Proceedings of the Korean Society of Veterinary Pathology Conference
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2002.11a
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pp.140-140
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2002
돼지 설사유발 칼리시 바이러스 (Porcine enteric calicivirus: PECV)는 자돈에서 설사를 일으키지만, 사람에서도 위장염을 일으키는 원인체인 Sapporo-like calicivirus와 형태학적으로나 유전학적으로 유사하다고 이미 알려졌다. 본 연구는 국내에서 발생하고 있는 PECV의 RNA dependent RNA polymerase (RDRP) 부위와 capsid 부위 염기서열과 아미노산 서열을 기존에 보고되었던 것과 비교하여 분류하였다. 연구 결과 국내 분리주는 기존의 PECV RDRP 부위 (염기서열: 90%, 아미노산: 97%) 와 유사성이 아주 높았으며 capsid 부위(염기서열: 83%, 아미노산: 81%)는 다소 낮았다. 또한 이 바이러스는 모든 칼리시 바이러스의 RDRP 부위에 특이적으로 존재하는 GLPSG와 YGDD 아미노산 배열이 존재하였으며 capsid 부위에서는 국내에서 발생한 PECV 에서만 "TAA" 염기서열이 삽입되어 있었다. 본 연구를 통하여 국내에서 발생한 PECV는 porcine sapporo-like calicivirus와 유사하며 그 외 caliciviridae과인 Norwalk-like virus, Vesivirus, Lagovirus와는 상이하다는 것이 규명되었다.
Since protein subcellular location and biological function are highly correlated, the prediction of protein subcellular localization can provide information about the function of a protein. In order to enhance the prediction performance, external information other than amino acids sequence information is actively exploited in many researches. This paper compares the prediction capabilities resided in amino acid sequence similarity, protein profile, gene ontology, motif, and textual information. In the experiments using PLOC dataset which has proteins less than 80% sequence similarity, sequence similarity information and gene ontology are effective information, achieving a classification accuracy of 94.8%. In the experiments using BaCelLo IDS dataset with low sequence similarity less than 30%, using gene ontology gives the best prediction accuracies, 93.2% for animals and 86.6% for fungi.
The amino acid composition of a protein provides basic information for solving many problems in bioinformatics. We propose a new method that uses biologically relevant similarity between amino acids to determine the amino acid composition, where the BOLOSUM matrix is exploited to define a similarity measure between amino acids. Futhermore, to extract more information from a protein sequence than conventional methods for determining amino acid composition, we exploit the concepts of spectral analysis of signals such as radar and speech signals-the concepts of time-dependent analysis, time resolution, and frequency resolution. The proposed method was applied to predict subcellular localization of proteins, and showed significantly improved performance over previous methods for amino acid composition estimation.
A cDNA (SeMIPS) encoding myo-inositol 1-phosphate synthase has been isolated from developing sesame (Sesamum indicum L. cv. Dan-Baek) seeds and its structure and function analyzed. The SeMIPS protein was highly homologous with those from plant species (88-94%), while a much lower degree of sequence homology (60%) was found with that of human. The functional domains commonly found in MIPS protein were identified and their amino acid residues were compared with each other. Northern blot indicated that the expression of the SeMIPS gene might be organ-specifically regulated. A complementation assay based on a yeast mutant system confirmed that the SeMIPS gene encodes a myo-inositol 1-phosphate synthase (MIPS) of sesame by showing functional expression of the SeMIPS cDNA in the yeast mutants containing the disrupted INO1 gene.
Nucleotide sequences of nodD and nodA from Bradyrhizobium sp. SNUOOI were determined. The open reading frame (ORF) of nodD was 942 bp in length and encoded 314 amino acids. while ORF of nodA, sequence of which is the first one among legume symbionts Bradyrhizobium, was 630 bp and encoded 210 amino acids. The nucleotide sequence of nodD showed 99.4% homology with nodDI of B. japonicum USDAllO. while that of nodA showed 81.5% with B. sp. (Parasponial. At the 5' of nodYAB operon and nodD, consensus nod box sequences composed of 9 bp unit repeated four times and two times respectively were found. Also an A.T-rich sequence was found at 5' of nodD.
A kernel in support vector machines can be described as a similarity measure between data, and this measure is used to find an optimal hyperplane that classifies patterns. It is therefore important to effectively incorporate the characteristics of data into the similarity measure. To find an optimal similarity between amino acid sequences, we propose a real exponent exponential form of the two metrices, which are derived from the evolutionary relationships of amino acids and the hydrophobicity of amino acids. We prove that the proposed metric satisfies the conditions to be a metric, and we find a relation between the proposed metric and the metrics in the string kernels which are widely used for the processing of amino acid sequences and DNA sequences. In the prediction experiments on the cleavage site of the signal peptide, the optimal metric can be found in the proposed metrics.
A gene coding for a novel putative $\sigma$ factor of RNA polymerase has been identified from Streptomyces coelicolor A3(2) using Escherichia coli rpoS gene fragment as a probe. The 486 bp rpoS gene fragment was amplified from E. coli genomic DNA by PCR with two synthetic oligonucleotides, the sequences of which were deduced from the amino acid sequences in the regions 2.3 and 4.2 conserved among various bacterial factors. When E. coli genomic DNA fragments were hybridized with cloned rpoS probe, only one band corresponding to rpoS gene (3.2 kb PvuII fragment or 2.3 kb KpnI fragment) was detected. In S. coelicolor, however, two bands were detected both in PvuII digested DNA and SalI digested DNA. 3.5 kb PvuII fragment which binds the rpoS gene probe was cloned (pMS1) from the sublibrary, and the nucleotide sequences of 1.0 kb BamH'/HincII subclone (pBH2) was partially determined. The nucleotide sequences revealed extensive similarity to other $\sigma$ factor genes of S. coelicolor (hrdA, hrdB, hrdC, hrdD), S. aureofaciens (hrdA, hrdB, hrdC, hrdD), Synechococcus species, Pseudomonas aeruginosa, Stigmatella aurantiaca, and Anabaena species. The nucleotide sequences in regions 1.2 and 4 were compared with the corresponding regions of 5 known ${\sigma}$ factor genes of S. coelicolor by multiple alignment. It turned out that the cloned gene is most closely related to hrdA showing 88% amino acid similarity in region 1.2 and 75% in region 4.
A bacterial strain JE-ll found to produce active extracellular phospholipase D (PLD) was selected from the soil isolates. It was identified as Streptomyces somaliensis on the basis of 16S rDNA sequence analysis, morphological and physiological characteristics. The gene (sspld) encoding S. somaliensis PLD was isolated and characterized. The open reading frame was suggested to encode 538 amino acids with a signal peptide of 33 amino acids. The deduced amino acid sequence of the sspld shared a sequence similarity of 70-88% with PLDs of other Streptomyces sp. so far reported. The PLD converted phosphatidylcholine to phosphatidylglycerol or phosphatidylserine with the yield of 96 to 99% (㏖/㏖), but did not act on inositol or ethanolamine as a transphosphatidylation donor.
본 연구자들은 근원세포를 면역시켜 얻은 hybidoma들을 검색하여. 계배 근원세포의 분화와 관련된 단백질을 인지하여 분화를 억제하는 대과가 있는 monoclonal antibody 3H35를 선별하여 그 항원을 확인한 바 있다(Kim et af.. (1992), Korean J. Zool 35 29-36) 본 연구에서는 λZAP에 cloning된 chicken muscle CDNA library들을 lacZ fusion protein으로 발현시켜 항체 3H35로 검색하여 그 유전자를 찾아내었다. 선별한 CDNA clone 중 C59의 삽입 절편은 1.6 kb이었고, 발현시킨 facE fusion protein 은 60 kDa로, f-galactosidase에 대한 항체에 반응하며 3H35와도 반응함을 immunoaffinitv adsorbant와 immunoblot으로 확인하였다 Clone C59의 삽입 절편의 염기서열을 분석한 결과, 실제 유전자는 1.6 kb 이상이며, 알려진 어느 다른 유전자와도 관련이 없는 새로운 근특이 유전자로 판단되었다. 아미노산으로 전환시켰을 때 31개의 특이한 서열이 7차례 반복된 부분이 나타났으며 이 서열의 23개가 일정하게 보존되어있고 나머지 서열의 아미노산의 polarity도 매우 유사하게 효존되어있다. 이들의 보존성이 극히 높은 것으로 보아 독특한 기능을 수행하는 domain으로 추정된다.
Indolicidin (ID) is a 13-residue Trp-rich antimicrobial peptide (AMP) isolated from bovine neutrophils. In addition to having a high antimicrobial potency, it is also toxic to mammalian cells. To develop novel ID-derived AMPs with shorter lengths and enhanced prokaryotic selectivities (meaning potent antimicrobial activity against bacterial cells without toxicity against mammalian cells) over the parental ID, several ID analogs were designed and synthesized. Finally, 10-residue ID analogs (SI, SI-PA, SI-WF and SI-WL) with much higher prokaryotic selectivity than the parental ID were developed. Our results suggest that the hydrophobic and aromatic amino acids at the central position of the analog SI with the highest prokaryotic selectivity are important for potent antimicrobial activity, but two Pro residues do not affect antimicrobial activity. The order of prokaryotic selectivity for ID and its designed analogs was SI > SI-PA > SI-WF > SI-WL > ID > SI-WA. Taken together, our designed short ID analogs could be developed as therapeutic agents for treating bacterial infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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