For the purpose of discussing two colorimetric methods modified from the Standard Methods of Sanitary Inspection. Guide issued by the Ministry of Health and Social Affaires of Korea (1985), the Standard Methods of Analysis of Hygienic Chemists authorized by the Pharmaceutical Society of Japan.(1980) and HPLC (high performance liquid chromatography) method were studied. Two kinds of ham, sausage samples and four kinds of roe samples were analyzed by the HPLC method and the results agreed well with those obtained by the diazotization-coupling colorimetric method prescribed in the Standard Methods of Analysis for Hygienic Chemists authorized by the Pharmaceutical Society of Japan (1980) and two modified methods.
Selection of oocyte cryopreseivation method is a prerequisite factor for developing an effective bank system. To develop an effective vitrification method, we examined whether damages in spindle and chromosome morphology induced by vitrification. Intact cumulus-enclosed oocytes were vitrified with DPBS with 5.5 M ethylene glycol and 1.0 M sucrose, and loaded onto eletron microscopic copper grid for storing in liquid nitrogen. Intact vitrified and thawed oocytes were immunostaining for tubulin and karyotying for chromosome. Vitrfied and thawed oocytes had a higher rate of chromosome (32.8% vs. 19.6%) and spindle (32.3% vs. 20.2%) abnormalities compared with fresh oocytes. Mouse oocytes after vitrification at the mature stage showed increased incidence of chromosomal and spindle abnormalities.
To establish rabbit Embryonic Stem (ES) cells, rabbit one-cell embryos were collected and cultured in vitro to blastocysts. Blastocysts were co-cultured with mouse embryonic fibroblasts (MEF), rabbit embryonic fibroblasts (REF) or 570 cells expressing LIF (SNL). Although rabbit ES cells were isolated with low efficiencies, total 8 ES cell lines were kept in vitro with normal colony shape. The MEF was the best feeder for rabbit ES cell isolation in regard to growth rate and undifferentiated morphology. The doubling time of rabbit ES cells in MEF was about 84 hours and the undifferentiated morphology was maintained following passing and freezing processes. These rabbit ES cells were differentiated into embryoid body following the culture in the uncoated dishes, indicating that they were undifferentiated stem cells.
Park, Jong-Suk;Kim, Suk-Weon;In, Dong-Su;Eun, Jong-Seon
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.1
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pp.109-113
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2003
Cryopreservation of embryogenic callus derived from apical meristem culture was attempted by slow prefreezing method (two-step method) with various cryoprotectants in sweetpotato cv. 'Yulmi' Precultured embryogenic calli on medium containing 10 mg/L ABA prior to slow prefreezing in liquid nitrogen indicated higher survival rate than 1.0 mg/L ABA preteatment. The cryoprotectant comprising 1.28 M DMSO in 0.4 M sucrose solution gave the best survival (over 46%) of sweetpotato cells exposed to liquid nitrogen as determined by TTC reduction and FDA staining method. Cryopreserved calli cultured on MS medium with 1.0 mg/L 2,4-D were grown for 4 weeks in the dark and induced embryos after another 4 weeks. They were subcultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L kinetin for 2 weeks and regenerated into normal plantlets in MS basal medium.
결정성 고분자수지는 가공조건에 의해 결정되는 미세구조의 변화에 따라 최종물성 이 현저히 달라지므로 최종 성형품의 물성을 극대화하기 위해서는 성형가공 중에 필연적으 로 부가되는 열이력 뿐만 아니라 전단이력이 결정화 거동에 미치는 영향을 규명하고 가공조 건의 최적화를 통하여 미세구조를 적절히 제어하는 것이 요구된다. 따라서 본 연구에서 in-situ 상태로 전단유도 결정화거동을 조사할수 있는 rheo-kinetic 실험 방법을 개발하고 결정화 거동에 미치는 열이력과 전단이력의 영향을 규명하고자 하였다. 이를 위해 비교적 결정화 속도가 빠른 폴리 부틸렌 테레프탈레이트 수지를 대상으로 냉각조건, 전단부가시간, 전단속도등을 다양하게 변화시키면서 plate-plate 레오미터로 시간에 따른 전단응력의 변화 를 조사하는 rheo-kinetic 연구를 수행하였다. 아울러 실험 중에 액체 질소로 급냉하여 얻은 시료를 대상으로 등온 및 비등온의 열분석 실험을 수행하고 JMA식과 Hoffman-Lauritzentlr 을 사용하여 분석한 다음, 그 결과를 rheo-kinetic 해석결과와 비교함으로써 결정화 거동에 미치는 전단응력의 영향을 규명하였다. 일정전단속동하에서 수행한 rheo-kinetic 실험결과, 시간에 따른 저난응력의 증가와 용융열이 증가하는 경향이 매우 유사한 거동을 보이므로 전 단응력의 증가는 결정화가 일어남에 기인한 결과임을 확인할수 있었으며 고분자수지가 전단 이력을 받게 되면 분자배향의 결과로 결정화 유도시간이 짧아지고 결정화속도가 증가할 뿐 만 아니라 보다 더 높은 온도에서 결정화가 일어나게 됨을 알수 있었다. 또 결정화 반가기 시간과 Hoffman-Lauritzen 식의 매개변수들이 전단속도, 전단부가시간, 결정화 온도 등의 이력에 무관하게 전단응력에 따라 선형적으로 변하고 있으므로 전단유도 결정화거동은 수지 에 부가되는 전단응력에 직접적인 영향을 받음을 알수 있었다. 이상과같은 전단유도 결정화 거동에 관한 결과를 가공공정상의 열전달 현상과 결합하여 해서하면 성형품 내부의모폴로지 의 예측이 가능하므로 성형품 물성의 극대화 방안의 수립에 이용될수 있을것으로 사료된다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.177-177
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1993
뇌모세혈관내피세포로 구성된 혈액-뇌관문(BBB)은 tight junction으로 구성되어 있을뿐만 아니라 fenestra가 없는 등 BBB가 가진 특성으로 인해 물질 수송에 장벽역할을 하기 때문에 주로 중추신경계 질환시의 약물요법에 많은 제한이 따른다. 따라서 뇌로의 효율적인 약물 송달방법에 대해 많은 연구가 진행중에 있는데 본 연구에서는 BBB의 hyperosmotic opening법을 이용하여 뇌로 잘 수송되지 않는 약물의 뇌송달 방법에 대해 연구하고자 하였다. 먼저 수용성으로 인해 BBB 에 잘 통과하지 않는 물질로 신장 및 뇌영상 촬영시 사용되는 방사성 의약품이 Tc-DTPA를 이용하여, hyperosmotic opening법에 의한 뇌투과 증가정도를 검토하였으며, 실험방법이 확립됨에 따라 뇌암의 항암요법을 위해 뇌로의 투과가 적은 항암제(5-Fluorouracil, 5-FU)의 뇌송달에 대해 본 방법을 적용하여 검토하였다. 실험동물로는 S.D.계 웅성 랫트를 사용하였으며, 실험방법은 다음과 같이 하였다. 랫트의 좌측 외경동맥(left external carotid artery)에 혈류의 역방향으로 혈관 분지점에서 1-2mm 전까지 PE-50 catheter를 삽입하고, 1.6 molal L-(+)- arabinose 고장액(1580mOsm)을 0.12ml/sec의 일정한 속도로 30초간 infusion함으로 BBB를 opening 한 다음, 5분 후에 Tc-DTPA를 대퇴 정맥으로 주사하여 0, 10, 30초, 1, 1.5, 2, 3, 4, 5, 7 및 10분 간격으로 대퇴동맥에 설치한 카테타로부터 혈액을 채취하고 마지막 혈액을 취한 후 즉시 단두하여 뇌를 적출하였다. 채취한 뇌를 액체질소에 담근 후 tissue Tek으로 고정하고 autoradiography를 하기 위한 slice와 농도측정을 위해 필요한 부위를 취한 후 감마카운터로 Tc-DTPA의 brain각 부위별 및 혈장농도를 측정하였다. 뇌조직중 혈액부피의 측정은 Tc-albumin를 이용하여 구하였다. 같은 방법으로 5-FU에 대한 실험도 행하였고, 이때 각 혈장 및 조직중의 5-FU함량은 HPLC로 하였다.
Vibrio, Photobacterium, Alteromonas and Xenorhabdus species are capable of emitting light, called bioluminescence. They exist in marine, freshwater and terrestrial environments. Bacterial bioluminescent reaction is that reduced riboflavin phosphates and a long-chain aldehyde are oxidized in the presence of molecular oxygen and enzyme luciferase. This experiment aims to develop the proper culture media and to optimize the storage condition for the recovery of bioluminescent activity in Photobacterium phosphoreum. The Luria broth (LB) medium was modified for cultivation of Photobacterium phophoreum, called as modified LB(mLB) medium. The mLB medium is LB fortified with 3% glycerol and 1.5% NaCl. In mLB medium. bacterial growth and bioluminescent activity are 25% higher than those in a Nutrient broth medium. When the cell stocks were stored at $-20^{\circ}C$, $-70^{\circ}C$ and LN2 for 3 months, cell growth and bioluminescent activity of culture after stored at $-20^{\circ}C$ were better than those of other treatments. The highest bioluminescent activity obtained at the late exponential phase in all treatments. When the cell stock was freeze-dried with 5% adonitol as a cryoprotectant, the recovery of cell was better than those of control and freeze-dried cell stock without addition of cryoprotectant.
The optimum temperature and pH for mycelial growth of B. bassiana DGUM 34001 were $24^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. Among the complex media used, mushroom complex medium (MCM) was the most favorable for mycelial growth. When Czapek-Dox medium was used as a minimal medium, glucose was an excellent source for carbon and energy. Soytone and sodium phosphate were favorable constituent for culture medium as a source of organic nitrogen and phosphorus, respectively. When the fungus was grown in MCM broth, the specific activity of extracellular enzyme of ${\alpha}$-amylase, lipase, chitinase, CMCase and pretease were 297.0, 0.058, 0.33, 0.21 and 22.8 units/mg protein, respectively. When various sources of organic nitrogen and chitin were supplemented to determine the production of enzymes, casein and soluble chitosan enhanced the production of extracellular protease and chitinase.
Several isolates producing the red-pigment were isolated from the Korean and Brazilian soils. The pigment producton by the molds belongs to a genus Monascus was investigated under the submerged culture. Mutagenesis of Monascus sp. KS 2 as the highest pigment production by NTG was made to increase pigment production. This mutant was examined to produce red and yellow pigment with 2.4 and 1.6 times higher than the parental isolates, respectively. The optimal cultural conditions for the pigment production by this mutant were: pH 6.0 , temperature $30^{\circ}C$, rice powder 5%, and monosodium glutamate 0.15%.
Son J.M.;Kim Y.S.;Shin Y.J.;Lim Y.H.;Yoon K.Y.;Lee D.S.;Shin S.T.;Cho J.K.
Journal of Embryo Transfer
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v.21
no.1
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pp.77-83
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2006
본 연구는 개 동결 정액 융해 시 straw 크기 및 융해 속도가 융해 정자의 질(quality)에 미치는 영향을 조사하고 최적의 융해 조건을 조사하는데 그 목적이 있다. 정상적인 번식능을 가진 비글 수컷 5마리에서 정액을 채취하여 원심 분리하여 정장을 버리고 남은 정자에 동결보호제인 glycerol이 첨가된 tris-glucose-egg yolk extender를 첨가하여 동결하고 액체질소에 보관한 후 융해하였다. 동결 융해 조건에 따른 효과를 알아보기 위해 straw는 0.25 ml과 0.5 ml크기를 사용하였고 융해 조건은 $75^{\circ}C$에 10초, $55^{\circ}C$에 12초 및 $37^{\circ}C$에서 120초로 하여 융해 후 정자의 활력도(vigor), 운동성(motility), Hypo-osmotic test(HOS test)를 이용한 생존성(viability) 및 $SperMac^{\circledR}$ 염색을 하여 정자의 membrane integrity를 비교 조사하였다. 조사 결과 0.5 ml 크기의 straw를 사용한 경우 $37^{\circ}C$ 융해가 $55^{\circ}C,\;75^{\circ}C$ 융해보다, 0.25 ml 크기의 straw를 사용한 경우에는 $37^{\circ}C,\;55^{\circ}C$ 융해가 $75^{\circ}C$ 융해보다 유의적으로 높은 활력 지수 및 생존성을 보였다(P<0.05). Straw크기에 따라 비교하였을 경우 0.5 ml 군에서 유의적으로 높은 활력도, 생존성 및 membrane integrity를 보였다(P<0.05). 결론적으로 개 정액이 동결 및 융해 시 0.5ml straw를 이용하여 동결한 후 $37^{\circ}C$에서 120초 동안 융해하는 것이 최적의 조건임이 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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