflow of cytochrome c into cellularity caused by Bak diminution, to reduce the caspase cascade intiator caspase-8 and the effector caspase-3, to reduce the calpain I activity and to increase PKCand its activity in the membrane fraction. (J Korean Oriental Moo 2002;23(3):145~163)
This study was conducted to find out the effects of Woohwangchungsimwon on learning and memory in the NOS inhibitor treated rats. The Morris water maze was used in evaluating them. The result of the study was summarized as follows. 1. In the learning test, three groups have showed a gradual improvement of learning ability by repeating the trials in Morris water maze. WHCS group have showed statistical improvement than control group at 4,5,6 trial(p<0.05, p<0.01, p<0.01). 2. In the memory test, the first latency of WHCH group was statistically shortened than that of control group(p<0.05). 3. In the memory test, there was no statistical difference in the entry number between WHCH group and control. 4. In the memory test, there was no statistical difference in the memory score between WHCH group and control. The result of this experimental study presents that Woohwangchungsimwon has the improving effect on impaired learning and memory in NOS inhibitor treated rats, and implies that Woohwangchungsimwon may be one of the useful prescription for the treatment of vascular dementia after cerebral ischemia.
Objectives: The purpose of this investigation is to evaluate the effects of Woohwangcheongsim-won and to study the mechanism for neuronal death protection in OGD (oxygen-glucose deprivation) model with embryonic day 20 (E20) cortical cells of a rat (Sprague Dawley). Methods: E20 cortical cells were dissociated in neurobasal media and grown for 14 days in vitro (DIV). On 14 DIV, Woohwangcheongsim-won was added to the culture media for 72 hrs. On 17 DIV, cells were given an oxygen-glucose deprivation shock (2hrs and 4hrs) and further incubated in normoxia for another three days. On 20 DIV, Woohwangcheongsim-won's effects for neuronal death protection were evaluated by LDH assay and the mechanisms were studied by Bcl-2, Bak, Bax, caspase family. Results & Conclusions: 1. This study indicates that Woohwangcheongsim-won's effects for neuronal death protection in OGD model is confirmed by LDH assay in culture method of embryonic day 20(E20) cortical neuroblasts. 2. Woohwangcheongsim-won's mechanisms for neuronal death protection in OGD model are to restrain inflow of cytochrome c into cellularity caused by Bcl-2 increase (2hrs and 4hrs), to reduce the caspase cascade initiator caspase-8 (4hrs).
Acute toxic effects of the Woo Whang Chung Shim Won suspension and pills were studied with the doses of 60, 74, 90, and 110 ml/kg in mice. In this study, we daily examined number of deaths, clinical signs, body weights, and pathological findings for 7 days after administration of Woo Whang Chung Shim Won. All mice given the highest dose (110ml/kg) died at 24 hour after administration of Sam-Sung Woo Whang Chung Shim Won suspension (Byunbang, SS-BS and Wonbang, SS-WS), one male and two female mice given 90 ml/kg dose of SS-BS died, and a few mice given middle dose (74 ml/kg) of SS-WS died. In control group (110 ml/kg) treated with vehicle (SS-BS and SS-WS), three out of 5 males and two out of 5 females mice died during the study. However, in animals treated with Kwang-Dong Woo Whang Chung Shim Won suspension (KD-S) and pill (KD-P), deaths were not observed. In the clinical signs, increase of drooling and decrease of spontaneous motor activities were observed in the highest dose group (110 ml/kg). No significant dose-related change in body weight was observed. The results suggest that the toxic effect of SS-BS and SS-WS may be atttributed to the solution for the Woo Whang Chung Shim Won suspension.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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