본 연구는 $^{13}C$추적자를 사용하여 신구저수지 내 식물플랑크톤에 의한 1차 생산속도를 계산하고, $^{13}C$-GC/MS 기법을 사용하여 광합성을 통해 새롭게 만들어진 지방산의 생성속도를 분석하였다. 유광층 내의 SPM중 POM이 차지하는 비율은 약 76%였으며, 엽록소$-{\alpha}$의 평균 농도는 약 $89{\mu}g\;L^{-1}$이었다. 유광층 단위면적당 엽록소$-{\alpha}$ 총량, 1차 생산력, 엽록소$-{\alpha}$에 의한 탄소 고정 능력은 각각 112mg Chl-${\alpha}m^{-2}$, 3.53g C $m^{-2}\;d^{-1}$, 32mg C mg Chl-${\alpha}^{-1}\;d^{-1}$이었다. 수층 내 입자성유기물의 지방산 조성과 식물플랑크톤 광합성에 의해 새롭게 만들어진 입자성유기물의 지방산 조성이 거의 비슷한 것으로 미루어 보아, 본 연구기간 동안 수층의 입자성유기물은 대부분 식물플랑크톤에 의해 유래된 것으로 판단되었다. 또한 광합성을 통해 만들어진 유기물은 세포외배출 등의 과정을 통해 용존유기물 pool로 이동된 후 박테리아에게까지 빠르게 전달됨으로써, 박테리아에 의한 유기물 소비가 활발하게 일어나고 있는 것으로 판단된다.
Purpose: The purpose of this study was to evaluate cervical lymph node metastasis of oral squamous cell carcinoma patients by MRI film and neural network system. Materials and Methods: The oral squamous cell carcinoma patients(21 patients. 59 lymph nodes) who have visited SNU hospital and been taken by MRI. were included in this study. Neck dissection operations were done and all of the cervical lymph nodes were confirmed with biopsy. In MR images. each lymph node were evaluated by using 6 MR imaging criteria(size. roundness. heterogeneity. rim enhancement. central necrosis, grouping) respectively. Positive predictive value. negative predictive value. and accuracy of each MR imaging criteria were calculated. At neural network system. the layers of neural network system consisted of 10 input layer units. 10 hidden layer units and 1 output layer unit. 6 MR imaging criteria previously described and 4 MR imaging criteria (site I-node level II and submandibular area. site II-other node level. shape I-oval. shape II-bean) were included for input layer units. The training files were made of 39 lymph nodes(24 metastatic lymph nodes. 10 non-metastatic lymph nodes) and the testing files were made of other 20 lymph nodes(10 metastatic lymph nodes. 10 non-metastatic lymph nodes). The neural network system was trained with training files and the output level (metastatic index) of testing files were acquired. Diagnosis was decided according to 4 different standard metastatic index-68. 78. 88. 98 respectively and positive predictive values. negative predictive values and accuracy of each standard metastatic index were calculated. Results: In the diagnosis of using single MR imaging criteria. the rim enhancement criteria had highest positive predictive value (0.95) and the size criteria had highest negative predictive value (0.77). In the diagnosis of using single MR imaging criteria. the highest accurate criteria was heterogeneity (accuracy: 0.81) and the lowest one was central necrosis (accuracy: 0.59). In the diagnosis of using neural network systems. the highest accurate standard metastatic index was 78. and that time. the accuracy was 0.90. Neural network system was more accurate than any other single MR imaging criteria in evaluating cervical lymph node metastasis. Conclusion: Neural network system has been shown to be more useful than any other single MR imaging criteria. In future. Neural network system will be powerful aiding tool in evaluating cervical node metastasis.
To elucidate the neuroprotective effect of Yeoldahanso-tang(YHT) on nerve cells damaged by hypoxia, the cytotoxic effects of exposure to hypoxia were determined by XTT(SODIUM3,3'-{I-[(PHENYLAMINO) CARBONYL]-3,4-TETRAZOLIUM}- BIS (4-METHOXY-6-NITRO) BENZENE SULFONIC ACID HYDRATE), NR(Neutral red), MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) and SRB(Sulforhodamin B) asssay. The activity of catalase and SOD(Superoxide dismutase) was measured by spectrophometry, and $TNF-{\alpha}$(Tumor cell necrosis $fector-{\alpha}$) and PKC(Protein kinase C) activity was measured after exposure to hypoxia and treatment of YHTWE. Also the neuroprotective effect of YHTWE was researched for the elucidatioion of neuroprotective mechanism. The results were as follows; 1. Hypoxia decreased cell viability measured by XTT, NR assay when cultured cerebral neurons were exposed to 95% N2/5% CO2 for $2{\sim}26$ minutes in these cultures and YHTWE inhibited the decrease of cell viability. 2. H2O2 treatment decreased cell viability measured by MTT, and SRB assay when cultured cerebral neurons were exposed to 1-80 ${\mu}M$ for 6 hours, but YHTWE inhibited the decrease of cell viability. 3. Hypoxia decreased catalase and SOD activity, and also $TNF-{\alpha}$ and PKC activity in these cultured cerebral neurons, but YHTWE inhibited the decrease of the catalase and SOD activity in these cultures. 4. Hypoxia triggered the apoptosis via caspase activation and internucleosomal DNA fragmentation. Also hypoxia stimulate the release of cytochrome c forom mitochondria. YHTWE inhibited the apoptosis via caspase activation induced by hypoxia. From these results, it can be suggested that brain ischemia model induced hypoxia showed neurotoxicity on cultured mouse cerebral neurons, and the YHTWE has the neuroprotective effect in blocking the neurotoxicity induced by hypoxia in cultured mouse cerebral neurons.
Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is a disease model of multiple sclerosis (MS) that is characterized by remittance and relapse of the disease and autoimmune and demyelinating lesions in the central nervous system (CNS). Autoimmune inflammation is maintained by secretion of a large number of protein. Previous studies have suggested that transcripts encoding osteopontin (OPN) are frequently detected in the mRNA population of MS plaques. To elucidate the functional role of OPN in initiation and development of EAE, we examined the expression and localization of OPN in the spinal cord during acute EAE. We demonstrated that OPN significantly increased at the early stage of EAE and slightly declined thereafter by western blot analysis. An immunohistochemical study revealed that OPN was constitutively expressed in some glial cells (microglia, astrocytes) of white matter and neurons in the CNS of control rats. OPN expression was shown to be increased in the same cells at the early and peak stage of EAE. To identity cells expressing OPN by double-immunofluorescence labeling, we labeled rat spinal cord sections for OPN with a monoclonal OPN antibody and with mAbs for astrocyte (GFAP), microglia/macrophage (OX42)-specific markers. The major cell types of OPN-expressing cells were activated astrocytes and microglia in the adjacent inflammatory lesions. Interestingly, OPN was mainly expressed in the end feet of astrocytes around vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) expressing endothelial cells of CNS blood vessel. These findings suggest that increased levels of OPN in activated glial cell may play an important role in the recruitment of inflammatory cells into the CNS parenchyma during EAE.
이중탈인산화효소(DUSP)는 성장인자활성 단백질키나제(MAPK)를 조절해서 세포성장과 분화에 관여하며 암, 당뇨병, 면역질환, 신경질환의 신약개발표적이다. DUSP 단백질군에 속하는 DUSP19는c-Jun N-말단 키나제(JNK)를 조절하며 골관절염의 질환화과정에 관여한다. 우리는 야생형 DUSP19 에 비하여 상당히 활성이 증가된 cavity 형성 돌연변이인 DUSP19-L75A의 결정구조를 규명하였다. 결정구조는 Leu75의 곁가지가 없어진 결과로 cavity가 잘 형성되어 있는 것을 보여주며, 활성부위에 결합한 황이온이 회전된 형태로 존재하는 것을 보여준다. Cavity 형성에도 불구하고 cavity를 둘러싸고 있는 잔기들은 그다지 재조정되지 않은 것으로 나타나며 그 대신에 멀리 떨어진 트립토판 잔기가 소수성결합을 강화하고 있는 것으로 나타나서 L75A 돌연변이의 접힘은 cavity 부위의 재조정이 아니라 글로벌 접힘 에너지 최소화 기작에 의해 안정화 되었음을 발견할 수 있었다. 회전된 활성화부위 황이온의 구조는 인산화티로신 잔기와 유사함이 발견되어 L75A 돌연변이가 최적의 활성화형태를 유도했다는 것을 알 수 있었다. 내부 cavity에 의한 활성증가현상과 이에 대한 구조적 정보는 DUSP19의 알로스테릭 조절과 치료제 개발에 정보를 제공한다.
Objectives : The purpose of this investigation was to evaluate the effect of Goomicheongsim-won Extracts on E20 corticells and P7 cerebellar cells exposed to hypoxia, and the effect on neuronal protection by elimination of Rhinoceros unicornis L. and/or Orpiment $As_2S_3$. Methods : P7 cerebellar cells were grown in various concentrations of KM-A, KM-B, KM- C and KM-D. On 7 DIV (day in vitro), cells were exposed to hypoxia (98% $N_2/5%{;}CO_2,{\;}3{\;}hr,{\;}37^{\circ}C$) and normoxia, and then further incubated for 3 days. Neuronal viabilities were expressed as percentages of control. E20 cortical cells were grown in various concentrations of KM-A, KM-B, KM-C, and KM-D. On 7 DIV, cells were exposed to hypoxia and normoxia, and then further incubated for 3 and 7 days. Results : I. The effect of KM-A on neuronal protection was significantly increased P7 cerebellar granule cells and E20 cortical cells on normoxia and hypoxia. 2. The effect of KM-B on neuronal protection was increased P7 cerebellar granule cells on normoxia, but was significantly decreased P7 cerebellar granule cells on hypoxia. The effect of KM-B on neuronal protection was non-significantly increased E20 cortical cells on normoxia and hypoxia. 3. The effect of KM-C on neuronal protection was non-significantly increased P7 cerebellar granule cells on normoxia and hypoxia and was decreased (p=0.058) on hyperconcentration of the extracts in normoxia. The effect of KM-C on neuronal protection was significantly increased P7 cerebellar granule cells and E20 cortical cells on normoxia and hypoxia (10 DIV), and the effect was E20 cortical cells on normoxia (14 DIV), non-significantly increased E20 cortical cells on hypoxia (14DIV). 4. The effect of KM-D on neuronal protection was increased P7 cerebellar granule cells on normoxia but was not on hyperconcentration of the extracts, was significantly decreased on hyperconcentration of the extracts in hypoxia. The effect of KM-D on neuronal protection was significantly increased E20 cortical cells on normoxia and was significantly increased E20 cortical cells increased on hypoxia (10 DIV). Conclusions : Goomicheongsim-won extracts had applicable effect on E20 corticells and P7 cerebellar cells exposed to hypoxia. The effect on neuronal protection by elimination of Rhinoceros unicornis L. and/or Orpiment $As_2S_3$ was changed.
혈전저혈소판혈증자색반병은 혈관 내피 세포 손상에 의한 혈전미세혈관병증으로 미세혈관병용혈빈혈, 혈소판감소증과 미세혈관 혈전에 의한 다양한 정도의 신경 및 신장 침범을 보인다. 이는 소아에서는 드물게 발생하며 종종 치명적인 경과를 보일 수 있다. 혈전저혈소판혈증자색반병은 ADAMTS-13 유전자 변이에 의한 결핍을 보인 선천성 그리고 ADAMTS-13 항체들에 의해 발생하는 후천성인 경우로 분류할 수 있다. ADAMTS-13 활성도 및 순환 항체검사, 그리고 항 ADAMTS-13 IgG와 ADAMTS-13 염기서열분석은 이 질환의 진단에 중요하다. 후천성 환자에게는 혈장교환술이 주된 치료이며, 스테로이드제나 면역억제제도 사용된다. 저자들은 청소년기에 발생한 ADAMTS-13 활성도 저하와 항체 양성을 보인 후천성 혈전저혈소판혈증자색반병을 진단 후 혈장교환술로 효과적으로 치료하였던 1례를 보고하는 바이다.
허혈성 뇌손상시 칼슘길항제, 항산화제와 산소라디칼 제거제 그리고 흥분성 아미노산 수용체 길항제의 보호효과를 검토하기 위해 본 연구에서는 랫트 뇌 해마조직 절편을 산소와 포도당을 제거한 반응액에 노출시켜 실험적 허혈상태를 유도하였다. 그리고 여러 약물을 처리한 상태에서 허혈시의 뇌세포 손상정도를 생화학적 지표들(절편내 ATP와 반응액내 lactate 및 malondialdehyde (MDA)유리량)을 측정하여 검토하였다. 60분까지 허혈상태를 유발시킨 경우 시간에 따라 절편내 ATP 함량이 감소하였고 lactate 유리량이 증가하였다. 그 후 산소와 포도당이 든 반응액으로 바꿔주니 이들 생화학적 변화들이 회복되는 양상을 보였다. 그러나 본 실험조건에서 허혈상태로부터 완전히 회복되지는 않았다. 동일한 허혈조건에서 verapamil과 비타민 E는 ATP 함량 감소와 절편으로부터의 lactate 유리량의 증가에 대해 보고효과를 보였다. 그리고 verapamil과 diltiazem은 반응액내로의 MDA유리를 감소시켰다. Superoxide dismutase (SOD), glutathione과 MK-801 (NMDA 수용체 길항제)은 20분 허혈조건에서 ATP 함량을 증가시켰으나 그외 다른 조건에서 보호효과를 보이지 않았다. 허혈 후 20분간 산소와 포도당을 재공급한 경우 verapamil은 ATP 함량과 lactate 유리에 보호효과를 보였다. 한편 비타민 E는 20분 허혈 조건에서의 lactate 유리와 60분 허혈시의 MDA 유리 증가에 대해 감소효과를 보였다. 이상의 결과는 칼슘길항제와 비타민 E가 랫트 뇌절편에서의 허혈성 생화학적 손상을 방지함으로 나타난 결과로 해석되며, 칼슘갈항제의 효과가 비타민 E보다 우수함으로 미루어 칼슘길항제는 허혈성 뇌손상에 예방 및 보고효과를 보일 것으로 믿어졌다.
Objectives : The purpose of this study is to assess the effect of Daekumeumja herb-acupuncture on neural cell proliferation and nitric oxide synthase(NOS) expression in hippocampus of ethanol-intoxicated Sprague-Dawley(SD) rats. Methods : SD rats were randomly assigned into 5 groups ; the normal group, the alcohol-treated(control) group, the alcohol- and 1 mg/kg Daekumeumja- treated(sample A) group, the alcohol- and 5mg/kg Daekumeumja-treated (sample B) group, the alcohol- and 10 mg/kg Daekumeumja-treated (sample C) group(n = 6 in each group). Normal group were received with Saline, while control group were injected intraperitoneally with alcohol(2 g/kg) once per day for 5 days. Sample groups were treated Daekumeumja herb-acupuncture on Chungwan(CV12) for 5 consecutive days. Bromo-deoxyuridine(BrdU) was injected into all animals once per day for 5 days. For the detection of BrdU-positive cells and NADPH-d- positive cells in hippocampus, immunohistochemistry was performed. Results : 1. In the dentate gyrus area, the number of BrdU-positive cells in the sample $B(278.08{\pm}6.46)$, $C(331.33{\pm}16.68)$ groups was significantly(p<0.05) increased compared with the control group. 2. In the dentate gyrus area, the number of NADPH-d-positive cells in the sample $C(86.50{\pm}10.02)$ groups was significantly(p<0.05) increased compared with the control group. 3. In the CAI area, the number of NADPH-d-positive cells in the sample $A(63.90{\pm}2.69)$, $B(75.70{\pm}3.01)$, $C(97.70{\pm}4.06)$ groups was significantly(p<0.05) increased compared with the control group. 4. In the CA 2-3 area, the number of NADPH-d-positive cells in the sample $B(30.20{\pm}1.89)$, $C(62.70{\pm}2.08)$ groups was significantly(p<0.05) increased compared with the control group. Conclusion : These results indicate that, neural cell proliferation and NOS expression in hippocampus was reduced in ethanol-intoxicated group. Treatment of Daekumeumja herb-acupuncture increased this diminution. Daekumeumja could be able to effect on the prevention of the amnesia and learning disability in alcoholism.
Objectives : This Study was performed to evaluate the effects of Scutellariae Radix(SR) water-extract on the tissue and neuronal apoptosis of the spinal cord injury(SCI). Methods: SCI was induced by mechanical contusion following laminectomy of 10th thoracic vertebra in Sprague-Dawley rats. SR was orally given once a day for 7 days after SCI. Neuronal apoptosis was examined with terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTPnick-end labeling(TUNEL) assay. Bax (Bcl-2-asociated X protein), Bcl-2(B-cell blastoma 2), c-Fos(FBJ osteosarcoma oncogene) expressions were examined using immuno-histochemistry. Individual TUNEL and immuno-labeled cells expressing Bax, Bcl-2 and c-Fos were counted on the same level in peri-damaged region and in ventral horn. Results: 1. SR significantly reduced number of TUNEL labeled apoptotic cells induced by the spinal cord contusion injury. 2. SR significantly reduced Bax positive cells expression on the motor neuron in the ventral horn induced by the spinal cord contusion injury. 3. SR strengthened Bcl-2 expression on the motor neuron in the ventral horn induced by the spinal cord contusion injury. 4. SR reduced c-Fos expression on the motor neuron in the ventral horn induced by the spinal cord contusion injury. Conclusions : These results suggest that SR plays an inhibitory role against neuronal apoptosis and has significant effects for locomotor disfunction induced by SCI.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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