Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.50-50
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1993
최근의 암치료용 제제는 암세포의 분화를 재개시켜서 정상적인 세포로 분화 유도하는 약재개발에 촛점을 맞추고 있으므로 본 연구에서는 F9 EC세포주에 의한 분화인자 스크리닝 시스템을 확립하고 나아가 새로운 분화 유도인자를 스크리닝 하는데 그 목표를 두고 연구를 수행하였다. 즉 F9 EC세포의 세포 배양조건을 먼저 확립하였으며 retinoic acid에 의한 F9 EC세포의 분화유도 시스템을 다음과 같이 확립하였다. 1 단계: F9 EC세포에 스크리닝할 물질의 단독처리 2 단계: 스크리닝할 물질에 dibutyryl cyclic AMP(dbc-AMP)와 theophylline을 첨가하여 처리 3 단계: 분화 marker유전자의 발현조사 그리고 이 시스템을 이용하여 천연 식물 및 해양동식물에서 추출한 성분을 대상으로 하여 새로운 분화인자의 검색을 시도한 결과, saponin, steroid 및 glycolipid계열의 물질이 분화인자로서 효과가 있음이 나타났다.
Purpose: To evaluate the differentiation potential of stem cells and their immunophenotype from 3 different sources. Methods: Our study involved three stem cell sources-subacromial bursal tissue, bone marrow, and umbilical cord blood. We obtained the subacromial bursal tissue and bone marrow from the patients undergoing shoulder surgery. After collecting the sample, we applied specific induction media for neurogenic, adipogenic and osteogenic differentiation. Also, flow-cytometry analysis was done to reveal the cell surface antigens. Results: We obtained 100% (8 cases) neural and adipogenic differentiation, but 62.5% (5 of 8 cases) osseous differentiation among the subacromial bursal tissue group. Bone marrow derived cells showed 100% neural (6 cases) and adipogenic (5 cases) differentiation, but 80% (4 of 5 cases) osseous differentiation. Umbilical cord blood derived cells revealed 97% (65 of 67 cases) neural, 53.7% (29 of 54 cases) adipogenic and 68.4% (39 of 57 cases) osseous differentiation. Immunophenotype analysis revealed that surface markers of bone marrow, subacromial bursal cell and umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells are different from each other. Conclusions: Mesenchymal stem cells are potential agents in regenerative medicine and are characterized by expression of surface markers and by their differentiation potential. Our study with stem cells from subacromial bursal tissue, bone marrow and umbilical cord discovered that each stem cell has unique differentiation potential and function based on its origin. Various stem cells show multi-lineage differentiations in vitro which can be correlated to in vivo conditions.
Obesity is known as a metabolic disease caused by abnormal differentiation of fat tissue due to an imbalance between energy intake and consumption.. The purpose of this study was to confirm the changes in the genes associated with pancreatic lipase activity and pre-adipocyte cell differentiation by treatment of red onion extract treatment. The effect of red onion extract treatment on pre-adipocyte differentiation was evaluated using 3T3-L1 adipocytes, and the activity of related genes was confirmed through Real-Time PCR. As a result of the experiment, the red onion extract inhibit pancreatic lipidase activity by concentration dependent manner. In addition, it was found to inhibit adipocyte differentiation and inhibit the activity of genes(C/EBP-α, C/EBP-β, PPAR-γ) associated with adipocyte differentiation. Through the results of this experiment, it is suggested that the red onion extract can be developed as a high potential material with anti-obesity efficacy by suppressing adipocytic differentiation by controlling genes related to adipocyte differentiation.
To establish the in vitro culture system and quantitation for chondrogenesis, and to investigate the relationship between cell aggregation and chondrogenesis, chick limb bud mesenchymal cells of Hamburger-Hamilton stage 23/24 were micromass cultured in various cell densities. The chondrogenesis was assayed based on checking the alcian blue-stained nodule numbers, the amount of alcian blue extraded, the change in cell numbers, the rate of [35 S] sulfate incorporation and expression of type II collagen. Mesenchymal cells plated with an initial density of high (1 x 107 cells/ml)- and intermediates (5. $\times$ 106 cells/ml)-density were differentiated into cartilage. On the other hand, the cells of low density (2 x 106 cells/mi, 5 $\times$ 105 cells/ml) of stage 23/24 cells and the stage 18/19 cells in three kinds of cell density did not differentiate into cartilage even though the cells formed an aggregated core at the center of cultured mass. From these results and others obtained in this study, it can be stated that the stage 23/24 mesenchymal cells are likely to pass over the aggregation step and have the potentiality to differentiate into chondrocytes. Thus chondrogenesis in vitro can be observed when mesenchymal cells are plated over the threshold density of 5 $\times$ 106 cells/ml. Hyaluronidase (HAase) activity was relatively constant throughout the culture, suggesting that the role of HAase may not be important for the cells of stage 23/24.
Reactivation of human cytomegalovirus (HCMV) from latency is often fatal to immunocompromised individuals. To understand the effect of HCMV on human monocytes where HCMV establishes latency, two human monocyte cell lines at different stages in differentiation, THP-1 and HL-60 were infected with HCMV. While the viability and morphology of HL-60 cells were not significantly affected by HCMV, the viability of THP-1 cells was dramatically decreased by HCMV infection. THP-1 cells infected with HCMV became aggregated and adhered to the surface of culture dishes, probably due to the increased expression of adherence molecules CD11b on the infected THP-1 cells. THP-1 cells established a latent HCMV infection were induced to differentiate by treatment with TPA and hydrocortisone. Recovery of infectious HCMV from the culture supernatant of differentiated THP-1 cells was dependent on the time of induction of differentiation after HCMV infection. Thus, in vitro model of reactivation of HCMV from latently infected monocytes was established.
본 실험은 TGF-a를 처리하여 분화가 유도된 인간배아 줄기세포를 파킨슨 동물모델에 이식하여 숙주세포에서의 생존 및 이식효과를 검토하고자 실시하였다. TGF-a로 분화된 세포의 이식효과를 판정하고자 배양시 TGF-a처리군과 처리하지 않은 군으로 나누어 분화를 유도한 인간배아 줄기세포를 hoechst33342로 표지 하여 병변 유발과 동일한 방법으로 동측 선조체내에 4×10⁴개/2ul가 되도록 이식하고(이식 위치: AP 0.7, ML 2.0, DV3.4) 이식 후 2, 4주에서 행동학적 변화를 관찰하고 4주에 동물을 희생시켜 4% PFA를 이용하여 뇌 조직을 고정하고 뇌 조직은 40㎛ 두께로 동결 절편을 만들어 면역조직화학염색을 시행하여 신경세포로의 분화 및 TH 발현 여부를 관찰하였고 분화의 표지물질로 nestin, NF200, GFAP, TH를 사용하여 형태학적 변화를 관찰하였다. (중략)
The purpose of this study was to determine the effect of selenate on adipocyte differentiation and to identify genes involved in the modulation of adipogenesis in 3T3-L1 cells. To test the effect of selenate on adipocyte differentiation, adipogenesis was induced in cells using various concentrations ($0-100{\mu}M$) of selenate. Various phases of adipogenesis were induced: postconfluent (PC), early phase (EP, d0-d2), postmitotic growth arrest (PM, d2-d4), and all period (AP). The PC cells exposed to selenate for 24 h displayed dose-dependent inhibition of intracellular lipid droplet accumulation on day 6 of adipogenesis. Two days of selenate treatment at EP or AP inhibited adipogenesis, with an approximately 20-80% reduction in lipid accumulation compared to that of a control (p<0.05). When preadipocytes were exposed to selenate during the PM period, the antiadipogenic effect of selenate was attenuated. Two types of selenoprotein genes (Seps1 and Sepp1) were up-regulated by the selenate treatment during mitotic clonal expansion, whereas these genes were down-regulated during PM growth arrest (p<0.05). The findings demonstrate the antiadipogenic function of selenate and the possible involvement of Sepp1 and Seps1 genes in selenate-inhibited adipogenesis in 3T3-L1 cells.
Park, Ki-Youb;Oh, Hyun-Chang;Lee, Ji-Yong;Kim, Man Su
Journal of Life Science
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v.27
no.6
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pp.623-631
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2017
In the subventricular zone (SVZ) and the subgranular zone of the brain, neurogenesis occurs throughout one's lifespan. Neural stem cells (NSCs) in these regions divide to maintain their stem cell pools as well as differentiate into neurons and glial cells. To monitor cell division, a thymidine analogue such as 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) has been used. In some cases, EdU was applied to label newly born neurons. Here, we report about the effects of EdU on the proliferation and differentiation of NSCs cultured from mouse SVZ. First, when NSCs were cultured in a proliferation medium containing EdU for 24 hr, they did not generate any neurons under the following differentiation conditions. When EdU was applied to the proliferating NSCs for 1 hr prior to differentiation, neurogenesis was still substantially reduced. Second, EdU decreased cell proliferation of NSCs in dose- and time-dependent manners. Finally, EdU inhibited differentiation into oligodendrocyte lineage, while the number of glial fibrillary acidic protein (GFAP)-positive astrocytes increased. To our knowledge, these findings are the first to show the effects of EdU on the differentiation of SVZ NSCs and suggest that cell division is necessary for differentiation into neurons and oligodendrocytes.
It is researched to elucidate the effects of Taeumjowuitang(TE,太陰調胃湯), Sibimikwanjungtang(SE, 十二味寬中湯) and Yangkeogsanwhatang(SY,凉膈散火湯) on the obesity induced by gold thioglucose and the differentiation and growth of preadipocyte 3T3-L1 in the mouse. The result were as follows: 1. TE,SE and SY extracts improved the blood level of transaminase in the obese mouse induced by gold thioglucose. 2. TE,SE and SY extracts inhibited the increase of liver fat and body fat in the obese mouse induced by gold thioglucose. 3. TE,SE and SY extracts inhibited the increase of body weight in the obese mouse induced by gold thioglucose. 4. TE,SE and SY extracts inhibited the growth of undifferentiate preadipocyte 3T3-L1. 5. TE,SE and SY extracts showed inhibitory effect on the differentiation of preadipocyte 3T3-L1. The above results suggest that the TE,SE and SY extracts may be used on the obesity induced by the overgrowth and differentiation of adipocyte, and the accumulation of fat in liver and body.
As embryonic stem cells become pluripotent, they may cause tumor development when injected into a host. Therefore, researchers are focusing heavily on the therapeutic potential of tissue-specific stem cells (adult stem cells) without resultant tumor formation. Adult stem cells can proliferate for a limited number of generations and are restricted to certain cell types (multipotent). Mature tissue cell types in mammals cannot be intrinsically dedifferentiated or transdifferentiated to adult stem cells. Hence, the technology of induced pluripotent stem cells (iPSCs) for reprogramming adult somatic cells was introduced in 2006, ushering in a new era in adult stem cell research. Although iPSCs have been widely used in the field, the approach has several limitations: instability of the reprogramming process, risk of incomplete reprogramming, and exposure to transgenes integrated into the cell genome. Two years before the introduction of the iPSC technique, the synthetic small molecule 2,6-disubstituted purine, called reversine, was introduced. Reversine can induce the dedifferentiation of committed cells into multipotent progenitor-type cells by reprogramming and converting adult cells to other cell types under appropriate stimuli. Thus, it can be used as a chemically induced multipotent cell agent to overcome the limitations of iPSCs. Also, as an alternative therapeutic approach for treating obesity, it can be used to generate beige cells by browning white adipocytes. While reversine has the potential to act as an anti-cancer agent, this review focuses on its role in differentiation, dedifferentiation, and transdifferentiation in somatic cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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