The characteristics of enzyme and gene for mannanase B had been reported from Cellulosimicrobium sp. YB-43 producing some kind of mannanase. A gene coding for the enzyme, named mannanase C (ManC), was expected to be located downstream of the manB gene. The manC gene was cloned by polymerase chain reaction and sequenced completely. From this nucleotide sequence, ManC was identified to consist of 448 amino residues and contain a carbohydrate binding domain CBM2 besides a catalytic domain, which was homologous to mannanase belonging to the glycosyl hydrolase family 5. The catalytic domain of ManC showed the highest amino acid sequence similarity of 55% with the mannanases from Streptomyces sp. SirexAA-E (55.8%; 4FK9_A) and S. thermoluteus (57.6%; BAM62868). The His-tagged ManC (HtManC) lacking N-terminal signal peptide with hexahistidine at C-terminus was produced and purified from cell extract of recombinant Escherichia coli. The purified HtManC showed maximal activity at $65^{\circ}C$ and pH 7.5, with no significant change in its activity at pH range from 7.5 to 10. HtManC showed more active on konjac and locust bean gum (LBG) than guar gum and ivory nut mannan (ivory nut). Vmax and Km values of the HtManC for LBG were 68 U/mg and 0.45 mg/ml on the optimal condition, respectively. Mannobiose and mannotriose were observed on TLC as major products resulting from the HtManC hydrolysis of mannooligosacharides. In addition, mannobiose and mannose were commonly detected as the hydrolyzed products of LBG, konjac and ivory nut.
Kim, Ok-Mi;Jang, Se-Young;Woo, Seung-Mi;Jo, Yong-Jun;Choi, Myung-Sook;Jeong, Yong-Jin
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.10
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pp.1516-1521
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2010
This study was conducted to investigate the physicochemical and quality characteristics of alcohol fermentation of tomato. For yeast, Saccharomyces bayanus Lalvin EC-1118 displayed the highest alcohol content (11.8%), whereas titratable acidity and pH did not differ significantly between different yeasts. Alcohol fermentation conducted at higher temperature ($25^{\circ}C$) resulted in higher alcohol content and lower sugar level. The highest alcohol content was produced using 11.4% sucrose and 11.1% fructo-oligosaccharide. These two saccharides were suitable for tomato alcohol fermentation. Lycopene levels were similar regardless of sugar type, and were approximately 4.2 mg%. To improve lycopene content, three types of fruit wine with low-dose lycopene (LDL), medium-dose lycopene (MDL), and high-dose lycopene (HDL) were made. Their alcohol contents were not significantly different (10.0~10.8%). Lycopene contents of LDL, MDL, and HDL wine were 4.25 mg%, 11.40 mg%, and 20.45 mg%, respectively. Therefore, HDL tomato wine should be manufactured.
This study was conducted to screen an alginate-degrading microorganism and to investigate the characteristics of the alginate-degrading activity of its crude enzyme. A marine bacterium which produces extracellular alginate-degrading enzymes was isolated from the brown alga Sargassum thunbergii. 16S rRNA sequence analysis and physiological profiling resulted in the bacterium's identification as a Vibrio crassostreae strain, named Vibrio crassostreae PKA 1002. Its optimal culture conditions for growth were pH 9, 2% NaCl, $30^{\circ}C$ and a 24 hr incubation time. The optimal conditions for the alginate degrading ability of the crude enzyme produced by V. crassostreae PKA 1002 were pH 9, $30^{\circ}C$, a 48 hr incubation time and 8% alginic acid. The alginate degrading crude enzyme produced 3.035 g of reducing sugar per liter in 4% (w/v) alginate over 1 hr.
The marine microorganism PX-1, which can hydrolyze xylan, was isolated from coastal sea water of Jeju Island, Korea. Based on the 16S rRNA gene sequence and chemotaxonomy analysis, PX-1 was identified as a species of the genus Aestuariibacter and named Aestuariibacter sp PX-1. From the culture broth of PX-1, an extracellular xylanase was purified to homogeneity through ammonium sulfate precipitation and subsequent adsorption chromatography using insoluble xylan. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and gel filtration chromatography estimated the molecular weight of the purified putative xylanase (XylA) as approximately 64 kDa. XylA showed xylanase activity toward beechwood xylan, with a maximum enzymatic activity at pH 6.0 and 45℃. Through thin-layer chromatographic analysis of the xylan hydrolysate produced by XylA, it was confirmed that XylA is an endo-type xylanase that decomposes xylan into xylose and xyloligosaccharides of various lengths. The Km and Vmax values of XylA for beechwood xylan were 27.78 mM and 78.13 μM/min, respectively.
The effect of sucrose fatty acid ester(SE,{\;}$0{\sim}5%,{\;}w/w)$ and oligosaccharide(OS,{\;}$0{\sim}1.0%,{\;}w/w)$ additions on texture properties, hardness(H), stickiness(-H), stickiness/hardness(-H/H) and elastic recovery (b/a) of cooked rice stored at $20^{\circ}C$ were studied. The H of stored cooked rice decreased with increasing storage time. The addtion of SE and OS showed lower H value than control throughout the storage period up to 12hrs and after 8hrs of storage time, respectively. The -H of stored cooked rice increased with increasing storage time. The -H value of SE added cooked rice showed much lower than that of the control in the early stage of the storage and then almost the same value as that of control. The control and SE or OS added cooked rice resulted the value of -H/H between 0.15 and 0.20, which had been found as acceptable textural parameters, after 10hrs of storage at $20^{\circ}C$. The b/a of stored cooked rice decreased with increasing storage time, but was not significantly affected by additives. After 15 days of storage at $4^{\circ}C$, the addition of SE had greater effect on the reduction of hardness of stored cooked rice than that of OS.
In an attempt to improve the productivity of ${\beta}-galactosidase$ from Bacillus sp. A1, which was isolated from soil and has remarkably higher transgalactosylation activity than lactose hydrolysis activity, a chemical mutation procedure using N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine followed by selection was conducted. The final selection, designated as Bacillus sp. A4442, turned out to show a substantially increased enzyme productivity. Catabolite repression by glucose and lactose requirement as an inducer for the enzyme biosynthesis, which were shown in the parent strain, was markedly diminished; instead it was found out that galactose acts as another inducer. Because pH of medium, one of the most important factors for cell growth as well as enzyme production, is closely related with the sugar concentration during culture, it was kept in the optimum range of $6.5{\sim}7.5$; for this the initial glucose concentration was adjusted to be 0.5% which was thereafter maintained by the controlled pumping-in of lactose using the pH-stat technique. By doing so, we were able to increase the productivity of ${\beta}-galactosidase$ with high transgalactosylation activity up to $44\;unit/m{\ell}-broth$.
Korean mistletoe (Viscum album L) extract has been found to posses immunoregulating activity. In this study, Korean mistletoe extract, M11C (non-lectin components), was used to know whether this extract activates splenocytes to secret interleukin $1\beta(IL-1\beta)$. The splenocytes were treated with M11C, and then collected the supernatant and cell lysate that were prepared to analyze the level of $IL-1\beta$, using ELISA, immunoblotting, and RT-PCR. Maximum effective dose and time of M11C on $IL-1\beta$ secretion from splenocytes were $200{\mu}g/m\ell$ and 8 hours, respectively. Treatment dose and time for the maximum expression of $IL-1\beta$ mRNA were $200{\mu}g/m\ell$ and 4 hours, respectively. Saccharide degradation enzyme Viscozyme L completely blocked the effect of M11C on $IL-1\beta$ secretion from splenocytes. As the result, among non-lectin components saccharide could be regarded as a main component for $IL-1\beta$ expression from splenocytes.
To determine the optimum coagulants concentrations for preparing soybean-curds, the transmittance of soybean-curd whey using spectrophotometer has been measured. The textural properties of soybean-curds were examined by texture analyzer and sensory evaluations. The general components, oligosaccharides and amino acids in soybean-curd wheys were analyzed. Protein patterns of soybean-curd wheys comparing with soyflour and soymilk were investigated. By texture analyzer, hardness, cohesiveness, springiness, and gumminess of Cacl$_2$ soybean-curd, MgCl$_2$ soybean-curd were higher than those of CaSO$_4$ soybean-curd and GDL soybean-curd. In the sensory evaluations, CaSO$_4$ soybean-curds and GDL soybean-curds were smoother and moister than others. Glutamic acid and aspartic acid were the first two abundant amino acids in three kinds of soybean-curd wheys, but arginine was the most abundant amino acid in GDL soybean-curd whey. Total sugar content of soybean-curd wheys were about 12-13 g/l, and the main sugars among 5 kinds of sugars were sucrose and raffinose. Electrophoresis using SDS-PAGE showed that glycinin and P-conglycinin, the main proteins of soybean appeared in soy flour and soymilk, and only low molecular weight subunits appeared in soybean-curd wheys.
The purpose of this study is to observe the effect of bovine colostral whey fractions on proliferation of Th1 cells and to verify the effect of whey fractions that are directly related to growth of Th1 cells on macrophages activation. Whey was fractionated into 3 fractions depending on by ultrafiltration (fraction (Fr.) I; molecular weight (Mw.) 10 kDa and more, Fr. II; Mw. $1\;kDa{\sim}10\;kDa$, Fr. III; Mw. less than 1 kDa) and examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Fr. II stimulated and proliferated Th1 cells most at 1 mg/mL concentration and the percentage of cell proliferation was 67.1%. The secretive induction of tumor necrosis $factor-{\alpha}$$(TNF-{\alpha})$ by whey, Fr. II, protein fraction (Fr. P) and oligosaccharide fraction (Fr. O) after fractionating Fr. II into Fr. P and Fr. O on the basis of Th1 cells growth was that Fr. O had more 80% secretive induction of $TNF-{\alpha}$ than that of $1\;{\mu}g/mL$ lipopolysaccharide that was positive control. So confirmed that Fr. O induced $TNF-{\alpha}$ secretion by activating macrophages.
Choi, Sang Woo;Chae, Won Gi;Kang, Gyung Young;Chung, Jong Il
Journal of Life Science
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v.29
no.7
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pp.774-778
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2019
Soybean [Glycine max (L.) Merr.] is one of the major food sources of protein, oil, carbohydrates, isoflavones, and other nutrients for both humans and animals. However, soybean seeds contain antinutritional factors, such as lectin protein, Kunitz Trypsin Inhibitor (KTI) protein, and stachyose. The objective of this research was to stack recessive alleles for development a triple recessive genotype, titilelers2rs2, with low KTI protein, lectin protein, and stachyose contents. Three parents (Gaechuck#2, PI200508, and 14G20) were used to develop the breeding population. The presence or absence of the lectin and KTI proteins was detected by western blotting. The stachyose content in mature seeds was determined by HPLC. Agronomic traits, such as plant type, plant height, maturity date, lodging, seed quality, and 100-seed weight, were evaluated for the four $F_3$ plant strains. One $F_4$ plant strain with the desired agronomical traits was selected. One new strain with the triple recessive titilelers2rs2 genotype was developed. The plant height of the new strain was 51 cm and the 100-seed weight was 31.0 g. The new strain had a yellow seed coat and yellow hilum. The stachyose content of the new strain was 3.8 g/kg. One strain developed in this research will be used to produce improved yellow soybean cultivars that are free of lectin and KTI proteins and low in stachyose content.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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