Chitosan scaffold is widely applied to drug delivery and tissue engineering. We have developed chitosan scaffolds, with various pore size, by differing freezing temperature and duration of ultraviolet (UV) irradiation, for reconstructing skin equivalent. Chitosan scaffold was coated with type I collagen, fibronectin and basic fibroblast growth factor (bFGF) in various combinations and concentrations, to evaluate the effect of extracellular matrix (ECM) and bFGF on cell adhesion, growth and differentiation of dermal fibroblasts. Human dermal fibroblasts, isolated from newborn foreskin and passaged between 3 and 5, were seeded on the top of scaffolds and cultivated for 2 weeks. We examined the morphology and the secretion of ECM of fibroblasts using scanning electron microsopy (SEM) and histochemistry. A stellate morphology of fibroblasts were seen in all groups. The scaffold coated with either type I collagen and bFGF or type I collagen and fibronectin, however, showed the best condtion of dermal fibroblasts, in that the highest cell number and ECM secretion were seen. On the contrary, scaffolds coated with all three factors, type I collagen, bFGF and fibronectin, showed lower number of cells and ECM secretion than scaffolds with two factors. There was a tendency of dose-dependence in all three factors for fibroblast growth and ECM secretion. In conclusion, we may suggest that chitosan scaffold coated with either type I collagen/bFGF or type I collagen/fibronectin could provide more favorable environment for the growth and differentiation of dermal fibroblasts.
Kwak, Moon Hwa;Yun, Woo Bin;Kim, Ji Eun;Sung, Ji Eun;Lee, Hyun Ah;Seo, Eun Ji;Nam, Gug Il;Jung, Young Jin;Hwang, Dae Youn
Journal of Life Science
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v.26
no.6
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pp.633-639
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2016
Biomaterials including polymer, metal, ceramic, and composite have been widely applied for medical uses as medical fibers, artificial blood vessels, artificial joints, implants, soft tissue, and plastic surgery materials owing to their physicochemical properties. However, the biocompatibility and toxicity for film- and plate-form biomaterials is difficult to measure in mammalian cells because there is no appropriate incubation system. To solve these problems, we developed a novel mammalian cell culture system consisting of a silicone ring, top panel, and bottom panel and we applied two polymer films (PF) and one metal plate (MP). This system was based on the principal of sandwiching a test sample between the top panel and the bottom panel. Following the assembly of the culture system, SK-MEL-2 cells were seeded onto Styela Clava Tunic (SCT)-PF, NaHCO3-added SCT (SCTN)-PF, and magnesium MP (MMP) and incubated at 37℃ for 24 hr and 48 hr. An MTT assay revealed that cell viability was maintained at a normal level in the SCT-PF culture group at 24 or 48 hr, although it rapidly decreased in the SCTN-PF culture group at 48 hr. Furthermore, the cell viability in the MMP culture group was very similar to that of the control group after incubation for 24 hr and 48 hr. Together, these results suggest the sandwich-type mammalian culture system developed here has the potential for the evaluation of the biocompatibility and toxicity of cells against PF- and MP-form biomaterials.
The objective of this study was to fabricate hydroxyapatite (HA) containing titania layer by HA blasting and anodization method to obtain advantages of both methods and evaluated biocompatibility. To fabricate the HA containing titania layer on titanium, HA blasting treatment was performed followed by microarc oxidation (MAO) using the electrolyte solution of 0.04 M ${\beta}$-glycerol phosphate disodium salt n-hydrate and 0.4 M calcium acetate n-hydrate on the condition of various applied voltages (100, 150, 200, 250 V) for 3 minutes. The experimental group was divided according to the surface treatment procedure: SM (simple machined polishing treatment), HA, MAO, HA+MAO 100, HA+MAO 150, HA+MAO 200, HA+MAO 250. The wettability of surface was observed by contact angle measurement. Biocompatibility was evaluated by cell adhesion, and cell differentiation including alkaline phosphatase activity and calcium concentration with MC3T3-E1 cells. The porous titanium oxide containing HA was formed at 150 and 200 V. These surfaces had a more hydrophilic characteristic. Biocompatibility was demonstrated that HA titania composite layer on titanium showed enhanced cell adhesion, and cell differentiation. Therefore, these results suggested that HA containing titania layer on titanium was improved biological properties that could be applied as material for dental implant system.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.35
no.2
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pp.109-114
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2013
Polyhydroxyalkanoates (PHAs) are synthesized by numerous bacteria as carbon and energy storage compounds and are raw materials for biocompatible plastics. In this paper, the effect of $CO_2$ concentrations on the growth of C. necator and the accumulation of Poly(3-hydroxybutyrate) (P(3HB)) are investigated by increasing the $CO_2$ concentration in the substrate gas mixture. During 6 d cultivation in a nitrogen-present mineral medium, the $CO_2$ concentration did not affect the growth of the cells, while the Poly(3- hydroxybutyrate) (P(3HB)) content decreased with increasing $CO_2$ concentrations from 1% to 20%. During 4 d cultivation in the nitrogen-limited medium, the P(3HB) accumulation was the greatest at 3% $CO_2$; however, the total amount of accumulated P(3HB) was the greatest at 1% $CO_2$, which decreased with increasing $CO_2$ concentrations. The results indicate that the gas mixture with 1% $CO_2$ is the most effective in both growing the cells and accumulating P(3HB) under our experimental conditions.
Seung-Woo Lee;Yun-Jong Kim;Jae-Gyeoung Ruy;Taik-Nam Kim
The Journal of Engineering Research
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v.6
no.2
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pp.23-32
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2004
Metals, ceramics and polymers are widely used as bioimplant materials. However, Ti and Ti alloys are widely used because of its high strength to weight ratio and good biocompatibility when implanted in the body. In this experiment, Ti alloys of Grade-4 (gr4), 0.2 wt % Fe, 0.5 wt % Fe and 2 wt % Fe were studied for their surface morphology and HAp forming ability on the metal substrate for different treatments. Intially, the samples were mechanically polished on silicone carbide paper (No.-2000). The polished samples were treated with 5M NaOH solution at $60^{\circ}C$ for 24 hours. The NaOH treated samples were washed gently with distill water and dried at $40^{\circ}C$ for 1 day. The dried samples were heated in air at $600^{\circ}C$ for 1 hour. The surface morphology of these samples were studied using SEM. The SEM studies showed network of pores in all samples. These samples were immersed in stimulated body fluids (SBF) kept at $36.5^{\circ}C$ for different periods over the length of 1 to 14 days. The apatite formation was confirmed on all Ti-alloys using EDAX.
최근 펩티드를 포함한 다양한 물질들의 자기조립 (self-assembly) 나노구조체에 대한 연구들이 많이 진행되고 있다. 이는 이러한 분자들로 구성된 구조체들이 환경친화적이며, 생체 나노구조체를 묘사함을 통해 세포소기관의 기능 역시 모방할 수 있다고 기대되기 때문이다. 만약 분자 수준에서 자기조립을 형성하는 단위체를 살펴본다면 자기조립 나노 구조를 개발하는 방법에 대한 통찰을 얻을 수 있을 것이다. 본 연구에서는 최근에 Wen Li 그룹에서 개발한 쉽게 합성할 수 있는 자기조립 펩티드의 적합성을 분자 수준에서 규명하였다. 이를 위해 복제계-맞바꿈 분자 동역학 시뮬레이션 (replica exchange molecular dynamics simulation)을 통해 구조를 샘플링 (sampling)하였고, 얻어진 구조들을 평균 제곱근 편차 (root mean square deviation, RMSD)를 기준으로 클러스터링하였다. 그 결과로 매우 우세한 상대빈도를 보이는 하나의 구조를 얻었으며, 그 구조가 탄소 골격과 잔기의 배열의 측면에서 자기조립 펩티드로 사용되기에 적합함을 규명하였다.
Kim, Sookil;Yum, Ha-Young;Jeong, Tae-Sig;Moon, Chang-Woo
Progress in Medical Physics
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v.14
no.2
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pp.74-80
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2003
The purpose of this study was to evaluate the performance of the teflon encapsulated TLD rod, which may be used in nuclear medicine for the direct in vivo measurements of radiation dose. We analyzed the influence of teflon encapsulation for measuring absorbed dose. An experiment was carried out to evaluate and observe the response of a LiF TLD-100 rod in a thin-wall teflon capsule at different depths in a solid phantom. An adult anthropomorphic phantom was used to measure the absorbed dose using thin teflon encapsulated TLD. The measurements of PDD-, and TMR in solid phantom and athe bsorbed dose in humanoid phantom performed with normal TLD were compared with values obtained by teflon encapsulated TLD. It was demonstrated that the difference of TL response of LiF in phantom with and without teflon thin-wall capsule was less than 3% under the same conditions beyond the build-up region. However, significant differences were observed near the phantom surface because of the build-up effect caused by the thin-wall thickness of the teflon capsule. Thus, our study showed that the contribution of teflon thin-wall capsule to TLD response for the megavoltage photon beams was negligible and that it did not significantly effect dose measurement. The teflon encapsulated TLD described in this work has been proven to be appropriate for in vivo dosimetry in therapeutic environments.
Kim, Kyu-Jin;Kim, Hyun-Man;Ko, Jea Seung;Kim, Dae-Joon;Han, Jung-Suk
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.18
no.2
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pp.73-80
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2002
치과용 임플란트의 세라믹 지대주를 위해 개발된 지르코니아 함유 세라믹 시편의 생체 적합성을 평가하기 위하여 시험관내 세포 독성을 검사를 시행하였다. L929 섬유모세포를 $37^{\circ}C$, 90% 습도, 5% CO2 및 95% 공기의 조건을 유지하는 세포 배양기에서 배양하여 실험에 사용하였다. 배양 2일, 4일, 6일 마다 시편을 넣은 배양 접시 내의 전체 세포 수와 생존 세포 수를 세어 세포 증식과 세포 생존율 검사를 시행하였다. millipore filter test를 이용하여 succinate dehydrogenase 효소 활성을 검사하였으며, 세포막 투과성의 변화를 관찰하기 위해 agar overlay test를 시행하였다. 음성 대조군은 시편을 사용하지 않았으며, 양성 대조군은 시편과 같은 크기의 구리를 사용하여, 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 세포 증식과 세포 생존율 검사에서는 지르코니아 함유 세라믹을 넣은 실험군과 음성 대조군 모두에서 시간이 경과함에 따라 세포가 증식하는 양상을 보였다. 세포 생존율 검사에서도 실험군과 음성 대조군이 유사한 결과를 나타내었다. 2. millipore filter test에서는 실험 시편 모두에서 염색 정도의 변화가 없이 음성 대조군과 동일한 결과를 나타냈다. 반면에 구리 시편을 넣은 양성 대조군에서는 중등도의 세포 독성을 나타냈다. 3. agar overlay test에서도 시편을 넣지 않은 음성 대조군에서는 세포 성장에 변화가 나타나지 않았으며, 실험군에서도 시편 주위로 탈색이 관찰되지 않아서 음성대조군과 같은 결과를 나타냈다. 양성 대조군에서는 심한 세포 독성을 나타내었다. 4. 실험결과, 치과용 임플란트의 세라믹 지대주를 위해 개발된 지르코니아 함유 세라믹 시편은 시험관내 세포 독성을 나타내지 않았다.
Son, Tae Il;Park, Se Hoon;Kang, Hahk Soo;Jang, Eui Chan
Applied Chemistry for Engineering
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v.16
no.2
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pp.226-230
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2005
Chitosan derivatives, 6-amino-6-deoxychitosan (6A6DC) was successively prepared as a reactive carbohydrate for the stabilization of epidermal growth factor (EGF) by the reactions of chitosan with tosyl chloride, sodium azide, and lithium aluminum tetrahydride. The structure of 6A6DC was confirmed by EA, FT-IR, $^1H-NMR$ and $^{13}C\{^1H\}-NMR$. The degree of substitution (ds) of amino groups in 6A6DC was determined to be 0.7. 6A6DC did not show any cytotoxicity on the normal human dermal fibroblast (NHDF) proliferation at least in the range tested (0.3 g/mL 600 g/mL) and was considered as a suitable material for the stabilization of EGF against proteolytic degradation due to its non-cytotoxicity and high reactivity.
Journal of the Korean Crystal Growth and Crystal Technology
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v.21
no.3
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pp.124-128
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2011
Electrospun webs have been widely investigated for applying to drug delivery system (DDS) because of their high specific surface area and high porosity. In this study, the composite webs of PLA (poly(lactic acid)) and $TiO_2$ were fabricated by melt-electro-spinning method for applying to drug delivery system. The morphologies of PLA/$TiO_2$, webs were observed using scanning electron microscope (SEM) and field emission transmission electron microscope (FE-TEM). The crystal structures of PLA/$TiO_2$ composite webs were confirmed by X-ray diffractometer (XRD).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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