In this paper, it is attempted to investigate the phenomena of iodine stress corrosion cracking of Zircaloy-4 cladding failures in reactor through the results of similar out-of-pile test in iodine vapour. The main result of this experiment is a finding of the relation between the threshold stress which can lead to iodine stress corrosion cracking of Zircaloy-4 tube and the iodine concentration. The values of critical stress and the critical iodine concentration are also obtained. A model which relates failure time of Zircaley-4 tube to failure stress and iodine concentration is suggested as follows: log t$_{F}$ =5.5-(3/2)log$_{c}$-4log $\sigma$ where t$_{F}$ : failure time, minutes c: iodne concentration, mg/㎤ $\sigma$: stress, 10$^4$psi.
Liver regeneration is a result of highly coordinated proliferation of hepatocytes and non-parenchymal liver cells. At this process, induction of metallothionein (MT), which is low molecular and cysteine rich, has been reported. The present study was carried to find the ultrastructure of hepatocytes and determine the expression of MT in regenerating rat liver after partial hepatectomy. As a result, the remnant liver after PH grew fast from 1 day until 7 days. Various changes were morphologically observed. Disintegration of cell plates and liver lobule appeared shortly after PH. And hepatocytes showed the rapid proliferation, characterized by high nuclear cytoplasmic ratio, weak intercellular junctional complexes, chromatin condensation, increase of ribosomes and mitochondria, and temporary increase of lipid droplets. Finally, remodeling of the liver lobule was completed through the rearrangement of blood vessels and cell plates by 7 days after PH. On histochemistry, immunoreactivity indicating the presence of MT appeared moderately throughout the cytoplasm of control rat hepatocyte. After PH, positive reactions for MT increased at the cytoplasm and the nucleus. These results suggest that the remnant liver cells immediately entered cell proliferation and increase of MT expression after PH. It is thought that MT protein might be associated with transfer of some factors needed to cell division from the cytoplasm to the nucleus for regeneration of the liver after PH.
Here we describe a procedure for Chinese cabbage protoplast culture and effects of various treatments. Chinese cabbage protoplasts were isolated from different parts of young seedlings as using an enzyme mixture, of which yield was maximized in seven hours around after digestion. The highest rate of initial cell division followed by micro-callus formation was obtained in the medium with 1.0 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L NAA, and 1.0 mg/L BA when the cotyledon-derived protoplasts were cultured. Initiation of cell division and micro-callus proliferation significantly depended upon Chinese cabbage genotype under a same culture circumstances. The micro-calli developed from cotyledon tissue of Norang-Bom cultivar successfully grew toward callus colonies on the solidified medium with 0.2 mg/L zeatin and 0.1 mM spermidine. The callus colonies generated de novo shoots at the maximum frequency of 4.3% on the medium with 5.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NM. Our results might be helpful for further studies to enhance the regeneration efficiency in Chinese cabbage protoplast culture.
The research of fused oocytes was conducted to investigate the in vitro mejotic maturation of immature oocytes (GV oocytes) fused with oocytes in germinal vesicle breakdown (GVBD oocytes) in the presence of dbcAMP which is known as one of the strong inhibitors to GVBD. The immature oocytes fused together as well as those fused with GVBD oocytes proceeded to GVBD in 3 hr culture in plain medium. But in the medium containing dbcAMP (100$\mu$g/ml), the immature oocytes fused together did not show any GVBD and thus the fusion itself could not affect the inhibitory activity of dbcAMP. However, all of the immature oocytes fused with GVBD oocytes underwent GVBD in 3 hr culture despite of the presence of dbcAMP. When the culture was extended to 20 hr, nearly all of the immature oocytes fused together were still arrested at the GV stage in the presence of dbcAMP. But most of the fused oocytes which had shown GVBD during 3 hr culture developed to metaphase II stage extruding one or two polar bodies regardless of the presence of dbcAMP. In this experiment, it was found that two sets of the metaphase chromosomes were somewhat concomitant with a pair of the polar bodies in the fused egg. Upon the results of the present studies, it is assumed that there may be a maturation promoting factor(s) in the cytoplasm of the GVBD occytes, and this factor(s) possibly nullifies the function of dbcAMP.
We investigated the gene expression patterns and the mechanisms of action of the apoptotic response by microarray analysis of human keratinocyte HaCaT cells treated with ginsenoside Rb1, a saponin of Panax ginseng C. A. Meyer. Genes related to apoptosis, the G2/M transition of the mitotic cell cycle, cell division, mitotic nuclear division, and intracellular protein transport were 2-fold up-regulated in HaCaT cells treated with the ginsenoside Rb1, whereas genes related to DNA repair, regeneration fission, and extracellular matrix organization were 2-fold down-regulated. Apoptosis signaling may be mediated by FAS and PLA2G4A, and pathway analysis indicated that STAT3 might be an upstream regulator of these genes. The activity of FAS and PLA2G4A was verified by qPCR, which showed that FAS was increased about 2-fold in HaCaT cells treated with $10{\mu}g/ml$ of ginsenoside Rb1 for 24 hr, PLA2G4A was increased about twice after 6 hours, and gene expression was increased more than 2-fold after 24 hr. Knockdown of STAT3 with siRNA decreased FAS expression and increased PLA2G4A expression but only FAS was passed from the upstream regulator STAT3. These results indicate that STAT3, which is an upstream regulator, induces apoptosis via FAS during treatment with ginsenoside Rb1.
In order to establish a useful cell culture system for T gondii we compared the degree of proliferation of T gondii tachyzoites among 8 different cell lines: 2 kinds of normal animal cells (MDCK-canine kidney cells; Vero-monkey kidney cells) and 6 kinds of human tumor cells (A 549, PC 14-lung cancer cells; SNU 1, SNU 16. Mlm 45-stomach cancer cells; HL-60-promyelocytic leukemia cells), through morphological observation and 3H-uracil uptake assay. The degree of susceptibility to infection with T gondii tachyzoites was highest in A 549 and PC 14 cells, medium in Vero, HL-60, MDCK and SNU 1, and lowest in SNU 16 and MBm 45 cells. The kinetics of T gondii multiplication during the post-Infection 60 hours were higllly dependent upon the dose of tachyzoites administered and the duration among the 8 tested fur the growth and multiplication of T gondii in vitro.
Protoplasts were isolated from hypocotyls, cotyledons, and young leaves of Chinese cabbage grown under in vitro environmental condition. An enzyme mixture of 1% Cellulysin and 0.5% Macerozyme in combination with 0.4 M mannitol was most effective condition for protoplast isolation. The highest yield of protoplasts, 7.6$\times$10$^{5}$ protoplast/g of fresh weight, was obtained from the treatment of leaves for 12~16 hours at 27~28$^{\circ}C$ with shaking at 30 rpm. The most suitable medium for an initial cell division was K8p basal medium supplemented with 5 mg/L 2,4-D and 2 mg/L kinetin. Within 7~10 days, protoplasts derived from hypocotyl and cotyledon tissues formed cell colonies. When the cells were grown at the size of 8~10 cells, they were embedded into semi-solid medium containing 0.2% agarose. Calli derived from protoplast culture were transferred to the 100 different types of plant regeneration media, but no completely regenerated plants from inbred lines of Chinese cabbage used for this study wore obtained, though frequent rooting took place in several media tested.
Some properties of malic enzyme (EC 1.1.1.40) prepared from malate-decomposition yeast, Schizosac-charomyces japonicus var. japonicus St-3 were investigated. The activity of malic enzyme was maximum when it was cultured for 24 hours. The optimum conditions for the enzyme reaction were pH 10.0 and temperature of $25^{\circ}C$. The crude enzyme was very stable at the range of pH 7.0-8.4, and almost 50 percent of enzyme activity was lost by heating at $60^{\circ}C$ for 10 minutes. The malic enzyme activity was enhanced by the addition of $Mn^{++}$. But the enzyme activity was not affected by the addition of organic acids, amino acids and ethanol, respectively.
Glyphosate(N-[phosphonomethyl]glycine) applied to the assimilate-exporting leaves or sprayed to the whole plants of tomato(Lycopersicon esculentum Mil var. Moneymaker). Glyphosate induced the rapid accumulation of shikimic acid within 24 h. The accumulation of shikimic acid companied with chlorophyll loss in meristematic leaves, i.e. apical leaves. The chlorosis was acropetal in apical region of young growing leaf. The degradation of chlorophyll seems to be a secondary or tertiary effect of glyphosate. However, the level of shikimic acid accumulated was reduced except for roots and apical leaves from 5 days after treatment. The accumulating levels are considerably differed through the applicated regions. The level of shikimic acid is highest at the apical meristem 4 days after the application to 3rd old leaf.
Humans are environmentally exposed to various electromagnetic fields, but the evaluation of the harmfulness of electromagnetic field and the development of a system therefor are still incomplete. We aimed to develop a system for evaluating biohazard against electromagnetic fields, and to determine biohazard through the system. An extremely-low frequency magnetic field generator was designed and manufactured, and the output reliability of the device was verified. Using this device, the effect on the formation of cellular stress-granules and the cell cycle progression of cells exposed to high magnetic fields of 6 mT and 60 Hz was confirmed. As a result, exposure to high magnetic fields of 6 hr, 12 hr and 36 hr did not affect the formation of cell stress-induced granules and the cell division cycle. These results are an important basis for the determination of biohazard to the extremely-low frequency high magnetic field.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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