This study was performed to functional improvement by fermenting of SCB (Slurry Composting and Biofiltering) liquid fertilizer. After screening of cellulose decomposing test using microorganisms originated from composts produced with turf grass clipping, five kinds of Cellulose Decomposing Microorganisms (CDMs) were selected. The optimum medium for CDMs culture was Tryptic soy broth. The optimum fermenting time of CDMs in SCB liquid fertilizer was 36 hour. In addition, CDMs showed antimicrobial activity in vitro. Sclerotinia homoeocarpa, Rhizoctonia solani AG2-2(IV) and Pythium spp. were inhibited by CDMs, but Rhizoctonia solani AG2-2(IIIB) in vitro uneffected by CDMs we isolated.
The cellulosome of Clo.~tr~rlil~m tl\ulcornererfnocellum consistmg of 26 dfferent polypeptides contains calcium. The polypeptides dissociated when calcium was removed. Most of dockerill region in the catalytic polypeptides cleavcd during dmociation. The dissociated polypeptides were well separated by MonoQ column chromatography into CipA containing fraction, a fraction still complexed wit11 91 kDa (CelK-a). 60 IiDa and 57 kDa polypeptides, and fractious contailling mainly single polypeptide of 46 kDa (CelA-a) or 71 1d)a polypeptide (CelS-trj Most or the fractions hydrolyzed c~ystalliue cellulose The purified 71 kDa polypeptide was strictly dependent on calcium for crystalline cellulose hydvolyzing activities a1 $60^{\circ}C$~$70^{\circ}C$ but 46 kDa polypeptide was not. 46 M)a polypeptide digested cellodextri~~ as cellobiose or cellotriose unit, and glucose was produced together with cellobiose and cellotriose froln cellotetraosc. It seems that cellulosome produces final product, cellobiose, through coordinated ~qulation of activities of vannus subunits.
In the studies of microbiological utilization of cellulosic wastes, cellulolytic fungi were isolated and screened out. At the first stage, 221 cellulolytic fungi were isolated from different sources such as soils, humus, composts and rotten wood debris by enrichment culture techniques. In the second stage, 36 strains of fungi out of those previously isolated were selected for their cellulase activities estimated by means of filter paper degradation, carboxy methyl cellulose liquefaction and cup method. Activities of C$_1$-cellulase, C$\sub$x/-cellulase and filter paper activity were adopted on the final screening stage and five different strains which are tentatively identified as Aspergillus sp.(strain No. AS-9), Penicillium sp. (strain No. KNI-1-2), Trichoderma, sp. (strain No. KI-7-2, KI-7-5, KI-4-1-1B) were selected for their high potency of C$_1$ and C$\sub$x/-cellulase activities. When rice straw milled and treated with NH$_4$OH was hydrolyzed with the crude enzyme Prepared from the culture broth of Trichoderma sp. (strain No. KI-4-1-1B), saccharification rate was obtained up to 26%.
The aim of this investigation was to resolve the contradiction between the results of Sternberg and Mandels (1980, 1982)and those of Nisizawa et al., (1971) in cellulase induction by sophorose, and furthermore to study the conditional effects in sophorose-induced cellulase induction in Trichoderma reesei QM 9414. Sophorose could induce the synthesis of CMCase and ${\beta}-glucosidase$ simultaneously. Optimal induction medium by sophorose had the potassium citrate buffer solution of pH 3.0-4.0 for CMCase, but one of pH 5.0-6.0 for ${\beta}-glucosidase$. At this time, two different types of ${\beta}-glucosidase$ could be induced by sophorose: one was extracellular and had maximum at pH 5.0, the other was intracellular and had maximum activity at pH6.5. Induction study showed that $methyl-{\beta}-glucoside$ was not a true inducer of ${\beta}-glucosidase$ and that large ${\beta}-glucosidase$ induction could be obtained only by the addition of sophorose into the induction medium. Glucose repressed the induction of cellulase by sophorose. The repression of glucose could not be overcome by the addition of cyclic AMP into the induction medium.
For the utilization of natural cellulosic materials by microorganisms, a potent cellulase-producing microorganism was isolated and identified as Trichoderma spp. Rice straw used as a substrate in this study was preliminarily treated with chemical solvents and/or additionally treated with acids and by heat, and then examined with the cellulase produced by the organism. Better results in sugar production by decomposing the straw cellulose were obtained, when the cellulase was produced by cultivating the organism in the selection medium, pH 5.0, for 5 days, and when the pretreated straw substrate was additionally treated with 0.1% $H_2SO_4$ sulfuric acid at $120^{\circ}C$ for 1 hour. The enzyme production was increased by about 20%, when 0.5% urea 0.5% phosphate, 0.1% meat extract, or 5% orange peel was added into the culture medium. For the practical purposes, the sugar production from the rice straw by the cellulase-producing microorganism can be improved by extending the reaction time of the enzyme up to 24 hr or longer.
This study was carried out to obtain some useful data for increasing an effective ginseng production. There was a direct relationship (r=0.2645) between spore germination of Fusarium solani and soil pH, and (r=0.315) between Cylindrocarpon destructans and soil pH. On the other hand, there was a direct relationship (r=0.19) between relative hyphal growth of Rhizoctonia solani and soil pH. There was a direct relationship (r=0.21) between number of total bacteria and F. solani, (r=0.37) between actinomycetes and F. solani and (r=0.20) between celluloytic bacteria and F. solani. However, there was an inverse relationship (r=-0.20) between number of total fungi and F. solani. There was a direct relationship (r=0.24) between number of actinomycetes and R. solani. Each ginseng pathogen-suppressive soil screened was 40 in F. solani, 20 in C. destructans and 9 soil samples in R. solani among 146 soil samples, respectively. The mean contents of K, Ca and Mg were fairly lower in each ginseng pathogen-suppressive soil than conducive soil, whereas Na were somewhat lower. The mean contents of organic matter were over 2 times higher in each ginseng pathogen-suppressive soil than conducive soil. The mean contents of phosphate were fairly lower in F. solani and R. solani-suppressive soil than conducive soil and, on the other hand, were somewhat higher in C. destructans-suppressive soil than conducive soil. The mean soil pH was somewhat lower in each ginseng pathogen-suppressive soil than conducive soil. The mean contents of sand were about 2 times higher in each ginseng pathogensuppressive soil than conducive soil, whereas silt and clay were somewhat lower. The microbial numbers of total bacteria, total fungi and celluloytic fungi were higher in F. solani-suppressive soil than conducive soil, whereas actinomycetes and celluloytic bacteria were lower. Each microbial number of total bacteria or total fungi indicated a significant difference (p=0.05) between F. solanisuppressive and conducive soil, and the microbial number of actinomycetes was a highly significant difference (p=0.01) between F. solani-suppressive and conducive soil. The microbial numbers of total bacteria, total fungi, actinomycetes and celluloytic fungi were higher in C. destructans-suppressive soil than conducive soil, whereas celluloytic bacteria were about 2 times lower. On the other hand, the microbial numbers of total fungi were higher in R. solani-suppressive soil than conducive soil, whereas total bacteria, actinomycetes, celluloytic bacteria and celluloytic fungi were lower. Fourteen of 16 F. solani-suppressive soils tested were suppressive to ginseng root rot, whereas fifteen of 16 C. destructans-suppressive soils were suppressive. Ginseng root rots of ginseng disease-suppressive soils were in the range of 1.0-17.4% in F. solani-suppressive soil and 0.2-20.4% in C. destructans-suppressive soil, respectively.
The cellulases production in solid state fermentation (SSF) of Trichoderma harzianum FJ1 with high cellulases productivity using cellulosic wastes was investigated. Physical and chemical conditions of the fermentation, such as moisture content, initial pH, and composition of mixed substrate (wine waste, rice straw, and soybean flour) on FPase (Filter paper activity) production were examined. The enzyme production was optimized in the conditions of moisture content of 70%, pH 5.0, 3$0^{\circ}C$, and 1:1:1 composition of mixed substrate containing wine waste, rice straw, and soybean flour. The highest activities of FPA, CMCase, Xylanase, $\beta$-glucosidase, and Avicelase in the optimized culture conditions were 15.2, 69.1, 83.9, 29.2, and 4.2 unit/g-SDW in 5 day cultivation, respectively. Economical and efficient production of cellulolytic enzymes by T harzianum FJ1 using cellulosic wastes in solid state fermentation will contribute to the biological saccharification of cellulosic wastes with enormous potential resource value in future.
In order to develop the processes for the production of fermented feed from cellulosic agricultural by-product, cereal straw, by th action of cellulolytic fungus, the properties of the cellulolytic enzyme produced by Trichoderma sp. KI 7-2 was studied. A higher enzyme activity was obtained in the culture added by 1% rice or barley straw powder than in the culture of pure cellulose. The crude enzyme was prepared by precipitating from 20∼60% saturated ammonium sulphate of the culture supernatant. The optimum conditions for the enzyme reaction were temperature of of 50$^{\circ}C$ and pH 4.2. The crude enzyme was static at 50$^{\circ}C$ for two hours and at pH between 4 and 6. These properties were adopted for the fermented feed production, and several production. Thus, several processes of semisolid culture were devicced to up grade tile fermented feed and to develop into the acceptable quality.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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