파골세포에 의한 골흡수는 1) 혈관을 통한 파골세포 전구세포의 골표면 이동 및 2) 골표면에서 파골세포 전구세포로부터 파골세포 분화 두 단계를 거쳐 일어난다. Stromal cell derived factor $(SDF)-1{\alpha}$ 는 파골세포 전구세포의 화학주성인자이며 matrix metalloproteinase (MMP)-9는 파골세포 전구세포의 이동에 관여하는 단백 분해효소이다. 파골세포 전구세포의 골표면 이동에 있어서 LPS의 역할을 규명하기 위하여 E. coli 및 Actinobacillus actinomycetecomitans LPS의 1) 파골세포 전구세포 유도능, 2) LPS에 의한 파골세포 전구세포의 이동에 있어서 MMP 및 $SDF-1{\alpha}$ 의 관련성을 평가하였다. LPS에 의한 차골세포 전구세포의 RAW 세포의 이동은 matrigel 또는 type I collagen을 도포한 transwell을 이용하여 평가하였으며 MMP-9 및 $SDF-1{\alpha}$ 의 발현은 RT=PCR 또는 ELISA로 평가하였다. 각 세균의 LPS는 matrigel 또는 type I collagen을 통한 파골세포 전구세포의 이동을 증가시켰다. MMP 억제제는 각 세균의 LPS에 의한 파골세포 전구세포의 이동을 억제하였다. LPS는 파골세포 전구세포의 MMP-9의 발현을 증가시켰다. 각 세균의 LPS는 마우스 두개골에서 분리한 조골세포의 $SDF-1{\alpha}$ 의 발현을 증가시켰다. $SDF-1{\alpha}$ 을 함유한 LPS 처리 조골세포 배양상층액은 파골세포 전구세포의 이동을 증가시켰으며 anti $SDF-1{\alpha}$ Ab는 LPS처리 세포 배양상층액에 의한 파골세포 전구세포의 이동을 억제하였다. 이들 결과는 LPS가 파골세포 전구세포에서는 MMP-9을 조골세포에서는 $SDF-1{\alpha}$ 의 발현을 증가시켜 파골세포 전구세포의 이동을 촉진 시킬 수 있음을 시사한다.
목적 : 본 연구에서는 알코올 독성에 대하여 흰쥐의 치상회에서 새로운 신경세포의 생성 및 nitric oxide synthase (NOS) 발현에 인삼이 미치는 영향을 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) 면역 조직 화학법 및 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) 조직화학법을 통해서 관찰하고자 한다. 방법 : 실험동물을 정상군, 인삼처치군, 알코올처치군 및 알코올-인삼 처치군으로 분류하여 각각의 실험군에 3일간 BrdU (50mg/kg)를 복강주사하였다. 인삼처치군은 30mg/kg 용량의 인삼 전탕액을 중완혈에 약침주사하였고, 알코올 처치군은 2 g/kg 용량의 알코올을 투여하였으며. 알코올-인삼 처치군은 2 g/kg 용량의 알코올 및 30mg/kg 용량의 인삼 전탕액을 투여한 후 각각의 BrdU 양성 세포수와 NADPH-d 양성세포수를 관찰하였다. 결과 : 알코올 투여군은 BrdU 양성세포 및 NADPH-d 양성세포 발현이 감소하였으나, 인삼 및 알코올 인삼처치군에서는 알코올 투여군에 비해서 모두 증가하였다. 결론 : 인삼은 알코올에 의해서 유발된 새로운 신경세포 생성의 감소에 대하여 보호효과가 있으며, 알코올에 의해서 부가적으로 영향 받는 산화질소는 세포생성 조절에 중요한 역할을 하는 것으로 사려된다.
Exogenous glutamine synthetase (GS) was used efficiently as a selectable marker to identify successful transfectants for the production of erythropoietin (EPO) in Chines hamster ovary (CHO-K1) cells in the absence of glutamine. Inclusion of methionine sulphoximine (MSX), an inhibitor of glutamine synthetase, enabled further selection of clones with relatively high levels of transfected glutamine synthetase and EPO genes which were coupled together. In this study, a new cell line was established by using GS system and enhancement of EPO production by zinc ion was evaluated using the transfected CHO-K1 cell line under normal condition. It was found that EPO production from CHO-K1 cells was enhanced 40% when the optimal amount of zinc ion was added.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.127-127
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2003
Haptophyta(이하 하프토조로 표기)는 그 일부종이 toxin을 가지며, 더욱이 이들 종들이 원인 생물로 발생하는 bloom으로 인한 경제적 피해 발생 등으로 인해 최근 여러 나라에서 활발한 연구가 이루어지고 있다. 남해안 일대의 몇몇 어ㆍ패류 양식장에서 이용하고 있는 식물먹이생물 및 동물먹이생물의 배양수조 내에서 배양을 목적으로 하는 먹이생물 이외의 혼재 생물의 종류를 조사하던 중 Haptophyta의 Prymnesium속 생물이 혼재하고 있는 것을 발견하였으며, 혼재된 Prymnesium은 양식 패류의 인공 종묘 생산 과정에서 사육 치패의 먹이로 이용되는 식물먹이생물 Isochrysis galbana의 증식을 크게 억제하였고, 더욱이 Prymnesium이 혼재된 Isochrysis galbana를 인공 종묘생산 중이던 치패에 투이한 결과 치패 모두가 폐사에 이르는 것을 관찰하였다. 이에 Isochrysis galbana의 배양 수조내에 Prymnesium이 혼입 하였을 경우 Isochrysis galbana의 증식양상을 알아보기 위해, Isochrysis galbana의 세포밀도를 5,440,000cells/ml로 하고 Prymnesium의 세포밀도를 10,000cells/ml로 하여 혼합 배양한 결과 배양개시 1일 후의 각 세포밀도는 Isochrysis galbana가 1,040,000cells/ml로 급격히 저하하였으며, 이와는 달리 Prymnesium은 50,000cells/ml로 증가하였다. 이들 종 각각의 증가 및 감소추세는 계속되어 배양개시 5일 후에는 Isochrysis galbana가 530,000cells/ml로 처음 배양당시 세포수의 90% 이상 감소하였고, Prymnesium은 43,333cells/ml로 4배 이상 증가하였다. 이 실험에서 Isochrysis galana의 세포수가 감소하는 이유는 정확히 알 수는 없으나, 하프토조의 일부 종에서는 광합성을 통한 유기물합성 이외에도 외부로부터의 DOC(dissolved organic carbon)를 직접 배양수로부터 취하거나 또는 영양염 제한 조건에서는 food particle을 섭취하는 경우가 있는 것으로 보고되고 있다. 한편, 이들 Haptopyta가 양식장에서 이용되어지는 해수를 통해 유입되는지를 알아보기 위해 모래여과조를 통과한 해수를 플랑크톤 배양용 배지의 첨가 없이 배양한 결과, Haptophyta의 Prymnesium, Chrysochromulina 및 Phaeocystis 둥의 수 종이 출현하였으며, 일부 종의 경우는 일정기간 지속적으로 배양되어짐을 알 수 있었다.
Culture of osteoblast is extremely valuable in analyzing biological features that are specific to bone. ENA-A, ENA actimineral resource A, is a seaweed origin alkaline water. To investigate the bioactivity of ENA which act on bone metabolism, we studied the effects of a ENA on the activity of osteoblast MC3T3-E1 cells. ENA (1, 2, 4%) dose-dependently increased survival (p<0.05) and alkaline phosphatase activity (p<0.05) on MC3T3-E1 cell. And examined histochemistry and nodule formation according to the time course. To determine the expression patterns of bone-related proteins during the MC3T3-E1 osteoblast-like cell differentiation by using RT-PCR. This study suggest that ENA may promote the function of osteoblastic cells and play an important role in bone formation.
Ultrasound brain stimulation is spot-lighted by its capability of inducing brain cell activation in a localized deep brain region and ultimately treating impaired brain function while the efficiency and directivity of neural modulation are highly dependent on types of stimulus waveforms. Therefore, to optimize the types of stimulation parameters, we propose a cell-cultivable ultrasonic transducer having a series stack of a spin-coated polymer piezoelectric element (Poly-vinylidene fluoride-trifluorethylene, PVDF-TrFE) and a parylene insulating layer enhancing output acoustic pressure on a glass-coverslip which is commonly used in culturing cells. Due to the uniformity and high accuracy of stimulus waveform, tens of neuronal cell responses located on the transducer surface can be recorded simultaneously with fluorescence microscopy. By averaging the cell response traces from tens of cells, small changes to the low intensity ultrasound stimulations can be identified. In addition, the reduction of stimulus distortions made by standing wave generated from reflections between the transducers and other strong reflectors can be achieved by placing acoustic absorbers. Through the proposed ultrasound transducer, we could successfully observe the calcium responses induced by low-intensity ultrasound stimulation of 6 MHz, 0.2 MPa in astrocytes cultured on the transducer surface.
Ghrelin is a 28 amino acid orexigenic peptide hormone that is secreted predominantly by tX/A cells in the stomach, and it plays a major role in energy homeostasis. Activated ghrelin has an n-octanoyl group covalently linked to the hydroxyl group of the Ser3 residue, which is critical for its binding to the G-protein coupled growth hormone secretagogue receptor-1a (GHS-R1a). According to recent reports, both ghrelin and its receptor, GHS-R1a, are expressed by a variety of immune cells, including T- and B-lymphocytes, monocytes, and dendritic cells, and ghrelin stimulation of leukocytes provides a potent immunomodulatory signal controlling systemic and age-associated inflammation and thymic involution. Here, we report that ghrelin protected murine thymocytes from dexamethasone (DEX)-induced cell death both in vivo and in vitro. Subsequently, we explored the molecular mechanisms of the antiapoptotic effect of ghrelin. According to our experiments, ghrelin inhibited the expression of proapoptotic proteins via the regulation of glucocorticoid receptor (GR) phosphorylation. As a result, ghrelin inhibited the proapoptotic activation of proteins, such as Caspase-3, PARP, and Bim. These data suggest that ghrelin, through GHS-R, inhibits the pathway to apoptosis by regulation of the proapoptotic protein activation signal pathway. They provide evidence that blocking apoptosis is an essential function of ghrelin during the development of thymocytes.
Early spermatocytes of U. unicinctus are found in cluster floating in the coelomic fluid. The spermatocytes in a cluster form a syncytium or cytoplasmic mass, but there are no indications that the cytoplasmic mass is a component of a somatic cell. This work suggested that this type of spermatogenesis can be subordinated to solitary spermatogenesis in the sense excluding structural and functional support of a somatic cell for sperm developments. The solitary spermatogenesis in U. unicinctus is different in appearances and developmental details of sperm organelles and stage distributions from that of localized spermatogenesis. The acrosomal rudiments and centrioles can be observed in the early single cells of spermatogonia and clearly disclosed in the primary spermatocyte. In the stage of secondary spermatocyte, the acrosomal precursor and the centrioles begin to move to each cytoplasmic poles. The polarities of the organelles are attained at stage of spermatids. The spermatocytes and spermatids are arranged circumferentially along the cytoplasmic mass in which some amorphological cytoplasmic components are included. The spermatids reveal to be detached from the cytoplasmic mass into coelomic fluid. It suggests that the spermatogenesis are progressed in support of coelomic fluid, and the fact take into consideration that the spermatogenic cells can be in vitro cultured without somatic cells and with supplements of coelomic fluid.
Osteoporosis is a disease that increases the risk of fractures by inducing a decrease in bone strength by the changes in hormones and a decrease in minerals. Recent reports have indicated that the long-term administration of Adefovir dipivoxil (ADV), which is used as a treatment for the hepatitis virus and AIDS, may have osteoporotic side effects. On the other hand, there are few studies on the cytopathic correlation of these causes. In this study, the biological relevance of ADV was evaluated using osteoblast hFOB1.19 and vascular endothelial cell HUVEC. First, the cells were treated with ADV at different concentrations, and DAPI and crystal violet staining were performed for morphological analysis of each cell and nucleus. A CCK-8 assay, real-time PCR, alkaline phosphatase (ALP) staining, and activity was performed to evaluate the drug effects on cell proliferation, gene expression, and osteoblast differentiation. As a result, ADV induced cell hypertrophy in hFOB1.19 cells and HUVEC cells. Furthermore, ADV not only inhibited cell proliferation and TGF-${\beta}$ expression but was also involved in osteoblast differentiation. Overall, these results provide basic data to help better understand the mechanism of ADV-induced osteoporosis and its clinical implications.
Plastic products have long been widely used in both industrial and household applications. However, tiny plastic particles derived from plastic products, such as microplastics (MPs) and nanoplastics (NPs), can infiltrate the human body through inhalation, ingestion, or skin contact. Once inside cells via endocytosis, MPs and NPs (MNPs) can trigger autophagy, but lysosomal dysfunction can block autophagic flux. Accumulating in the cytoplasm, these particles induce cellular stress, including oxidative stress from free radicals, mitochondrial dysfunction, and increased inflammatory response. Meanwhile, cellular senescence is a hallmark of aging and is defined as the stable termination of the cell cycle in response to cell damage and stress. In particular, the accumulation of oxidative stress, a key factor in inducing cellular senescence, induces the expression of major senescence markers. Senescent cells increase the secretion of senescence-associated secretory phenotype, including inflammatory cytokines and chemokines. Despite growing interest in how MNPs induce cellular senescence, there remains a gap regarding their onset and therapeutic targets. Therefore, this review focuses on identifying recent research trends on how MNPs induce cellular aging in key human cell types and proposes future research directions to overcome these challenges.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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