Anti-diabetic effects of extracts and fractions of Sasa borealis (SB), white lotus roots (LR) and leaves (LL), and their mixture were determined in 3T3-L1 adipocytes and Min6 cells by investigating insulin-sensitizing activity and glucose-stimulated insulin secretion, respectively. SB, LR, LL, and mixture of SB, LR, and LL (3 : 2 : 3) were extracted using 70% ethanol, and m mixture extract was fractionated by XAD-4 column chromatography with serial mixture solvents of methanol and water. Fractional extractions were utilized for anti-diabetic effect assay. SB and LR extracts increased insulin-stimulated glucose uptake, but not as much as mixture of SB, LR, and LL. Significant insulin-sensitizing activities of 20 and 80% methanol fractions of SB, LR, and LL mixture extract were observed in 3T3-L1 adipocytes, giving 0.5 or $5\;{\mu}g/mL$ each fraction with 0.2 nM insulin to attain glucose uptake level similar to that attained by 10 nM insulin alone. Similar to pioglitazone, peroxisome proliferators-activated $receptor-{\gamma}\;(PPAR-{\gamma})$ agonist, 20 and 80% methanol fractions increased adipocytes by stimulating differentiation from fibroblasts and triglyceride synthesis. LL extract and 20, 60, and 80% methanol fractions of the mixture suppressed ${\alpha}-amylase$ activity, but did not modulate insulin secretion capacity of Min6 cells in both low and high glucose media. These data suggest 20 and 80% methanol tractions contain potential insulin sensitizers with functions similar to that of $PPAR-{\gamma}$ agonist. Crude extract of SB, LR, and LL mixture possibly improves glucose utilization by enhancing insulin-stimulated glucose uptake and inhibiting carbohydrate digestion without affecting insulin secretion in vivo.
In order to know the effects of PCB(Arochlor 1248) on the oocyte maturation and proges-terone(P$_4$) production by FPH(Frog pituitary homogenate: 0.01 p.e/$m\ell$) of frog in vitro, the oocytes were cultured for 20 hours in presence of the PCB at various concentrations and exam-ined their maturation(germinal vesicle breakdown: GVBD) rates and P$_4$ levels secreted by the oocyte in the culture medium. The results show that PCB concentration of 10 ppb suppressed the maturation of the oocytes and secretion of P$_4$. To examine the reversibility of the inhibitory effects, the oocytes were exposed to the PCB only for 3 hours, and then transferred to plain medium and cultured further for 17 hours. The oocytes were recovered from the toxic effect of the PCB when they were exposed to 2.5 ppb, but not to 5 ppb of the PCB. These results indi-cate that PCB suppress the maturation of oocytes and secretion of p, at low concentration, sug-gesting that the frog oocyte culture system can be used as a useful tool to evaluate the toxicity of the pollutants in the environment.
본 연구는 생명공학 관련 기술개발에 의하여 신소재 물질을 생산하고 사람에게 안전하고 생리활성이 높은 고가의 의료용 단백질 생산기술을 체계화하며 형질전환 가축을 이용한 유용물질 생산에 따른 산업화와 부가가치의 극대화에 그 목적이 있다. 유즙으로 사람의 빈혈치료제인 EPO(Erythropoietin)를 분비할 수 있는 형질전환돼지를 생산하기 위하여 WAP(Whey Acidic Protein) Promoter(2.6kb) 하류에 사람의 조혈촉진유전자(EPO: 2.6kb)를 연결시켜 미세주입용 재조합 벡터(WAP-EPO : 약 7.8kb)를 구축하였다. 구축된 재조합 벡터를 1세포기 수정란에 약 2ng/ul 농도로 미세주입한 다음 외과적 방법으로 이식하였다. 이식 후 분만 모돈으로부터 생산된 자돈의 꼬리조직을 이용 게놈DNA를 추출하고 PCR 검정을 한 결과, 유즙으로 사람의 빈혈치료제를 생산할 수 있는 유전자가 도입된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$ (♂)를 확인하였다. 또한 이렇게 꼬리조직으로부터 확인된 새롬이의 혈액과 정액을 채취, 게놈 DNA를 추출하여 외래 유전자 삽입여부를 PCR 방법으로 검정한 결과 꼬리조직과 마찬가지로 혈액 및 정액에서도 외래유전자가 삽입되었음을 확인할 수 있었다. 이렇게 생산된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$를 이용 계대번식을 통한 F$_1$ 산자의 생산과 유전자 전이율을 확인하기 위하여 $\boxDr$새롬이$\boxUl$정액을 이용한 인공수정을 실시하였다. 인공수정은 1999년 7월 1일부터 2000년 9월 8일 까지 총 78두의 모돈을 이용하였으며, 그 중 21두의 모돈이 분만하여 인공수정에 의한 분만율은 26.92%로 나타났다.(Table Omitted) Table 1에서와 같이 새롬이 정액을 이용한 인공수정에 의해 형질전환된 F$_1$ 자돈의 형질전환율은 17.98%로 나타났으며, 32두의 형질전환자돈 중 8두(암:4두, 수:4두)는 분만과 동시에 폐사하였거나 사육중 폐사하여 현재 24두(암:12두, 수:12두)가 생존하여 F$_1$ 간 교배계획에 의해 사육되고 있다. 이 중 암컷 4두는 현재 F$_2$ 자돈 생산과 함께 유즙내로 사람 빈혈치료제의 분비 유무를 검정중에 있으며, FISH 법에 의한 외래 유전자 삽입 검정을 확인 중에 있다.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.2
s.33
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pp.116-131
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2007
황기건중탕은 보비익기(補裨益氣) 및 거습열(祛濕熱)하는 효능(效能)으로 신체(身體)의 허약(虛弱)을 개선하며 염증(炎症)을 유발할 수 있는 외사(外邪)의 침입을 방어하여 인체의 면역기능(免疫機能)을 강화하는 처방으로 면역관련 세포중 하나인 microglial cell를 대상으로 면역세포에 황기건중탕이 어떠한 효능을 발휘하는 지를 살펴보았다. 물로 전탕(煎湯)한 황기건중탕을 여과한 후 실험한 결과 BV2 microglial cells에서 LPS로 자극하여 염증을 유발하는 주요 물질인 NO의 분비를 세포독성 없이 억제하였다. 또한NO를 생성하는 효소인 Cox-2의 발현도 감소시켰다. 그리고 기타 염증전구 물질들이 $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-12도 황기건중탕의 용량이 증가함에 따라 의존적으로 감소함을 알 수 있었다. 이러한 결과를 보아 황기건중탕은 면역관련세포인 microglial cell에서 염증 관련 인자들의 분비 및 생성을 억제를 통하여 면역관련 상태를 개선시키는 것으로 사료된다.
The morphological changes of the midgut epithelium during the metamorphosis of pine caterpillar are observed with light and electron microscope, being divided into 5 stages from the 8th instar larva to just after pupation. The midgut epithelium of 8th instar larva is composed of columnar cell, goblet cell, regenerative cell, and endocrine cell. The secretorials are arranged on the nuclear membrane in the columnar cell of the midgut epithelium in the 8th instar larva, and lysosomes are augmented in the apical portion. Cytoplasmic extrusions are observed in the apical surface of columnar cell but they have no cell organells. Nucleus, mitochondria, rER, Golgi complex, and free ribsomes are observed in the regenerative cell. Regenerative cells are differentiated into the form of goblet cell, and vacuoles are gradually increased in the cytoplasm. Just pupa stage, the materials, which appears to be mainly composed of Ca, are observed in the circular form and goblet cavity of regenerative cell are detached to lumen. As a result, it reflects the process of the degeneration of the midgut epithelium that lysosomes are gradually augmented in the columnar cell, that nuclear materials are removed to cytoplasm, and that cytoplasmic extrusions are observed in the apical surface. And though regenerative cells are differentiated into the form of the goblet cell, it is believed that goblet cavity is detached from regenerative cell to the lumen and midgut epithelium of pupa stage is formed.
One hundred and seventeen colonies were screened for the detection of the production of exodextranase on the dextran-mineral salts medium. Ten colonies out of them produced the dextranase. Flavobacterium multivorum greatly producing the enzyme was isolated from soil, identified and then studied for various biochemical characteristics. The activity of the dextranase in the cultured medium was high between pH8 and 9 at $35^{\circ}C$, and between $45^{\circ}C$ and $55^{\circ}C$ at pH8. By the growth curves the generation times of the bacterium were approximately 52 minutes in the LB broth, 38 minutes in the LB plus 1% dextran and 660 minutes in the dextran-salts. The strain did not have ant plasmid, and was susceptible to genramicin, cotrimoxazole and cefoperazone, and moderately susceptible to chloramphenicol, cefamandole and cefotaxime, but resistant to ampicillin, cephalothin, tetracycline, amikacin and tobramycin.
In this study, a LCH1227 bacterial strain that possesses anti-listerial activity was isolated from fermented food and identified as Lactobacillus salivarius LCH1227 based on its morphological and biochemical properties, as well as its 16S rRNA gene sequences. Anti-listerial substance also inhibited the growth of various Gram-positive bacteria, such as vancomycinresistant Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Bacillus cereus, Lactobacillus fermentum. The highest level of production of antimicrobial substances from L. salivarius LCH1227 occurred during the early stationary phase. The antilisterial activity was found to be stable over a broad range of pH values (2.0-12.0) and after heat treatment. However, it was inactivated by proteolytic enzymes, indicating its proteinaceous nature. The apparent molecular mass of the partially purified anti-listerial substance, as measured by Tricine-SDS-PAGE, was approximately 5 kDa.
The fine structure of the aggregate glands-one of the capture thread producing organs-in the orb web spider, Nephila clavata L.Koch, is studied with light and electron microscopes. Gluey capture threads or sticky spirals of the orb web are originated from the silks of two flagelliform glands and four aggregate glands which are connected to the posterior spinnerets, and the arrangement fo their spigots(large spinning tubes) shows a charaterstic form called "triad". The aggregate galnd is composed of large and multilobed secretory portion and thick excretory duct surrounded by large irregular nodules. The excretory duct of the aggregate galnds basically consists of three superposed types of cells which are inner columnar epithelium, nodule-forming cells and outer connestives. The cuticles of the proximal duct near the secretory portion are composed of endocuticle and exocuticle, whereas ghe distal duct near the spinning tubes has a electron lucent subcuticle which had the functions of water removal and orientation of silk fibers. In the cytoplasmic process of the large and irregular nodule-forming cells surrounded by invaginations of the plasma membranes, numerous mitochondria and glycogen particles are contained. The maturational level of the nodule cells is perceived from the appearence of these cell inclusions. The secretory portion of the glands which porduce the secretory silk material shows two layers of the cells which are simple cuboidal epithelium and several connective layers. In the cytoplasm of the glandular epithelial cell, rough endoplasmic reticulums are well developed, and two types of secretory granules are observed. Between the adjacent epithelial cells, specialized septate junctions are formed along the plasma membranes.membranes.
Rosa rugosa has been used as a folk medicine with various pharmacological properties for a long time in Asia. Recently, it has been reported that the extract of fractions from different parts of Rosa rugosa have various pharmacological effects on diverse diseases including diabetes, inflammatory diseases and tumor. We investigated effects of fructus extracts of Rosa rugosa(RRF) and semen extracts of this herb(RRS) on macrophage to evaluate the possibilities as a biological response modifier. We showed increased effects on tumoricidal activity, phagocytic activity, TNF-$\alpha$ and NO production in RRF-treated groups without direct tumor cell cytotoxicity. RRS-treated groups increased direct tumor cell cytotoxicity at high dose without tumoricial activity except increasing of TNF-$\alpha$ release. These results provide further possibilities for the beneficial immunomodulating effects of RRF on immune system with relatively larger safety margin rather than RRS.
Diversities of lipid compositions according to the morphological differences of the Panax ginseng root were studied by means of column, thin layer, gas-liquid chromate-graphies and histochemical stainings. Purified lipids from various parts were 1.08-2.23% of dry weight, of which 64.2-73.5% were neutral lipids, 15.4-17.4% were glycolipids and 10.4-19.2% were phospholipids. Especially the contents of neutral lipids were highest in cortex, suggesting to be the presence of lipid ducts only in cortex. Triglycerides, sterol esters and hydrocarbons were abundant in the neutral lipid fractions. Twelve components were identified in the periderm and cortex, but unidentified II, IV and V components were not present in the medulla. The major components of glycolipid freactions were sterol glycoside, digalactosyl diglyceride and esterified sterol glucoside. Phosphatidyl glycerol, phosphatidyl choline and phosphatidyl ethanolamine were major components of phospholipid fractions, And phosphatidyl choline was extreamly much in the periderm and medulla, but phosphatidyl glycerol was largest in quantity in the cortex. Eighteen kinds of fatty acids were identified in the neutral lipid, glycolipid and phospholipid fractions. Linoleic, palmitic, oleic and linolnic acids were the main components of fatty acids. The contents of saturated fatty acids, unsaturated fatty acids and essential fatty acids of each three fractions were different one another regardless of the Periderm, cortex and medulla.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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